【摘要】：銀屑病是免疫系統(tǒng)過度激活引起的皮膚慢性炎癥疾病,皮膚中的炎癥因子作用于角質(zhì)形成細(xì)胞和免疫細(xì)胞,導(dǎo)致炎性細(xì)胞浸潤和持續(xù)炎癥反應(yīng)。雖然目前認(rèn)為的白細(xì)胞介素23-白細(xì)胞介素17A軸是銀屑病的主要發(fā)病機(jī)制之一,但是銀屑病作為一個(gè)多因素多步驟多環(huán)節(jié)的疾病,其具體發(fā)病機(jī)制至今尚不明確。角質(zhì)形成細(xì)胞是皮膚表皮中最主要的組成細(xì)胞,通過其表面表達(dá)的各種模式識(shí)別受體感受外界環(huán)境的各種刺激,在不同應(yīng)激狀態(tài)下產(chǎn)生各種細(xì)胞因子和趨化因子,調(diào)控皮膚的免疫應(yīng)答,發(fā)揮重要的免疫監(jiān)視作用,影響皮膚相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展。FXYD3,是一種Na,K-ATP酶的特異性輔助亞基,主要在各種類型的上皮細(xì)胞中表達(dá),有研究表明FXYD3在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中有著重要調(diào)控作用。FXYD3在皮膚組織中有較高的表達(dá),但是其在皮膚免疫中的作用從未有報(bào)道,本研究中我們旨在探討角質(zhì)形成細(xì)胞中FXYD3對(duì)炎癥的調(diào)控作用及其機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)在人和小鼠銀屑病的皮膚表皮中,FXYD3表達(dá)顯著升高。我們構(gòu)建了角質(zhì)形成細(xì)胞中特異性敲除FXYD3(K14creFXYD3f/f)的小鼠,通過涂抹咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)軟膏誘導(dǎo)銀屑病模型,研究FXYD3在角質(zhì)形成細(xì)胞中的功能和對(duì)于銀屑病發(fā)生發(fā)展的調(diào)控作用。角質(zhì)形成細(xì)胞中特異敲除FXYD3對(duì)于小鼠免疫細(xì)胞的發(fā)育并無影響,但在誘導(dǎo)銀屑病模型后能顯著減輕皮膚炎癥反應(yīng),表現(xiàn)為表皮增厚減少,炎癥因子和趨化因子表達(dá)減少,炎癥細(xì)胞浸潤減少等。IL-17A和TNF-α刺激體外培養(yǎng)的小鼠原代角質(zhì)形成細(xì)胞和人角質(zhì)形成細(xì)胞NHEK細(xì)胞系,FXYD3缺失對(duì)IL-17A促角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖作用并無影響,但能減少CXCL1、CXCL2、CXCL8、CXCL10和CCL20等趨化因子的表達(dá),減少角質(zhì)形成細(xì)胞的活化和S100A8、S100A9等抗菌肽的產(chǎn)生。分子機(jī)制方面,我們發(fā)現(xiàn)干擾FXYD3的表達(dá)能抑制IL-17A和TNF-α誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)NF-κB和P38、ERK、JNK等MAPK信號(hào)通路的活化。IP實(shí)驗(yàn)表明在NHEK細(xì)胞系中,FXYD3與IL-17A受體和TNF-α受體均有結(jié)合,且IL-17A和TNF-α刺激均能引起FXYD3與相應(yīng)受體的結(jié)合增多。因此,FXYD3在角質(zhì)形成細(xì)胞中可能是通過與細(xì)胞膜上的受體復(fù)合物結(jié)合來發(fā)揮作用的。上述研究結(jié)果顯示,FXYD3能夠調(diào)控角質(zhì)形成細(xì)胞的趨化因子表達(dá)能力,從而在小鼠銀屑病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的促進(jìn)作用。我們的研究為揭示FXYD3在皮膚天然免疫中的作用增加了新的認(rèn)識(shí),為FXYD3這個(gè)分子的功能研究提供了新的視角,也對(duì)銀屑病的診治提供了新的潛在靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R758.63
【圖文】：

３．１邋ＦＸＹＤ３在臨床銀屑病患者和小鼠銀屑病模型的皮膚組織中表徶逡逑升高逡逑為了探究ＦＸＹＤ３在銀屑病發(fā)病過程中表達(dá)水平是否有變化，我們收集了臨床逡逑銀肩病患者的銀屑病部位皮膚組織樣本，同時(shí)我們通過在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠背部以及逡逑雙耳連續(xù)５天涂抹T兀ǎ桑恚椋瘢酰椋恚錚�，邋ＩＭＱ）却X喙菇誦∈笠疾∧Ｐ停郟玻叮藎義先緩笫占∈笠疾∑し糇櫓荊哉廡┭窘校疲兀伲模車拿庖咦榛舊�。瘟x義廈欠⑾鄭疲兀伲模吃諞疾∑し舨課壞謀澩锪拷險(xiǎn)Ｆし糇櫓猩擼ㄍ跡保粒�。日d義蝦笪頤翹崛×誦∈蟊巢懇約八鈉し糇櫓崛。遙危兩徊窖櫓�，实时荧光定量辶x希校茫醫(yī)峁允荊疾∑し舨課壞模疲兀伲模沖澹恚遙危戀謀韽姿澆險(xiǎn)Ｆし糇櫓麇義舷隕擼ㄍ跡保攏Ｕ廡┙峁崾疚頤牽疲兀伲模吃諞疾〉姆⑸⒄構(gòu)討鋅贍芊⒒渝義獻(xiàn)乓歡ǖ牡骺刈饔謾ｅ義

本文編號(hào)：2725531