發(fā)布時間：2020-06-05 01:42

【摘要】：研究背景 脫發(fā)是一種多原因引起的無年齡、無性別差異的疾病。盡管患者無明顯自覺癥狀，但因影響美觀而迫切要求治療。根據(jù)患者的情況和要求在臨床上多采用自體毛發(fā)移植的方法進行治療，但在治療同時面臨著毛發(fā)供體來源不足、各個部位毛發(fā)供體生長情況不同等問題。細胞培養(yǎng)技術(shù)與毛發(fā)組織工程學為毛發(fā)移植提供了新的思路。毛囊的毛乳頭細胞因為其在毛囊的生長發(fā)育，周期調(diào)控及維持毛發(fā)生長中的主導作用而成為研究的熱點。研究發(fā)現(xiàn)毛乳頭細胞是通過分泌多種生長因子、細胞因子來誘導毛囊的生長發(fā)育的，例如它分泌IGF-1、FGF-1、SCF、HGF、KGF等多種與毛囊形成有關(guān)的因子。毛乳頭細胞表面還存在多種特異性標記，這些標記與毛乳頭控制毛囊的生長發(fā)育有密切的關(guān)系。因此建立毛乳頭細胞體外培養(yǎng)模型，，詳盡地了解毛乳頭細胞體外培養(yǎng)生長特點，以及如何誘導毛囊的發(fā)生，無疑是研究毛乳頭細胞的重要方面。目前多采用膠原酶消化法分離毛乳頭，此法將分離的毛囊直接加膠原酶消化，在解剖顯微鏡下將毛乳頭撿出，顯著降低了勞動強度，獲得了大量的毛乳頭細胞。但是毛乳頭細胞在培養(yǎng)基上體外培養(yǎng)增殖緩慢，其誘導毛囊形成的能力隨培養(yǎng)時間而削弱，體外培養(yǎng)10代以上的毛乳頭細胞常常失去其誘導能力，從而限制了毛乳頭細胞的研究應用。如何改進毛乳頭細胞的培養(yǎng)條件成為需要解決的一個問題。 外根鞘是毛囊結(jié)構(gòu)的重要組成部分，它與皮膚基底層相延續(xù)，創(chuàng)面的愈合主
【圖文】：

正在膠原酶中消化的毛乳頭(倒置顯微鏡，X100)

但是它在不同培養(yǎng)基中的生長情況是不同的。接種到含有100mULFcS的DMEM培養(yǎng)基上培養(yǎng)，18一24h開始貼壁，24h后貼壁率僅為20%一25%，以梭形為主(圖2)。再培養(yǎng)10一12d才開始傳代，傳代次數(shù)少于10代。而接種到DPCM培養(yǎng)基上培養(yǎng)，過夜后(12一16h)便可見細胞從毛乳頭組織中遷出、貼壁(貼壁率約為75%一80%)呈放射狀向四周生長，形態(tài)不規(guī)則，以多角形為主(圖3)。8一10d即可進行傳代，傳代次數(shù)可達到18一20代。隨著培養(yǎng)時間的延長，特別是第2一4代，融合的細胞形成多層凝集細胞團結(jié)構(gòu)(凝集性生長)(圖4)。表現(xiàn)為:中央?yún)^(qū)細胞呈角形、多角形出現(xiàn)多層化，并向上堆積，周圍區(qū)細胞則呈梭形，形態(tài)類似DFC
【學位授予單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R758.71

【參考文獻】

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本文編號：2697298