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聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)血管炎性皮膚病皮損中分枝桿菌16SrRNA基因和結(jié)核桿菌DNA的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-27 00:44
【摘要】: 目的:分析分枝桿菌感染在結(jié)節(jié)性紅斑、結(jié)節(jié)性血管炎、硬紅斑、變應(yīng)性血管炎發(fā)病中的作用,以期發(fā)現(xiàn)治療這些疾病的有效途徑。 方法:選擇結(jié)節(jié)性紅斑、結(jié)節(jié)性血管炎、變應(yīng)性血管炎各20例,硬紅斑10例,男33例,女37例,年齡21~65歲,平均39.7歲,病程2月~2年。所有檢測(cè)標(biāo)本均為皮膚活檢的石蠟標(biāo)本,時(shí)間為2001年~2007年。共設(shè)計(jì)2對(duì)引物,分枝桿菌16SrRNA基因共同引物為5,-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3,和5,-TGCACACAGGC CACAAGGGA-3,,擴(kuò)增產(chǎn)物為1030bp。特異的結(jié)核分枝桿菌復(fù)合物IS6110引物為5,-CCTGCGAGCGTAGGCGTCGG-3,和5,-CTCGTCCAGC GCCGCTTCGG-3,,擴(kuò)增產(chǎn)物為123bp。陽(yáng)性對(duì)照為凍干皮內(nèi)注射用卡介苗。選擇20例正常皮膚組織的活檢石蠟標(biāo)本作為陰性對(duì)照。提取石蠟標(biāo)本中分枝桿菌DNA,置于聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)反應(yīng)儀行分枝桿菌DNA擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物行瓊脂糖凝膠電泳,紫外燈下觀察, 1030bp及123bp處出現(xiàn)條帶,為陽(yáng)性。采用Fisher確切概率法檢驗(yàn)。 結(jié)果:1. 20例結(jié)節(jié)性紅斑中2例分枝桿菌16SrRNA基因檢測(cè)和結(jié)核桿菌DNA檢測(cè)均陽(yáng)性。2. 20例結(jié)節(jié)性血管炎中2例分枝桿菌16SrRNA基因檢測(cè)陽(yáng)性,所有標(biāo)本結(jié)核桿菌DNA檢測(cè)均為陰性。3.10例硬紅斑中分枝桿菌16SrRNA基因及結(jié)核桿菌DNA檢測(cè)均為陰性。4.20例變應(yīng)性血管炎中分枝桿菌16SrRNA基因檢及結(jié)核桿菌DNA檢測(cè)均為陰性。四組疾病與分枝桿菌之間無(wú)顯著性差異(P0.05),與結(jié)核分枝桿菌之間無(wú)顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論:1.尚不能認(rèn)為結(jié)節(jié)性紅斑、結(jié)節(jié)性血管炎、硬紅斑、變應(yīng)性血管炎與分枝桿菌感染有關(guān)。 2.尚不能認(rèn)為結(jié)節(jié)性紅斑、結(jié)節(jié)性血管炎、硬紅斑、變應(yīng)性血管炎與結(jié)核桿菌感染有相關(guān)性。
【圖文】:

分枝桿菌,桿菌,引物,對(duì)分


23圖 1. 分枝桿菌 16SrRNA 引物對(duì)分枝桿菌 DNA 的鑒定 M: Marker, 1:陽(yáng)性對(duì)3、11、12、20、21、29、30、38、39、47、48、56、57、65、66、74、75、陰性對(duì)照Fig.1 Identification of DNA of Mycobacterium in vascular dermatoses Sam2-91

結(jié)核分枝桿菌,結(jié)核分枝桿菌DNA,引物,陽(yáng)性對(duì)照


24圖 2 結(jié)核分枝桿菌 IS6110 引物對(duì)結(jié)核分枝桿菌 DNA 的鑒定 M: Marker,1:陽(yáng)照,2、3、11、12、20、21、29、30、38、39、47、48、56、57、65、66、74、83、84:陰性對(duì)照Fig.2 Identification of DNA of Mycobacterium tuberculosis in vascular dermaSamples from 2-91
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號(hào)】:R758.6

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本文編號(hào):2682665

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