【摘要】： 背景:紫外線對(duì)皮膚曬傷、皮膚炎癥、皮膚老化及皮膚癌的發(fā)生有重要影響。按波長(zhǎng)長(zhǎng)短紫外線可分為長(zhǎng)波紫外線(UVA,320-400nm)、中波紫外線(UVB,280-320nm)和短波紫外線(UVC,200-280nm)。文獻(xiàn)報(bào)道紫外線能影響皮膚細(xì)胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)的表達(dá)。成纖維細(xì)胞是皮膚的重要細(xì)胞。本研究課題組在先前的工作中已通過(guò)雙向凝膠電泳和MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)發(fā)現(xiàn)100mJ/cm~2UVB照射48小時(shí)前后人皮膚成纖維細(xì)胞中存在33個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn),并鑒定了其中的7種蛋白:表達(dá)上調(diào):Vimentin(波形蛋白)、Death receptor-interacting protein(死亡受體反應(yīng)蛋白R(shí)IP)、IL-1 receptor accessory protein(白介素1受體輔助蛋白IL-1 RAcP)、Prohibitin(抑制素)、Prolyl 4-hydroxylase(脯氨酰羥化酶PHD4);表達(dá)下降:Annexin A2(膜聯(lián)蛋白2)、PGK1(磷酸甘油酸激酶)。采用Western-blot及免疫熒光技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Vimentin和RIP在UVB照射后在細(xì)胞內(nèi)的含量顯著上升;prohibitin、IL-1 RAcP、PHD4細(xì)胞內(nèi)含量變化未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 目的:采用RT-PCR方法檢測(cè)在培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞中經(jīng)紫外線照射后AnnexinA2、PGK1的mRNA表達(dá)的變化,以尋找紫外線早期損傷標(biāo)志。 方法:用健康男性包皮組織體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞,用100mJ/cm~2UVB照射培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,48小時(shí)后提取細(xì)胞總RNA,RT-PCR后進(jìn)行紫外熒光顯像,以ANX2、PGK1與β-actin的mRNA條帶灰度比值用SPSS軟件進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果:UVB照射后成纖維細(xì)胞中PGK1 mRNA表達(dá)下調(diào),且具有顯著性差異(p＜0.05)。 結(jié)論:PGK1 mRNA很有可能是紫外線早期損傷的標(biāo)志。
【圖文】：

5一6為照射后細(xì)胞總RNA M1234567M圖2l、2為PGKI6為照射后、UVB照射對(duì)ANXZ、 PGK1mRNA表達(dá)的影響照射后、前328bp產(chǎn)物，3、4為照射后、前 ANxZ336bp產(chǎn)物，月日p一aCtlflZosbp產(chǎn)物，7為未加引物陰性對(duì)照，M為DL600的DNA

實(shí)驗(yàn)結(jié)果R半定量測(cè)定UVB照射對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞包皮來(lái)源的原代皮膚成纖維細(xì)胞傳代至第uvB照射，未照射細(xì)胞為對(duì)照，，照射后48測(cè)ANXZ、PGKImRNA的表達(dá)情況，用凝膠，結(jié)果如下所示:
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類(lèi)號(hào)】：R751

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳斌;畢志剛;;中波紫外線輻射前、后角質(zhì)形成細(xì)胞蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜的差異分析[J];臨床皮膚科雜志;2006年04期

2 陳柳青;曾學(xué)思;孫建方;;石蠟包埋皮膚組織標(biāo)本中提取RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR的研究[J];中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志;2006年01期

3 陳斌;畢志剛;;UVA輻射前后成纖維細(xì)胞蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜的差異分析[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;2006年03期

4 白雪,李世擁,安萍,于波,蔡慧云;結(jié)直腸癌原發(fā)灶和肝轉(zhuǎn)移灶組織中蛋白質(zhì)組差異表達(dá)及臨床意義[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年30期

5 翟自立,尤紀(jì)青,郭惠芳,焦佩英,梅靜艷,肖樹(shù)華;蒿甲醚對(duì)日本血吸蟲(chóng)磷酸葡萄糖變位酶、醛縮酶、磷酸甘油酸變位酶和烯醇化酶的影響[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2000年06期

本文編號(hào)：2661712