【摘要】： 目的：用PCR技術(shù)比較分離自同一家庭內(nèi)的紅色毛癬菌病不同個體間的菌株差異性，分析在家庭內(nèi)發(fā)生的紅色毛癬菌病的菌株是來自家庭內(nèi)部成員(家內(nèi)感染)，還是由家庭成員以外的途徑感染(家外感染)。 方法：以患有皮膚癬菌病的家庭成員為研究對象，刮取患者皮損鱗屑用20％KOH涂片鏡檢查真菌，鏡檢陽性標(biāo)本進(jìn)一步接種在沙堡培養(yǎng)基上。培養(yǎng)陽性的分離株先以觀察菌落形態(tài)、顯微鏡下結(jié)構(gòu)及生理生化鑒別試驗等傳統(tǒng)方法鑒定菌種；同一家庭內(nèi)不同患者間致病菌同種，再分別用通過4條引物的隨機擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)分析和特異擴(kuò)增紅色毛癬菌的串聯(lián)重復(fù)亞元件(TRSS：TRS-1/TRS-2)產(chǎn)生的PCR指紋圖譜比較，分析種內(nèi)有無株間差異性。 結(jié)果：共有8個家庭，每個家庭有2人同時患病(16例患者)，從其皮損中分離出的皮膚癬菌用形態(tài)學(xué)等方法鑒定均為紅色毛癬菌。用RAPD分析發(fā)現(xiàn)4個家庭內(nèi)的菌株間有差異。擴(kuò)增TRS-1區(qū)產(chǎn)生的菌株特異性PCR指紋圖譜類型最多，，擴(kuò)增產(chǎn)物示5個家庭內(nèi)菌株有株間差異，用擴(kuò)增TRS-2區(qū)能鑒定出2個家庭菌株間有差異。綜合各種分型方法顯示8個家庭中有6個家庭的家庭成員之間的菌株不相同，只有2個家庭的患者間菌株未區(qū)分出株間差異。 結(jié)論：1．特異性擴(kuò)增TRS-1區(qū)產(chǎn)生的PCR指紋圖譜對紅色毛癬菌的菌株區(qū)分度高于RAPD，更適合用于紅色毛癬菌種內(nèi)株間分型。2．只要有一種菌株分型方法的結(jié)果體現(xiàn)出株間有差異，那么比較的菌株對就不是同一株菌。 3．多種分型方法相結(jié)合可最大限度的發(fā)現(xiàn)不同菌株間的差異。用RAPD分析與TRSS的PCR指紋圖譜分析相結(jié)合的方法，發(fā)現(xiàn)8個家庭中有6個家庭(占75％)內(nèi)患病成員間致病菌有株問差異，提示紅色毛癬菌病不僅可從家內(nèi)成員感染(2／8)，還可從家外途徑感染，且后者的發(fā)生率更高(6／8)。
【圖文】：

a圖2一4b

--2在PDA上8個家庭的16株菌菌落背面呈酒紅色或褐色25℃7d
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R756

【參考文獻(xiàn)】

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1 朱紅梅,廖萬清,戴建新,李志剛,吳建華,溫海;用微小衛(wèi)星引物PCR鑒定紅色毛癬菌和須癬毛癬菌[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2001年03期

2 樊建峰,李恒進(jìn),索繼江,李若瑜,萬U

本文編號：2651327