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紅色毛癬菌病家庭成員中不同個(gè)體間菌株差異性分析

發(fā)布時(shí)間:2020-05-06 13:20
【摘要】: 目的:用PCR技術(shù)比較分離自同一家庭內(nèi)的紅色毛癬菌病不同個(gè)體間的菌株差異性,分析在家庭內(nèi)發(fā)生的紅色毛癬菌病的菌株是來自家庭內(nèi)部成員(家內(nèi)感染),還是由家庭成員以外的途徑感染(家外感染)。 方法:以患有皮膚癬菌病的家庭成員為研究對(duì)象,刮取患者皮損鱗屑用20%KOH涂片鏡檢查真菌,鏡檢陽性標(biāo)本進(jìn)一步接種在沙堡培養(yǎng)基上。培養(yǎng)陽性的分離株先以觀察菌落形態(tài)、顯微鏡下結(jié)構(gòu)及生理生化鑒別試驗(yàn)等傳統(tǒng)方法鑒定菌種;同一家庭內(nèi)不同患者間致病菌同種,再分別用通過4條引物的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)分析和特異擴(kuò)增紅色毛癬菌的串聯(lián)重復(fù)亞元件(TRSS:TRS-1/TRS-2)產(chǎn)生的PCR指紋圖譜比較,分析種內(nèi)有無株間差異性。 結(jié)果:共有8個(gè)家庭,每個(gè)家庭有2人同時(shí)患病(16例患者),從其皮損中分離出的皮膚癬菌用形態(tài)學(xué)等方法鑒定均為紅色毛癬菌。用RAPD分析發(fā)現(xiàn)4個(gè)家庭內(nèi)的菌株間有差異。擴(kuò)增TRS-1區(qū)產(chǎn)生的菌株特異性PCR指紋圖譜類型最多,,擴(kuò)增產(chǎn)物示5個(gè)家庭內(nèi)菌株有株間差異,用擴(kuò)增TRS-2區(qū)能鑒定出2個(gè)家庭菌株間有差異。綜合各種分型方法顯示8個(gè)家庭中有6個(gè)家庭的家庭成員之間的菌株不相同,只有2個(gè)家庭的患者間菌株未區(qū)分出株間差異。 結(jié)論:1.特異性擴(kuò)增TRS-1區(qū)產(chǎn)生的PCR指紋圖譜對(duì)紅色毛癬菌的菌株區(qū)分度高于RAPD,更適合用于紅色毛癬菌種內(nèi)株間分型。2.只要有一種菌株分型方法的結(jié)果體現(xiàn)出株間有差異,那么比較的菌株對(duì)就不是同一株菌。 3.多種分型方法相結(jié)合可最大限度的發(fā)現(xiàn)不同菌株間的差異。用RAPD分析與TRSS的PCR指紋圖譜分析相結(jié)合的方法,發(fā)現(xiàn)8個(gè)家庭中有6個(gè)家庭(占75%)內(nèi)患病成員間致病菌有株問差異,提示紅色毛癬菌病不僅可從家內(nèi)成員感染(2/8),還可從家外途徑感染,且后者的發(fā)生率更高(6/8)。
【圖文】:

紅色毛癬菌病家庭成員中不同個(gè)體間菌株差異性分析


a圖2一4b

酒紅色,菌落,褐色


--2在PDA上8個(gè)家庭的16株菌菌落背面呈酒紅色或褐色25℃7d
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號(hào)】:R756

【參考文獻(xiàn)】

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1 朱紅梅,廖萬清,戴建新,李志剛,吳建華,溫海;用微小衛(wèi)星引物PCR鑒定紅色毛癬菌和須癬毛癬菌[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年03期

2 樊建峰,李恒進(jìn),索繼江,李若瑜,萬U

本文編號(hào):2651327


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