【摘要】： 絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，介導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、凋亡等多種生理過(guò)程，還參與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化等病理過(guò)程。已發(fā)現(xiàn)真核細(xì)胞存在細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶/應(yīng)激激活蛋白激酶(JNK/SAPK)、p38/再活化激酶(p38/RK)和大絲裂原活化蛋白激酶(BMK1/ERK5)四條MAPK通路。 ERK和p38是分布于細(xì)胞漿內(nèi)具有絲氨酸和酪氨酸雙重磷酸化能力的蛋白激酶，是MAPK細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中重要的成員。已證實(shí)，p38在鱗癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中高度激活，ERK在胰腺癌等病中高度激活。當(dāng)HSV、HIV、EBV等病毒感染時(shí)，p38明顯激活。 尖銳濕疣(CA)是由人類乳頭瘤病毒(HPV)感染引起的性傳播疾病(STD)。常見的是HPV6型或11型感染。HPV6、11型致癌性較小，形 2003年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士論文 成的是局部鱗狀上皮過(guò)度增生，如 CA、尋常疣等，而 HPV、侶型感染 易引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，與宮頸癌等生殖器癌的發(fā)生密切相關(guān)。己有研究表 明，HPV型感染時(shí)，MAPK活性增加；HPV EIE4蛋白通過(guò)PKA和MAPK 途徑磷酸化；HPV16ES基因產(chǎn)物能通過(guò)表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）依賴 途徑激活ERK和促細(xì)胞增殖，還能通過(guò)非EGFR途徑激活ERKI／二和 p3 SMAPK。國(guó)內(nèi)外有關(guān) CA的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究尚少，深入探討 CA 的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理，對(duì)尋找有效阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的位點(diǎn)，開發(fā)特異性 蛋白激酶抑制劑，有望對(duì)CA的防治提供新的治療前景。 為了研究尖銳濕疣皮損角質(zhì)形成細(xì)胞中活化型激酶 ERK（磷酸化 E叫，pERK）和活化型激酶p38（磷酸化p38，pp38）的表達(dá)，本課題 采用免疫組化 En Vision二步法檢測(cè) 50例 CA皮損及 25例健康男性正常包 皮組織中 pERK和 pq38的表達(dá)情況。通過(guò)分析pERK和 pp3s的表達(dá)， 以進(jìn)一步了解pERK和pp38在CA細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的意義。 材料與方法 收集CA標(biāo)本50例，經(jīng)原位雜交方法確定HPV 6／11陽(yáng)性，即為HPV6／11 相關(guān) CA。采用免疫組化法（En Vsion二步法）檢測(cè) CA皮損中和 25例正 常人皮膚（包皮）組織中 pERK和 p下3 8的表達(dá)及分布。所用的一抗分別 為：活化型ERK單抗和活化型p38單抗。實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷：在上皮層細(xì)胞核 有明確棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞。按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比，用四級(jí)半定量法評(píng)估 陽(yáng)性反映強(qiáng)度。統(tǒng)計(jì)處理采用等級(jí)分組資料的Ridit檢驗(yàn)。對(duì)CA組PERK 和 pp3 8的表達(dá)進(jìn)行計(jì)數(shù)資料相關(guān)性分析。 3 2003年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士論文 結(jié) 果 1．原位雜交結(jié)果： CA組皮損內(nèi)大量棘細(xì)胞中上層及顆粒層細(xì)胞的核顯示藍(lán)紫色顆 粒，即為 HPV 6／l感染陽(yáng)性。正常對(duì)照組 25例上皮組織未見陽(yáng)性信 號(hào)，示HPV陰性。 2．pE隊(duì)和 pp3 8表達(dá)的免疫組化染色結(jié)果： 50例＊A患者皮損，p＊RK的表達(dá)較正常皮膚明顯增高，統(tǒng)計(jì)學(xué) 上有顯著性差異（u＝4．113，P＜0刀1）。陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于棘細(xì)胞層， 尤以空泡細(xì)胞為著。陽(yáng)性信號(hào)定位于胞核，為棕黃色著色。 扣例CA患者皮損，pp38的表達(dá)較正常皮膚有明顯增高，統(tǒng)計(jì) 學(xué)上有顯著性差異…一．497，p叩刀1卜 陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于棘細(xì)胞層， 尤以空泡細(xì)胞為著。陽(yáng)性信號(hào)也定位于胞核，為棕黃色著色。 3．CA中 PERK和 pp3 8表達(dá)的相關(guān)性分析： 對(duì)50例CA中pERK和pp38的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析，，0．42， P功刀1，從而得出結(jié)論，pERK與pp38的表達(dá)呈顯著相關(guān)性。 討論與結(jié)論 卜本研究結(jié)果顯示，HPV6門 陽(yáng)性的CA中，pE皿和p？38的表達(dá) 較正常皮膚明顯增高，，提示在 HPV6／l感染時(shí)，角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi) ERK和 P38的激活增加。在 HPV6＊ 感染的 MAPK細(xì)胞信號(hào)通路中，至少通過(guò) ERK和 p38二條通路起作用。由此推測(cè) HPV的某些基因或蛋白可通過(guò)影 響MA K通路的這二個(gè)環(huán)節(jié)，從而改變宿主細(xì)胞的生物學(xué)特性，如細(xì)胞增 殖或轉(zhuǎn)錄等的改變。 4 2003年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士論文 2、HPV6n 感染CA皮損中，pE肌與p巾38的表達(dá)呈顯著相關(guān)性， （r＝0．42，P＜0刀1＞提示HPV6／11感染時(shí)，E皿和 p38二條MAPK通路同 時(shí)受到協(xié)同激活，并可能均參與HPV感染細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄表達(dá)改變和增殖活性 改變，進(jìn)而參與致病機(jī)制。
【圖文】：

-ERK在正常對(duì)照組中的弱陽(yáng)性表達(dá)((EnVision二步法X200

年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士論文圖11p一P38在正常對(duì)照組中的弱陽(yáng)性表達(dá)(EnVioion二步法又200)圖12P-p38在正常對(duì)照組中的陰性表達(dá)(Envision二步法X200)30
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R752.53

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 蘇明,程浩;蛋白激酶JNK、p38與皮膚病[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(皮膚性病學(xué)分冊(cè));2003年05期

2 蒙雅萍;李倪;;人乳頭瘤病毒E5的研究進(jìn)展[J];中國(guó)婦幼健康研究;2006年03期

3 侯瀟瀟;江彤;蔣欣泉;陳傳俊;;HPV16型E5基因?qū)θ擞郎谇簧掀ぜ?xì)胞E6、E7基因表達(dá)的影響[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2011年04期

4 楊娥,楚雍烈,劉文康,曹春霞;宮頸癌組織中人乳頭瘤病毒16型E5基因的變異[J];微生物學(xué)雜志;2001年04期

5 胡曉繼;廖書杰;王世宣;馬丁;;人乳頭瘤病毒E5的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展;2008年11期

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1 侯瀟瀟;HPV16型E5基因?qū)θ擞郎谇簧掀ぜ?xì)胞E6/E7基因表達(dá)的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：2639603