【摘要】： 理想的皮膚替代物應(yīng)包括由活性細胞構(gòu)建所形成的表皮和真皮兩部分，移植到實驗動物后其表皮與真皮的生長、分化和緩慢再構(gòu)建可恢復(fù)正常皮膚的結(jié)構(gòu)。本實驗采用免疫組化方法研究復(fù)合殼多糖人工皮膚移植實驗家兔后表皮層角蛋白分化標志的變化及血管和基底膜的形成情況，以了解復(fù)合殼多糖人工皮膚移植后表皮的分化和真皮的再構(gòu)建情況，為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 方法：分別將復(fù)合殼多糖人工皮膚移植前、移植后1月、移植后2月、正常人皮膚、正常兔皮膚石蠟塊切片，分為實驗組和陽性、陰性對照組，抗廣譜角蛋白抗體免疫組化染色觀察表皮層角蛋白的表達情況；抗角蛋白K5和K10單克隆抗體免疫組化染色鑒別基底層細胞和基底層上細胞以了解表皮分化情況；抗第Ⅷ因子多克隆抗體和抗層粘連蛋白多克隆抗體免疫組化染色分別標記血管內(nèi)皮細胞和基底膜，了解血管和基底膜的形成情況。 結(jié)果： 1. 復(fù)合殼多糖人工皮膚移植前、移植后1月及2月表皮層廣譜角蛋白抗體免疫組化染色陽性，與正常皮膚相似。 2. 復(fù)合殼多糖人工皮膚移植前表皮細胞角蛋白K10抗體和角蛋白K5抗體免疫組化染色均為陽性，后者的染色較淺；移植后1月及2月基底層以上細胞角蛋白K10抗體免疫組化染色陽性，且越接近表皮表面染色越深，與正常人皮膚相似，基底層細胞角蛋白K10抗體免疫組化染色陰性�；讓蛹毎堑鞍譑5抗體免疫組化染色弱陽性，弱于正常人皮膚，基底層以上細胞角蛋白K5抗體免疫組化染色陰性。 WP=8 3. 復(fù)合殼多糖人工皮膚移植前真皮基質(zhì)內(nèi)第Ⅷ因子抗體免疫組化染色陰性；移植后1月及2月真皮內(nèi)第Ⅷ因子抗體免疫組化染色陽性，可見較多新生血管，以移植后1月明顯，且真皮淺層血管數(shù)量較正常皮膚多。此外，移植后1月及2月部分區(qū)域基底層細胞胞膜第Ⅷ因子抗體免疫組化染色也為陽性。 4. 復(fù)合殼多糖人工皮膚移植前層粘連蛋白抗體免疫組化染色陰性，，且基底細胞未見染色；移植后1月及2月部分表、真皮交界處層粘連蛋白抗體免疫組化染色陽性，可見不連續(xù)的基底膜，而基底層細胞胞和部分基底層以上細胞的胞膜及胞漿層粘連蛋白抗體免疫組化染色陽性。正常皮膚中可見完整、連續(xù)的基底膜，基底細胞未見染色。此外，移植后1月及2月真皮內(nèi)血管基底膜層粘連蛋白免疫組化染色陽性，可見較多新生血管，與第Ⅷ因子抗體免疫組化染色結(jié)果相似。 5. 陰性對照組中抗體免疫組化染色均為陰性。 結(jié)論：復(fù)合殼多糖人工皮膚移植實驗家兔后表皮層均有角蛋白表達，有增生性細胞和分化細胞，表皮分化良好。真皮內(nèi)新生血管明顯，達到了血管重建。部分區(qū)域表真皮交界處有基底膜形成。雖然基底膜的形成是斷續(xù)、不完整的，但總體上復(fù)合殼多糖人工皮膚移植實驗家兔后再構(gòu)建良好，與正常人皮膚相似，是人皮膚的有用替代物，臨床應(yīng)用前景較大。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R751.05

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本文編號：2638479