發(fā)布時間：2020-04-09 19:10

【摘要】：【目的】研究SIRTs在銀屑病中的表達水平是否有變化,為銀屑病的臨床治療及預(yù)后評估奠定理論基礎(chǔ)�！痉椒ā�1.動物模型:用咪喹莫特乳膏(明欣利迪)或生理鹽水涂抹BABL/c小鼠背部7天,第8天處死小鼠取小鼠背部皮膚。2.細(xì)胞實驗:TNF-α誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞。3.臨床病例收集:根據(jù)患者年齡、性別、標(biāo)本采集部位收集臨床嚴(yán)重銀屑病(PASI10)標(biāo)本和良性對照標(biāo)本。另外,搜集銀屑病及皮膚良性病變蠟塊。4.利用實時熒光定量PCR技術(shù)、免疫蛋白印跡技術(shù)檢測SIRTs mRNA及其蛋白水平的差異性表達。5.利用免疫熒光技術(shù)檢測SIRTs蛋白的差異性表達及SIRTs在細(xì)胞中的主要定位。6.統(tǒng)計學(xué)分析。【結(jié)果】1.小鼠銀屑病模型表明,BABL/c小鼠背部有明顯的紅斑、鱗屑和炎癥.2.TNF-α誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞結(jié)果表明:細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞間隙發(fā)生表觀學(xué)改變。3.實時熒光定量PCR技術(shù)、免疫蛋白印跡技術(shù)和免疫熒光技術(shù)結(jié)果表明SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4和SIRT5 mRNA和蛋白表達水平降低,而SIRT6和SIRT7呈上升趨勢。4.免疫熒光技術(shù)顯示SIRT1、SIRT2既存在于細(xì)胞質(zhì)也存在于細(xì)胞核,SIRT3、SIRT4和SIRT5主要存在于細(xì)胞質(zhì),SIRT6和SIRT7主要在細(xì)胞核;此外,SIRTs在表皮的表達量高于真皮組織。【結(jié)論】SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4和SIRT5在銀屑病皮損及TNF-α誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞中較正常對照組表達量降低,而SIRT6和SIRT7表達水平則呈上升。
【圖文】：

圖 1 TNF-α 在銀屑病發(fā)病機制中的作用。病原相關(guān)分子模式（PAMP）或病毒與表皮的TLR 和 NLR 結(jié)合后通過 MyD88 途徑和非 MyD88 途徑激活 MAP 激酶和 NF-КB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，然后刺激表皮細(xì)胞產(chǎn)生 TNF-α 等細(xì)胞因子，產(chǎn)生的細(xì)胞因子特別是 TNF-α 反作用于上皮，刺激上皮表達 MHC-Ⅱ、ICAM-Ⅰ、EGFR、K17、IAP 等，，此時由于上皮細(xì)胞表達了 MHC-Ⅱ

圖 2 細(xì)胞增值與毒性實驗（CCK8 實驗）。經(jīng) TNF-α 誘導(dǎo)后多的時間點是 24 小時。Fig.2. Cell proliferation and toxicity experiment (CCK8 expof the large number of HaCaT cells that were induced by TNF- al
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R758.63

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本文編號：2621151