【摘要】： 前言 近年來(lái)，隨著生物技術(shù)的發(fā)展，關(guān)于HLA-G(human leukocyte antigen-G，HLA-G)的研究突飛猛進(jìn)。大量研究表明，HLA-G是一種免疫耐受分子，它與許多臨床常見問題有著密切的聯(lián)系。目前，對(duì)HLA-G分子免疫調(diào)節(jié)作用的研究已從母胎免疫耐受擴(kuò)展到腫瘤免疫、抗感染免疫、器官移植免疫和自身免疫性疾病等領(lǐng)域，并取得了令人矚目的成果，顯示了HLA-G在免疫相關(guān)疾病中的廣泛應(yīng)用前景。HLA-G除了能夠遞呈內(nèi)源性抗原肽外，在調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞的分化成熟，NK及T細(xì)胞的功能等方面也有重要作用。 銀屑病是一種常見并易復(fù)發(fā)的慢性炎癥性皮膚病，估計(jì)總患病率為0.123％。雖然該病的皮損是以表皮角朊細(xì)胞的快速增殖為特征，但是有數(shù)據(jù)證明它是由T細(xì)胞介導(dǎo)的。此外，最近的研究更加強(qiáng)調(diào)自然殺傷細(xì)胞受體(NKRs)在銀屑病中的潛在作用。這些NKRs能夠識(shí)別多種Ⅰ類等位基因，而其結(jié)合可以下調(diào)多種淋巴細(xì)胞活性。HLA-G是一種非經(jīng)典主要組織相容性抗原復(fù)合物(MHC)Ⅰ類分子，可抑制一些組織如細(xì)胞滋養(yǎng)層和胸腺上皮細(xì)胞的作用。HLA-G與不同的NKRs相互作用，例如ILT2，KIR2 DL4，p49能夠抑制NK和T細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，同樣也能抑制T細(xì)胞增殖。HLA-G能夠下調(diào)多種淋巴細(xì)胞反應(yīng)，從而使銀屑病的發(fā)病率降低。 目前，國(guó)外HLA-G的相關(guān)研究工作主要集中在母胎免疫耐受、抗病毒感染免疫、腫瘤免疫、器官移植免疫和自身免疫等方面的研究，涉及皮膚組織免疫方面的還很少。本研究用HLA-G抗體通過免疫組織化學(xué)的方法來(lái)標(biāo)記HLA-G在正常皮膚及尋常型銀屑病皮損中的表達(dá)和分布，探討HLA-G在正常皮膚及尋常型銀屑病中的生物學(xué)意義。 材料及方法 一、實(shí)驗(yàn)材料 1、正常皮膚 23例正常成人皮膚來(lái)自皮膚外科手術(shù)患者，男15例，女8例。平均年齡42.65±20.12。其中面部9例，頸部2例，胸部1例，背部3例，腰腹部3例，四肢5例。取材部位無(wú)腫瘤及炎癥性皮膚病損害。 2、尋常型銀屑病皮損 21例尋常型銀屑病皮損來(lái)自我院門診病理活檢病例，均經(jīng)臨床、組織病理檢查確定診斷。其中男14例，女7例，平均年齡37.43±22.09。其中頭部1例，頸部2例，軀干6例，四肢11例，外陰1例。 二、主要試劑和來(lái)源 純化鼠抗人HLA-G單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)BD Biosciences公司。 三、實(shí)驗(yàn)方法 1、免疫組織化學(xué)染色 采用鏈霉卵白素標(biāo)記的親合素、生物素法(LAB-SA)，以3-氨基-9-乙基咔唑(AEC)顯色。顯色后，以蘇木素復(fù)染。 2、結(jié)果判定 細(xì)胞膜和或細(xì)胞漿中出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性細(xì)胞。每張陽(yáng)性切片選取5個(gè)陽(yáng)性細(xì)胞最多且非連續(xù)的高倍視野(×400)計(jì)數(shù)。參照Ozdemir等的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)按照染色強(qiáng)度及染色細(xì)胞百分率進(jìn)行評(píng)分。染色強(qiáng)度積分：不染色為0，輕度染色為1，中度染色為2，，強(qiáng)染色為3。染色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)分0-3級(jí)：細(xì)胞染色＜5％為0，6％-25％為1，26％-50％為2，＞51％為3。每張切片染色程度得分與染色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)相乘，為其最后得分。0-1分為(-)；2-3分為(+)；4-6分為(++)；7-9分為(+++)。 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSS14.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用非參數(shù)檢驗(yàn)用于處理有序分類資料的統(tǒng)計(jì)分析方法——Ridit分析。 結(jié)果 23例正常皮膚中，HLA-G在表皮中陽(yáng)性表達(dá)22例，陽(yáng)性率為95.65％，主要分布在表皮的角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)中，尤以細(xì)胞膜最為明顯；在真皮乳頭層及網(wǎng)狀層中的毛細(xì)血管和小血管內(nèi)皮細(xì)胞中可見HLA-G的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)；在毛囊、皮脂腺中也可見HLA-G的表達(dá)。21例尋常型銀屑病表皮中，HLA-G陽(yáng)性表達(dá)11例，陽(yáng)性率為52.38％，其分布與它在正常表皮中的分布情況相似。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，R=0.2029，P＜0.05，HLA-G在尋常型銀屑病表皮與正常表皮中的表達(dá)差異有顯著性。 結(jié)論 1、正常皮膚組織中普遍存在HLA-G的表達(dá)。 2、尋常型銀屑病的發(fā)病與HLA-G在其表皮中的表達(dá)下調(diào)相關(guān)。
【圖文】：

正常皮膚組織中，HLA一G在真皮網(wǎng)狀層小血管內(nèi)皮細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá)(AECX200)

正常皮膚組織中，HLA一G在皮下脂肪層小血管內(nèi)皮細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá)(AECX400)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R758.63

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本文編號(hào)：2614935