本文關(guān)鍵詞：脈沖染料激光處理后的人臍靜脈內(nèi)皮細胞株VEGF的mRNA表達、凋亡情況以及透射電鏡觀察，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景及目的 皮膚血管瘤是由血管發(fā)育異常形成的,是臨床上嬰幼兒最常見的良性腫瘤,以內(nèi)皮細胞過度增殖為特征,常見于嬰幼兒,有一定的自愈率。目前已發(fā)現(xiàn)多種促血管生成因子和抑血管生成因子在血管瘤的發(fā)生、發(fā)展及消退中發(fā)揮重要作用,多數(shù)學者認為VEGF是血管瘤形成的直接促進因素,它的持續(xù)高表達與否是決定血管形成的主要因素。 目前針對淺表性血管瘤的應用最廣泛、療效較為確切的治療方法為激光療法。臨床中應用最多的激光類型為波長為585nm-595nm的脈沖染料激光。該型號激光的靶色基是增生血管血液中紅細胞的氧合血紅蛋白,氧合血紅蛋白吸收光能并轉(zhuǎn)化為熱能,實現(xiàn)對血紅蛋白的熱凝固作用導致血管閉塞,同時熱量傳導至周圍的血管壁,造成血管的損傷。使血管缺血缺氧促進血管瘤進入凋亡期。 血管瘤血管內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)是研究血管形成的重要手段和步驟,因人臍靜脈內(nèi)皮細胞系具有增殖力強的特點,故可以應用于血管瘤的體外實驗的研究。 既然激光在血管瘤的治療中起到了重要的作用,那么其作用的可能機制是什么?通過激光處理人臍靜脈內(nèi)皮細胞能夠達到什么樣的效果呢?能否通過這個方案來研究脈沖染料激光治療血管瘤的機制?本文通過使用脈沖染料激光處理人臍靜脈內(nèi)皮細胞,研究激光干預后細胞的生長及凋亡情況,并探討其對細胞mRNA表達的影響。 方法 使用波長為585nm的脈沖燃料激光對體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞株進行干預,在血管瘤常規(guī)治療激光能量密度范圍內(nèi)刺激細胞,并用流式細胞技術(shù)觀察細胞的凋亡情況,通過透射電鏡觀察細胞的超微結(jié)構(gòu)變化,運用Realtime-PCR技術(shù),檢測激光干預后血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達情況。 結(jié)果 1.人臍靜脈內(nèi)皮細胞株的培養(yǎng)及形態(tài)觀察 經(jīng)過體外培養(yǎng)后的人臍靜脈內(nèi)皮細胞在形態(tài)上與正常皮膚血管內(nèi)皮細胞無明顯差異,可穩(wěn)定傳代,可作為本實驗理想的實驗對象。 2.激光治療血管瘤的過程中VEGF mRNA的表達 RT-PCR顯示,在常規(guī)治療激光能量密度范圍內(nèi)處理過的人臍靜脈內(nèi)皮細胞與未經(jīng)處理的人臍靜脈內(nèi)皮細胞相比,VEGF mRNA的表達均有所下降,而且下降程度隨著能量密度的增強而有不同程度的增加。 3.流式細胞技術(shù)檢測激光處理后人臍靜脈內(nèi)皮細胞株的凋亡情況 常規(guī)治療能量密度4J/cm2-8J/cm2范圍內(nèi),染料激光促進內(nèi)皮細胞凋亡。 4.激光處理后內(nèi)皮細胞株的電鏡觀察 被脈沖燃料激光處理后的內(nèi)皮細胞不同程度地失去正常的形態(tài),細胞核、細胞器、細胞膜等出現(xiàn)不同程度的損傷,這表明細胞不同程度的處于變性和壞死階段。 結(jié)論及意義 本實驗通過利用脈沖染料激光干預體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞,利用分子生物學技術(shù)、細胞生物學技術(shù),對激光干預后的細胞進行研究,得出以下結(jié)論： 1.染料激光干預細胞后,抑制細胞VEGF mRNA的表達 2.染料激光干預能夠促進人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡 3.染料激光干預對細胞的超微結(jié)構(gòu)有負性影響 4.染料激光可以通過對內(nèi)皮細胞和VEGF mRNA的影響而達到治療血管瘤的目的
【關(guān)鍵詞】：血管瘤 人臍靜脈內(nèi)皮細胞株 激光治療 VEGF 細胞培養(yǎng) 凋亡 透射電鏡
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 符號說明11-12
• 前言12-14
• 實驗一 人擠靜脈內(nèi)皮細胞株的培養(yǎng)、形態(tài)觀察和處理14-18
• 一、材料與設(shè)備14
• 二、實驗方法及步驟14-18
• 實驗二 脈沖染料激光對人擠靜脈內(nèi)皮細胞VEGF的mRNA表達的影響18-23
• 一、材料與設(shè)備18-19
• 二、實驗方法19-21
• 三、實驗結(jié)果21-23
• 實驗三 流式細胞技術(shù)檢測激光處理后肪靜脈內(nèi)皮細胞株的調(diào)亡情況23-26
• 一、相關(guān)試劑23
• 二、相關(guān)器械及耗材23
• 三、操作步驟23-24
• 四、實驗結(jié)果24-26
• 實驗四 激光處理后的人臍靜脈內(nèi)皮細胞株的透射電鏡觀察26-31
• 一、實驗材料26
• 二、實驗步驟26
• 三、實驗結(jié)果26-31
• 討論31-38
• 結(jié)論38
• 創(chuàng)新性及不足38-39
• 綜述39-47
• 參考文獻43-47
• 致謝47-48
• 學位論文評閱及答辯情況表48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 卜戰(zhàn)云;;局部注射曲安萘德治療眼部毛細血管瘤[J];醫(yī)藥論壇雜志;2007年06期

2 嚴后友;許成蓉;;Glut-1和VEGF在血管瘤和血管畸形中的表達及意義[J];中國美容醫(yī)學;2007年03期

  本文關(guān)鍵詞：脈沖染料激光處理后的人臍靜脈內(nèi)皮細胞株VEGF的mRNA表達、凋亡情況以及透射電鏡觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：257612