不同臨床型別申克孢子絲菌黑素含量的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-03-18 03:01
本文關(guān)鍵詞:不同臨床型別申克孢子絲菌黑素含量的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:孢子絲菌病是一種由雙相病原真菌申克孢子絲菌感染引起的亞急性或慢性深部真菌病。臨床上主要表現(xiàn)為皮膚病變,又稱皮膚型孢子絲菌;少數(shù)發(fā)生在免疫受損患者內(nèi)臟的孢子絲菌病又稱系統(tǒng)性孢子絲菌病,可侵犯肺、骨骼、眼、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心、肝、脾、胰、腎、睪丸及甲狀腺等器官。孢子絲菌病的不同臨床表現(xiàn)取決于申克孢子絲菌菌株的不同毒力因素以及宿主的不同免疫狀態(tài)。 黑色素自從被發(fā)現(xiàn)作為真菌毒力因子以來(lái),至今已在真菌毒力的研究中占有越來(lái)越重要的位置。黑色素可以保護(hù)真菌對(duì)抗惡劣環(huán)境,如抗離子輻射、抗氧化、抗紫外線以及抗極端溫度,同時(shí)還起到抗宿主細(xì)胞吞噬作用以及降低抗真菌藥的抗真菌作用等。針對(duì)申克孢子絲菌的研究發(fā)現(xiàn),黑色素有助于保護(hù)申克孢子絲菌,使其對(duì)抗紫外線輻射的能力增強(qiáng),并通過(guò)降低巨噬細(xì)胞吞噬作用以及清除活性氧、NO等物質(zhì)影響宿主的防御機(jī)制,且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提示黑色素的存在或許使菌體更容易在宿主組織內(nèi)入侵與傳播。 黑色素在真菌致病過(guò)程中起著重要的作用,研究黑色素與真菌致病毒力之間的關(guān)系,是研究真菌發(fā)病機(jī)制和真菌耐藥性等的重要工具。測(cè)量真菌黑色素含量的不同,并進(jìn)一步驗(yàn)證其與真菌毒力的關(guān)系,有助于真菌發(fā)病機(jī)制的研究。 目的:通過(guò)對(duì)不同臨床型別申克孢子絲菌菌株在相同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)黑色素含量的測(cè)量并分析其差異性,試圖了解申克孢子絲菌黑色素含量與其不同臨床表現(xiàn)的相關(guān)性,進(jìn)而分析黑色素對(duì)菌株致病力的影響。 方法:將41株申克孢子絲菌臨床分離菌株(固定型20株,淋巴管型20株,播散型1株)在沙氏培養(yǎng)基上25℃室溫下分別培養(yǎng)1周和2周,將培養(yǎng)的菌株制備菌懸液,過(guò)濾獲得孢子,應(yīng)用真菌/酵母黑色素含量比色法定量檢測(cè)試劑盒進(jìn)行黑色素含量測(cè)定。測(cè)得資料應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)菌株在沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平皿上室溫培養(yǎng),生長(zhǎng)迅速,3-4天即可見(jiàn)菌落生長(zhǎng),菌落初為白色或奶油色,呈光滑或褶皺狀的濕潤(rùn)的菌落,一些菌株很快開(kāi)始出現(xiàn)淺褐色至黑色不等的色素,菌落顏色加深,形成典型咖啡色絲狀菌落;一些菌株產(chǎn)生色素則較慢,僅菌落四周少量暗色素,菌落大部分仍為近奶油色。將菌落黑化程度分級(jí),固定組與淋巴管組分級(jí)結(jié)果沒(méi)有顯著差異(P0.05)。對(duì)41株不同型別的臨床分離申克孢子絲菌菌株室溫下分別培養(yǎng)1周和2周,對(duì)菌落分生孢子的黑色素含量進(jìn)行測(cè)量,結(jié)果顯示相同培養(yǎng)時(shí)間下各組菌株黑色素含量測(cè)量結(jié)果無(wú)顯著差異(P0.05);對(duì)于同一菌株,在不同培養(yǎng)時(shí)間下測(cè)量結(jié)果不同,培養(yǎng)2周的測(cè)量值高于培養(yǎng)1周的測(cè)量值(P0.05)。不同菌株黑色素測(cè)量結(jié)果與菌落黑化程度的相關(guān)性不顯著(P0.05)。 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)中41株申克孢子絲菌臨床分離株均產(chǎn)生黑色素,培養(yǎng)1周和2周時(shí)間其分生孢子平均黑色素含量分別為7.10±1.31μg/107cell和7.81±1.38μg/107cell;本實(shí)驗(yàn)中固定組與淋巴管組相同培養(yǎng)時(shí)間下黑色素含量無(wú)顯著差異;同一菌株經(jīng)過(guò)不同培養(yǎng)時(shí)間,其產(chǎn)生黑色素含量不同,培養(yǎng)2周黑色素含量高于培養(yǎng)1周的黑色素含量;菌落黑化程度與黑色素含量測(cè)量結(jié)果無(wú)明顯相關(guān)性;經(jīng)過(guò)反復(fù)傳代,菌落顏色逐漸變淺。
【關(guān)鍵詞】:申克孢子絲菌 孢子絲菌病 黑素 含量
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R756
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-9
- 中英文縮略詞9-10
- 目錄10-12
- 第1章 緒論12-19
- 1.1 孢子絲菌病12-14
- 1.2 影響孢子絲菌毒力的因素14-16
- 1.2.1 黑色素14-15
- 1.2.2 粘附力因素15-16
- 1.2.3 過(guò)氧化麥角甾醇16
- 1.2.4 耐熱性16
- 1.2.5 相關(guān)蛋白16
- 1.3 病原真菌黑色素16-19
- 1.3.1 黑色素理化性質(zhì)及分類17
- 1.3.2 致病真菌黑色素的作用機(jī)制17-19
- 第2章 材料與方法19-23
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料19-20
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株19
- 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑19
- 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器19-20
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-22
- 2.2.1 培養(yǎng)基配制20
- 2.2.2 菌株培養(yǎng)20
- 2.2.3 孢子懸液制備20-21
- 2.2.4 黑色素提取21
- 2.2.5 黑色素溶液吸光度測(cè)定21
- 2.2.6 黑色素含量計(jì)算21-22
- 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理22-23
- 第3章 結(jié)果23-26
- 3.1 臨床分離菌株培養(yǎng)結(jié)果23
- 3.2 觀察菌落黑化程度23-24
- 3.3 黑色素含量測(cè)定結(jié)果24
- 3.4 黑色素含量測(cè)量值與菌落黑化程度的相關(guān)性分析24-26
- 第4章 討論26-30
- 第5章 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-37
- 附錄37-38
- 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間取得的科研成果38-39
- 后記和致謝39
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條
1 譚靜文;劉偉;萬(wàn)U,
本文編號(hào):253801
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