【摘要】：銀屑病是臨床常見的慢性易復(fù)發(fā)的紅斑、鱗屑性疾病。本病臨床可分為尋常型、關(guān)節(jié)病型、紅皮病型、膿皰型4個(gè)類型。病程慢性,反復(fù)發(fā)作。其發(fā)病機(jī)理尚未完全明確。目前研究認(rèn)為銀屑病的發(fā)病機(jī)制主要是由輔助性Th細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子介導(dǎo)的以角質(zhì)形成細(xì)胞為靶點(diǎn)的炎癥反應(yīng)。Th22細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的CD4+輔助性T細(xì)胞亞群,在銀屑病外周血中高表達(dá),其主要細(xì)胞因子為IL-22。通過其實(shí)現(xiàn)相關(guān)生物學(xué)功能。在銀屑病病人外周血及皮損中IL-22水平和銀屑病的嚴(yán)重程度呈明顯的正相關(guān)。我們的前期研究表明肝素結(jié)合表皮生長因子樣生長因子(heparin-binding epidermal-growth-factor-like growth factor,HB-EGF)在銀屑病表皮KC異常增殖和其轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮重要作用。本課題的前期研究表明IL-22可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)Ha Ca T細(xì)胞表達(dá)HB-EGF,但作用機(jī)制未明,絲裂原活化蛋白激酶(MAPK-ERK1/2)通路和轉(zhuǎn)錄激活因子途徑(JAK/STAT)這兩種信號通路在銀屑病發(fā)病機(jī)制中起不可或缺作用。他扎羅汀誘導(dǎo)基因3(Tazarotene-induced gene 3,TIG3)是一種腫瘤抑制因子。TIG3可以調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和分化,在銀屑病表達(dá)降低。綜上所述,我們推測IL-22促KC分泌HB-EGF可能與MAPK-ERK1/2和JAK/STAT這兩條信號通路有關(guān),且與TIG3表達(dá)異常存在一定關(guān)系。IL-22通過促進(jìn)HB-EGF表達(dá),抑制TIG3表達(dá)參與銀屑病發(fā)生、發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)研究IL-22促HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF作用機(jī)制及對HaCaT細(xì)胞分泌TIG3的影響。目的:研究白介素22(Interleukin-22,IL-22)對角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)HB-EGF的作用機(jī)制和對TIG3表達(dá)影響及作用機(jī)制。方法:1、以不同濃度(12.5μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L)IL-22和PBS作用于Ha Ca T細(xì)胞24小時(shí)后,提取細(xì)胞總蛋白,用Western blot法檢測IL-22對細(xì)胞MAPK-ERK1/2和JAK/STAT這兩條信號通路的影響;應(yīng)用相關(guān)信號通路阻斷劑PD98059和AG490與IL-22作用于Ha Ca T細(xì)胞后分別提取干預(yù)后細(xì)胞總蛋白及總m RNA,用Western blot法、ELISA法和實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測其對Ha Ca T細(xì)胞分泌HB-EGF的影響。應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P0.05認(rèn)為有顯著性差異。2、應(yīng)用咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠背部皮膚產(chǎn)生銀屑病樣皮損,然后皮損處皮下注射1μg IL-22,48h后處死小鼠,取下背部皮膚,HE染色觀察小鼠皮膚的改變,免疫組化觀察HB-EGF的表達(dá)。3、用不同濃度(12.5μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L)IL-22和應(yīng)用相關(guān)信號通路阻斷劑PD98059和AG490與IL-22處理Ha Ca T細(xì)胞,對照組用等量PBS處理,應(yīng)用免疫熒光法檢測細(xì)胞內(nèi)TIG3蛋白的表達(dá)位置,分別提取干預(yù)后的細(xì)胞總蛋白及總m RNA,用Western blot法、ELISA法和實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測其對Ha Ca T細(xì)胞分泌TIG3的影響。應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P0.05認(rèn)為有顯著性差異。結(jié)果:1、IL-22可誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞MAPK信號通路中P-ERK1/2蛋白的增加和JAK2/STAT3信號通路中P-JAK2和P-STAT3蛋白的升高。加入信號通路特異性抑制劑PD98059及AG490后HB-EGF蛋白和m RNA的表達(dá)較IL-22干預(yù)組明顯降低。2、咪喹莫特持續(xù)作用于Bal B/c小鼠背部,可以成功誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣皮損,IL-22皮下注射可引起正常Bal B/c小鼠背部及銀屑病小鼠皮膚表皮中HB-EGF表達(dá)的升高。3、IL-22可引起Ha Ca T細(xì)胞中TIG3蛋白水平的降低,其作用的強(qiáng)度與濃度有關(guān):不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞分泌TIG3的量均較對照組降低,且隨著IL-22濃度的升高,其對TIG3表達(dá)的抑制作用逐漸增強(qiáng)。應(yīng)用信號通路特異性抑制劑PD98059及AG490后IL-22對TIG3抑制作用較IL-22組減少。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:IL-22可以引起Ha Ca T細(xì)胞中MAPK-ERK1/2和JAK2/STAT3這兩條信號通路激活。IL-22誘導(dǎo)Ha Ca T細(xì)胞產(chǎn)生HB-EGF蛋白的作用機(jī)制可能與MAPK-ERK1/2和JAK2/STAT3這兩條信號通路有關(guān)。IL-22可引起B(yǎng)al B/c小鼠背部正常皮膚及銀屑病樣皮損表皮中HB-EGF表達(dá)的升高。IL-22可以抑制Ha Ca T細(xì)胞中TIG3表達(dá),抑制作用的強(qiáng)度與IL-22濃度有關(guān),作用機(jī)制可能與MAPK-ERK1/2和JAK2/STAT3信號通路有關(guān)。
[Abstract]:Psoriasis is a common chronic recurrence of erythema and scaly disease. This disease can be divided into 4 types: common type, arthropathy, erythroderma type and pustular type. The pathogenesis is chronic and recurrent. The pathogenesis of this disease is not completely clear. At present, the pathogenesis of psoriasis is mainly attributed to auxiliary Th cells and related cell causes. An inflammatory response.Th22 cell targeting keratinocyte as a target is a newly discovered CD4+ auxiliary T cell subgroup, highly expressed in the peripheral blood of psoriasis, and its main cytokine is IL-22. through which the related biological functions are realized. In the peripheral blood and skin lesions of psoriasis patients, the IL-22 level and the severity of psoriasis are obvious. Our previous study shows that heparin binding to epidermal growth factor like growth factor (heparin-binding epidermal-growth-factor-like growth factor, HB-EGF) plays an important role in the abnormal proliferation and prognosis of epidermal KC in psoriasis. Previous studies in this study show that IL-22 can induce Ha Ca T cell expression in vitro. EGF, but the mechanism of action is not clear, the mitogen activated protein kinase (MAPK-ERK1/2) pathway and the transcription activating factor pathway (JAK/STAT) are the two signaling pathways that play an indispensable role in the pathogenesis of psoriasis. The gene 3 (Tazarotene-induced gene 3, TIG3) is a tumor suppressor,.TIG3, which regulates the keratinocyte The proliferation and differentiation of psoriasis and the decrease of expression in psoriasis. In summary, we speculate that IL-22 promoting KC secretion may be related to the two signaling pathways of MAPK-ERK1/2 and JAK/STAT, and that there is a certain relationship between TIG3 expression and.IL-22 by promoting HB-EGF expression and inhibiting the TIG3 expression to participate in the occurrence and development of silver chip disease. This experiment studies IL-22 promoting HaCaT thin. The mechanism of cell secretion of HB-EGF and its effect on the secretion of TIG3 by HaCaT cells. Objective: To study the mechanism of the action of interleukin 22 (Interleukin-22, IL-22) on the expression of HB-EGF in keratinocytes and the mechanism of its effect on the expression of TIG3. Methods: 1, IL-22 and 24 hours are used at different concentrations (12.5 mu g/L, 25 u g/L, 50 mu g/L, 100 mu g/L). After that, the total protein of cell was extracted and the effects of IL-22 on the two signal pathways of MAPK-ERK1/2 and JAK/STAT were detected by Western blot, and the total protein and total m were extracted after the action of PD98059 and AG490 and IL-22 on Ha Ca T cells. The effect of transcriptional polymerase chain reaction (RT-PCR) on the secretion of HB-EGF in Ha Ca T cells was detected. SPSS 17 statistical software was used for statistical processing. P0.05 found a significant difference in.2. Imiquimod induced psoriasis like skin lesions in the skin of mice on the back, and then subcutaneous injection of 1 UU IL-22,48h to kill the mice and take the lower back. Skin, HE staining was used to observe the changes in the skin of mice. The expression of HB-EGF was observed by immunohistochemical staining,.3, with the different concentrations (12.5 g/L, 25 g/L, 50, g/L, 100 g/L) IL-22 and the application related signaling pathway blockers, PD98059 and AG490 and IL-22. Location, the total protein and total m RNA were extracted, and the effect of Western blot, ELISA and real-time fluorescent quantitative RT-PCR on the secretion of TIG3 was detected by Ha Ca T cell. The SPSS 17 statistical package was used for statistical processing. The increase of K1/2 protein and the increase of P-JAK2 and P-STAT3 protein in the JAK2/STAT3 signaling pathway. The expression of HB-EGF protein and m RNA after adding signal pathway specific inhibitor PD98059 and AG4 90 is significantly lower than that in IL-22 intervention group. Imiquimod continues to act on the back of Bal mice, and can induce psoriasis like skin lesions in mice. The expression of HB-EGF in the skin epidermis of normal Bal B/c mice and psoriasis mice increased by.3. IL-22 could cause the decrease of TIG3 protein level in Ha Ca T cells. The intensity and concentration of its action were related to the concentration of TIG3 in the cells of different concentrations of IL-22 treatment group than that of the control group. The inhibitory effect of expression was gradually enhanced. The inhibitory effect of PD98059 and IL-22 on TIG3 decreased compared with the IL-22 group. The difference was statistically significant. Conclusion: IL-22 can cause MAPK-ERK1/2 and JAK2/STAT3 in Ha Ca T cells to induce two signaling pathways to induce the effect of.IL-22 cells. The mechanism may be related to the two signaling pathways of MAPK-ERK1/2 and JAK2/STAT3 that.IL-22 can cause the HB-EGF expression in the normal skin of Bal B/c mice and the HB-EGF expression in the epidermis of psoriasis like skin lesions. The.IL-22 can inhibit TIG3 expression in Ha Ca T cells. The inhibitory effect is related to the IL-22 concentration. The mechanism of action may be associated with the letter and the letter The number path is related.
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R758.63

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳京海,金嵐,吳惠t ,秦立模,朱麗芬,吳文媛,秦萬章;可溶性細(xì)胞粘附分子表達(dá)與銀屑病疾病活動(dòng)的相關(guān)性[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2000年04期

2 張曉紅,瞿幸,周志強(qiáng),牛福林,張建中;消銀解毒飲對銀屑病患者鱗屑白介素8的影響[J];中華皮膚科雜志;2000年02期

3 劉濤峰,張學(xué)軍,楊森,王福喜,魏生才,陳珊宇;銀屑病誘發(fā)因素的病例對照研究[J];中華皮膚科雜志;2000年05期

4 張力軍,楊雪琴,樊建勇,劉秀清;銀屑病患者血漿血管緊張素Ⅱ水平檢測[J];中華皮膚科雜志;2000年06期

5 馮素英,靳培英;飲酒和銀屑病[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2000年04期

6 孫軍紅,方躍明,鄭茂榮;銀屑病與中性粒細(xì)胞趨化因子[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2000年05期

7 李占國,秦社玲,張素紅,張長軍;整體綜合思維在銀屑病診治中的應(yīng)用[J];皮膚病與性病;2000年02期

8 曹序浦;老藥新用治療銀屑病[J];天津藥學(xué);2000年03期

9 陳英,智強(qiáng),朱年春;重組人白細(xì)胞介素-10對銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞的作用[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2000年04期

10 霍秀琪;銀屑病治療的進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)文選;2000年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 范斌;李斌;;銀屑病與肥胖新進(jìn)展[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

2 范平;張禁;黎超;;127例長期緩解的銀屑病共同點(diǎn)調(diào)查分析[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

3 鄭厚峰;;根據(jù)三個(gè)基因分類的銀屑病臨床特征比較[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

4 涂彩霞;齊曉怡;;銀屑病治療的整體觀——生活方式和飲食[A];2010全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 楊雪琴;;對銀屑病30年的研究和認(rèn)識[A];中華醫(yī)學(xué)會第16次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會摘要集[C];2010年

6 付翔宇;陳宏;;銀屑病的危險(xiǎn)因素(摘要)[A];第五屆全國中西醫(yī)結(jié)合變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

7 王剛;;特殊類型銀屑病的治療[A];2011全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

8 沙海松;;陳凱教授對銀屑病的中西醫(yī)治療經(jīng)驗(yàn)[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會學(xué)術(shù)會議、國家中醫(yī)藥管理局繼續(xù)教育項(xiàng)目——銀屑病中醫(yī)藥防治交流會暨趙炳南學(xué)術(shù)思想高級研修班論文集[C];2011年

9 樊建勇;楊雪琴;張力軍;劉秀清;;銀屑病患者血中糖皮質(zhì)激素及其受體mRNA的測定及其意義[A];2001年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

10 潘德海;張曉艷;鄭占財(cái);劉永生;;染發(fā)劑過敏誘發(fā)銀屑病8例[A];第一屆全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2001年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 蒲成學(xué);煙酒與銀屑病[N];中藥報(bào);2000年

2 牧童;銀屑病怎樣防[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2007年

3 記者嚴(yán)少衛(wèi);銀屑病診治應(yīng)重視心理疏導(dǎo)[N];健康報(bào);2009年

4 本報(bào)記者 海霞　吳大衛(wèi) 夏廈;關(guān)愛銀屑病患者[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2009年

5 郭艷麗;引起銀屑病的4大因素[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

6 本報(bào)記者 徐亞靜;銀屑病寧可不治莫亂治[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

7 山西省晉中市第三人民醫(yī)院 張英棟;治銀屑病當(dāng)重療心[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2010年

8 記者 顧泳;上海銀屑病發(fā)病率約0.2%[N];解放日報(bào);2010年

9 山西中醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 張英棟;從系統(tǒng)理論解讀汗對銀屑病防治的重要性[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2012年

10 記者 田雅婷;我國銀屑病患者僅15%接受正規(guī)治療[N];光明日報(bào);2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 楊海平;銀屑病激發(fā)因素的調(diào)查與防治對策的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1999年

2 李龍年;漢族人群與歐美人群銀屑病易感基因的遺傳異質(zhì)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 金海蓉;白藜蘆醇脂質(zhì)體凝膠對小鼠銀屑病模型的治療及經(jīng)皮給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 徐麗敏;銀屑病細(xì)胞因子異常表達(dá)及相關(guān)藥物的研究[D];天津大學(xué);2007年

5 陳靜;銀屑病患者皮損和外周血中漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞，TLR9、IRF-7、IFN-αmRNA表達(dá)研究[D];華中科技大學(xué);2008年

6 高春芳;轉(zhuǎn)化生長因子βs及受體在銀屑病皮損和外周血中的表達(dá)與意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

7 唐玲;銀屑病患者朗格漢斯細(xì)胞異常機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 李波;銀屑病與腫瘤壞死因子基因多態(tài)性相關(guān)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2002年

9 陳小紅;β-溶血性鏈球菌、結(jié)核分支桿菌與銀屑病相關(guān)性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

10 孫聯(lián)文;抗銀屑病相關(guān)藥物及化合物對花生四烯酸系統(tǒng)中5-脂氧合酶代謝途徑的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李懷軍;銀屑病臨床相關(guān)因素的回顧性分析[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2009年

2 羅慶;銀屑病社會心理因素調(diào)查研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

3 吉莉;銀屑病患者的疾病感知和應(yīng)激、應(yīng)對[D];華東師范大學(xué);2009年

4 任為;IL23R基因多態(tài)性與漢族人銀屑病易感性關(guān)聯(lián)分析研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

5 田雅;527例銀屑病住院患者臨床分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2009年

6 趙艷霞;銀屑病的發(fā)病與治療的回顧性分析[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

7 劉愛花;銀屑病危險(xiǎn)因素研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

8 梁興龍;62例銀屑病住院患者回顧性臨床分析[D];汕頭大學(xué);2011年

9 李俊麗;銀屑病治療現(xiàn)狀及進(jìn)展[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

10 呂艷;阿維A對銀屑病患者血脂影響的回顧性分析[D];鄭州大學(xué);2015年

，

本文編號：2128668