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  本文關(guān)鍵詞：不同臨床型別孢子絲菌與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白粘附力的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《吉林大學(xué)》 2015年

不同臨床型別孢子絲菌與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白粘附力的研究

畢云斐  

【摘要】：孢子絲菌病(sporotrichosis)是由孢子絲菌(Sporothrix)感染引起的一種皮膚科較常見的良性亞急性或慢性深部真菌病，該病不僅可引起皮膚病變，亦可導(dǎo)致粘膜、骨骼甚至內(nèi)臟等系統(tǒng)性病變。孢子絲菌病的臨床表現(xiàn)與真菌感染的嚴(yán)重程度有關(guān)，主要取決于病原真菌的數(shù)量、真菌的毒力、傷口處理方法及機體免疫力強弱等。 目前已有大量研究證明孢子絲菌的細(xì)胞壁成分與宿主細(xì)胞外基質(zhì)蛋白之間的粘附力為致病真菌的致病毒力之一�？梢哉掣降募�(xì)胞外基質(zhì)蛋白包括:Ⅱ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白、纖維蛋白原、凝血酶致敏蛋白等。孢子絲菌的酵母相和菌絲相均可明顯的粘附于Ⅱ型膠原、層粘連蛋白及纖維連接蛋白，但分生孢子無明顯粘附于纖維蛋白原及凝血酶致敏蛋白的證據(jù)，而酵母細(xì)胞則可以粘附于纖維蛋白原。Lima等已通過間接免疫熒光法及流式細(xì)胞術(shù)證實了孢子絲菌菌絲及酵母細(xì)胞的這種粘附能力。 孢子絲菌細(xì)胞壁成分對細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的粘附作用在傳播疾病的過程中發(fā)揮了關(guān)鍵的作用，因此探索這種粘附力與孢子絲菌致病毒力之間的關(guān)系，有助于對孢子絲菌病發(fā)病機制的研究。 目的： 通過將不同臨床型別孢子絲菌菌株于相應(yīng)培養(yǎng)皿中適當(dāng)溫度下培養(yǎng)后，分別與不同細(xì)胞外基質(zhì)蛋白結(jié)合，并進(jìn)行間接免疫熒光檢查，熒光的強弱可反映出致病真菌與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白粘附力的強弱，進(jìn)而初步分析這種粘附力于菌株致病毒力之間的關(guān)系。 方法： 將60株孢子絲菌臨床分離菌株（固定型30株，淋巴管型30株）在沙氏培養(yǎng)基上25℃室溫培養(yǎng)2周，另外60株（固定型30株，淋巴管型30株）在腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基上37℃培養(yǎng)1周后轉(zhuǎn)種于另一腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基上，如上方法共傳代3次,將上述培養(yǎng)菌株制作成菌懸液，分別與纖維連接蛋白及層粘連蛋白結(jié)合，加入相應(yīng)特異性抗體后應(yīng)用間接免疫熒光法進(jìn)行熒光染色，通過免疫熒光顯微鏡觀察熒光強弱，根據(jù)各組的陽性率及弱陽性率進(jìn)行分級，統(tǒng)計各組各級的例數(shù)及占總例數(shù)的比例，，最后測得資料應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果： 實驗菌株在沙氏培養(yǎng)基上25℃及腦-心浸液培養(yǎng)基上37℃均生長迅速。沙氏培養(yǎng)基3-4天即可見菌落生長，呈淡褐色或乳白色濕潤、光滑、酵母樣菌落。2周時菌落直徑明顯增大，顏色加深呈深褐色，邊緣隆起，出現(xiàn)褶皺、絨毛樣菌落；腦心浸液瓊脂培養(yǎng)皿上1周即長出乳白色菌落，呈圓形小斑塊,2周時逐漸融合成膜狀。分別將不同傳代時間及傳代次數(shù)的酵母相菌落制作成菌懸液并涂片于光鏡下觀察,可以發(fā)現(xiàn),隨著傳代時間延長及傳代次數(shù)增加,菌絲相轉(zhuǎn)化為酵母細(xì)胞的數(shù)目明顯增多。將120株孢子絲菌分為8小組，制成菌懸液后分別與相應(yīng)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白結(jié)合，根據(jù)每組的陽性率及弱陽性率進(jìn)行分級，應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件對各組各級的例數(shù)進(jìn)行分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）,菌絲相及酵母相淋巴管型與纖維連接蛋白及層粘連蛋白結(jié)合熒光的陽性率均高于固定型；但菌絲相及酵母相同型別之間分別與2種蛋白結(jié)合熒光陽性率均無明顯差異。 結(jié)論： 將孢子絲菌菌絲相轉(zhuǎn)化為酵母相，隨轉(zhuǎn)化時間延長及轉(zhuǎn)種次數(shù)增多，酵母細(xì)胞的數(shù)目明顯增多。孢子絲菌菌絲相及酵母相淋巴管型與纖維連接蛋白及層粘連蛋白的結(jié)合能力均強于菌絲相固定型；菌絲相及酵母相同型別之間分別與2種蛋白結(jié)合熒光陽性率均無明顯差異。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R756
【目錄】：

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