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《天津醫(yī)科大學》 2013年

BaP聯(lián)合UVB對人角質形成細胞Caspase-14和Filaggrin表達的影響

張芳芳  

【摘要】：目的 研究不同濃度苯并芘(BaP)與不同劑量(UVB)(中波紫外線分別及聯(lián)合作用下對永生化人角質形成細胞株(HaCaT)增殖活性及半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-14(Caspase-14)和絲聚蛋白(Filaggrin) mRNA表達的影響,探討其同BaP及UVB所致的細胞損傷的關系。 方法 第一部分：培養(yǎng)HaCaT細胞；繪制細胞生長曲線；分別用濃度為30、50、80、100μmol/L BaP及劑量為10、30、60、90mJ/cm2的UVB分別作用HaCaT細胞,采用四甲基偶氮唑藍比色實驗(MTT法)測定HaCaT細胞增殖活性；逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測不同濃度BaP和不同劑量UVB分別作用24h后HaCaT細胞Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA的表達水平。 第二部分：選取一定濃度BaP和一定劑量UVB聯(lián)合條件下HaCaT細胞,用MTT法測定作用前后HaCaT細胞增殖活性；RT-PCR方法檢測80μmol/L BaP和60mJ/cm2UVB聯(lián)合作用HaCaT細胞24h后Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA的表達水平。 結果 1.對照組細胞隨培養(yǎng)時間的延長細胞增殖活性增加；經(jīng)BaP和UVB作用后,細胞增殖活性較對照組相應時間點下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)； 2.對照組細胞Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA呈低水平表達或基本不表達,經(jīng)濃度為30、50、80、100μmol/L的BaP及劑量為10、30、60、90mJ/cm2的UVB作用后,HaCaT細胞中Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA相對含量高于相同時間點對照組(P0.05)；不同實驗組之間比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)； 3.80μmol/L BaP聯(lián)合60mJ/cm2UVB較分別作用對HaCaT細胞增殖活性抑制率明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)； 4.80μmol/L BaP聯(lián)合60mJ/cm2UVB作用24h后,HaCaT細胞中Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA表達明顯增強,與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),各實驗組之間比較,差異性有統(tǒng)計學意義(P0.01)。 結論 1、BaP與UVB可抑制HaCaT細胞的增殖活性,引起細胞的損傷。 2、BaP與UVB作用HaCaT細胞24h后,Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA表達增加,二者存在相互影響關系。 3、BaP聯(lián)合UVB較分別作用HaCaT細胞后,Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA表達量明顯增加,且呈劑量依賴關系。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R751
【目錄】：

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