本文關(guān)鍵詞：二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞A375的抗腫瘤作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《第二軍醫(yī)大學(xué)》 2012年

二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞A375的抗腫瘤作用及機(jī)制研究

殷子斐  

【摘要】：一、研究目的 使用具有高光反應(yīng)活性的二氧化鈦（Titanium dioxide, TiO_2），建立光動(dòng)力平臺(tái)，并在此基礎(chǔ)上，聯(lián)合中藥單體蟾毒靈（Bufalin, Bu），以人黑色素瘤A375細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，探索二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞的抗腫瘤作用及機(jī)制研究，希望能為臨床治療黑色素提供一種新的治療方法。 二、研究方法 (一)二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞的抗腫瘤作用效應(yīng)觀察 采用二氧化鈦（TiO_212.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL）、紫外光（UVA800μW/cm2，75min）、二氧化鈦光動(dòng)力（TiO_212.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL，UVA，800μW/cm2，75min）、蟾毒靈（Bu5nM、10nM、20nM、40nM、80nM），作用于A375細(xì)胞，培養(yǎng)12h、24h、48h及72h后，，采用MTT方法，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率，探究二氧化鈦光動(dòng)力、蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞增殖的影響。 采用二氧化鈦光動(dòng)力（TiO_225μg/mL，UVA800μW/cm2，75min）、蟾毒靈（Bu10nM）、二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈（TiO_225μg/mL，UVA800μW/cm2，75min，Bu10nM）作用于A375細(xì)胞，培養(yǎng)12h、24h、48h及72h后，采用MTT方法，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。同時(shí)使用光學(xué)顯微鏡，觀察細(xì)胞形態(tài)變化。 (二)二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞的抗腫瘤作用機(jī)制研究 采用二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈（TiO_225μg/mL，UVA800μW/cm~2，75min）、二氧化鈦光動(dòng)力（TiO_225μg/mL，UVA800μW/cm2，75min）、蟾毒靈（Bu10nM）作用于A375細(xì)胞，借助于流式細(xì)胞儀，采用PI染色、Annexin V-FITC/PI雙染、DCFH-DA染色等方法探究細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞內(nèi)活性氧含量的變化情況，并采用Western Blot探究二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞中Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)的影響。 三、研究結(jié)果 (一)二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞抗腫瘤作用效應(yīng) 觀察 單用二氧化鈦光動(dòng)力和蟾毒靈均能抑制A375細(xì)胞增殖，但當(dāng)二者聯(lián)合后，其對(duì)A375細(xì)胞的增殖抑制作用更強(qiáng)，明顯優(yōu)于單用二氧化鈦光動(dòng)力、蟾毒靈，二者之間存在明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05）。當(dāng)二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈作用于A375細(xì)胞后，A375細(xì)胞數(shù)量減少，且細(xì)胞皺縮、變圓、變小。 (二)二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞抗腫瘤作用的機(jī)制研究 二氧化鈦光動(dòng)力、蟾毒靈均可明顯增加A375細(xì)胞內(nèi)活性氧含量（P0.05），增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)Bax/Bcl-2蛋白的比例，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡或阻滯細(xì)胞周期，從而發(fā)揮對(duì)A375細(xì)胞的抗腫瘤作用。但二者的不同之處在于：二氧化鈦光動(dòng)力可明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而蟾毒靈則主要將細(xì)胞阻滯于S期。 當(dāng)二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈作用于A375細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)的活性氧含量明顯增加，明顯高于單用二氧化鈦光動(dòng)力或蟾毒靈的細(xì)胞（P0.05）；且二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，阻滯細(xì)胞周期發(fā)揮抗腫瘤作用。 四、研究結(jié)論 二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)A375細(xì)胞的抗腫瘤效果明顯優(yōu)于單用二氧化鈦光動(dòng)力或蟾毒靈。二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈可增加細(xì)胞內(nèi)活性氧含量，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，改變細(xì)胞周期，抑制A375細(xì)胞的增殖，提示二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈有望成為一種新的治療黑色素瘤有效方法。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R739.5
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8 本版采寫(xiě) 記者 陳鶯 實(shí)習(xí)生 方蓮花;[N];民營(yíng)經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

9 郝晨陽(yáng) 羅剛;[N];健康報(bào);2003年

10 林浩 實(shí)習(xí)生 張如 記者　 于莘明;[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 梁偉;蟾毒靈脂質(zhì)體的研究[D];上海醫(yī)藥工業(yè)研究院;2000年

2 韓克起;蟾毒靈誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡及相關(guān)機(jī)理研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 陳永安;蟾毒靈抑制人肝癌細(xì)胞MHCC97H轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 沈琴;表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯聯(lián)合TRAIL對(duì)黑色素瘤A375細(xì)胞的凋亡作用及其機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

5 顧偉;蟾酥有效成分蟾毒靈抗肝癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

6 易梅;RASSF1A基因通過(guò)調(diào)控細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期和AKT/mTOR信號(hào)通路抑制黑色素瘤A375細(xì)胞的機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2010年

7 林云;Survivin、PEDF在惡性黑色素瘤中的表達(dá)及其在EGCG誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡中的作用[D];華中科技大學(xué);2006年

8 許川山;BPD-MA對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株BIU-87光動(dòng)力抑制作用及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

9 夏春輝;納米TiO_2與新型兩親性酞菁鋅光動(dòng)力抑制肝癌細(xì)胞的機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2011年

10 殷佩浩;RGD修飾的蟾毒靈多級(jí)靶向納米粒的制備及其治療大腸癌的機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 殷子斐;二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞A375的抗腫瘤作用及機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

2 潘素娜;蟾毒靈抗腫瘤作用機(jī)制的蛋白組學(xué)研究[D];河南科技大學(xué);2012年

3 董志勇;蟾毒靈對(duì)MHCC97H遷移運(yùn)動(dòng)的影響及Rac1蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

4 郭曉娟;蟾毒靈對(duì)人食管癌細(xì)胞TE13增殖抑制的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

5 曹惠慧;沙蟾毒精抗肝癌作用及其機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2011年

6 楊?lèi)?ài)榮;紅景天苷對(duì)人皮膚黑色素瘤細(xì)胞A375侵襲能力影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];青海大學(xué);2012年

7 張麗;白花丹素對(duì)黑素瘤A375細(xì)胞體外增殖及凋亡的影響[D];華中科技大學(xué);2010年

8 范玲玲;堿性成纖維生長(zhǎng)因子對(duì)血管生成素核轉(zhuǎn)移及對(duì)A375細(xì)胞增殖的影響[D];東北師范大學(xué);2010年

9 耿春杰;三氧化二砷聯(lián)合干擾素對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞A375作用及其機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

10 劉利利;單味中藥脫色及復(fù)方含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)人A375黑素瘤細(xì)胞黑素代謝影響的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：二氧化鈦光動(dòng)力聯(lián)合蟾毒靈對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞A375的抗腫瘤作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：164438