發(fā)布時間：2016-11-04 09:27

  本文關(guān)鍵詞：谷氨酸信號通路在表皮細(xì)胞偽足形成及黑素小體轉(zhuǎn)運中的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《大連醫(yī)科大學(xué)》 2012年

谷氨酸信號通路在表皮細(xì)胞偽足形成及黑素小體轉(zhuǎn)運中的作用研究

王楠  

【摘要】：目的：探討谷氨酸信號通路在黑素細(xì)胞及角質(zhì)形成細(xì)胞偽足形成及黑素小體轉(zhuǎn)運中的作用機制。 方法： 1原代培養(yǎng)并純化黑素細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞。 2.掃描電鏡觀察離子型谷氨酸受體N-甲基-D-天冬氨酸受體(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)非競爭性拮抗劑地卓西平(dizocilpine，MK-801)，激動劑(N-Methy-D-aspartic acid, NMDA)作用下黑素細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞的偽足形態(tài)變化。以311nmUVB對黑素細(xì)胞偽足形態(tài)的影響的觀察作為陽性對照。 3建立黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞體外共培養(yǎng)體系；掃描電鏡觀察共培養(yǎng)體系下，MK801、NMDA作用后細(xì)胞偽足形態(tài)的變化。 4免疫熒光雙染色，，激光共聚焦顯微鏡下觀察MK801、NMDA對黑素小體的轉(zhuǎn)運的調(diào)節(jié)作用。 結(jié)果： 1掃描電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)黑素細(xì)胞在拮抗劑100μM MK801作用24h后黑素細(xì)胞樹突末端明顯變細(xì)、樹突變長，細(xì)胞表面?zhèn)巫銛?shù)量明顯變少，且偽足長度變短；激動劑100μM NMDA作用黑素細(xì)胞24h后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞樹突的末端明顯變寬、樹突變短，表面?zhèn)巫銛?shù)量明顯增多，并且偽足長度變長。黑素細(xì)胞之間沒有絲狀偽足互相聯(lián)系。角質(zhì)形成細(xì)胞在100μM MK801、100μM NMDA作用24h后細(xì)胞形態(tài)及表面?zhèn)巫爿^對照組無明顯變化。 2.黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)體系中，黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞間有絲狀偽足相連接，黑素細(xì)胞上靠近角質(zhì)形成細(xì)胞方向的絲狀偽足數(shù)量多于反方向。 3.100μM MK801作用于共培養(yǎng)體系24h后，黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞之間的絲狀偽足連接數(shù)量及黑素細(xì)胞伸向角質(zhì)形成細(xì)胞的絲狀偽足數(shù)量減少；100μMNMDA作用于共培養(yǎng)體系24h，黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞之間的絲狀偽足連接數(shù)量及黑素細(xì)胞伸向角質(zhì)形成細(xì)胞的絲狀偽足數(shù)量增多。 4．共培養(yǎng)體系下，激光共聚焦顯微鏡觀察NKI/BETEB抗體標(biāo)記的黑素小體、細(xì)胞角蛋白14抗體標(biāo)記的角質(zhì)形成細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)在角質(zhì)形成細(xì)胞中存在黑素小體。經(jīng)100μM MK801作用24h后角質(zhì)形成細(xì)胞中的黑素小體數(shù)量減少，100μM NMDA作用24h后角質(zhì)形成細(xì)胞中的黑素小體數(shù)量增多。且與黑素細(xì)胞不相鄰的角質(zhì)形成細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)黑素小體的存在。 結(jié)論： 1抑制谷氨酸受體NMDAR可使黑素細(xì)胞樹突末端變窄、樹突變長，黑素細(xì)胞表面的偽足數(shù)量減少、偽足長度變短；激動谷氨酸受體NMDAR可使黑素細(xì)胞樹突末端變寬、樹突變短，黑素細(xì)胞表面?zhèn)巫銛?shù)量增多、偽足長度增加。激動或抑制谷氨酸受體NMDAR對角質(zhì)形成細(xì)胞影響不大。 2黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)體中，抑制谷氨酸受體NMDAR可以使黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞之間的絲狀偽足連接數(shù)量減少；激動谷氨酸受體NMDAR可以使黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞之間的絲狀偽足連接數(shù)量增多。 3抑制谷氨酸受體NMDAR可以使共培養(yǎng)體系中黑素小體的轉(zhuǎn)運減少，激動谷氨酸受體NMDAR可以使共培養(yǎng)體系中黑素小體的轉(zhuǎn)運增多。 4谷氨酸信號通路調(diào)節(jié)黑素細(xì)胞偽足形成進一步調(diào)節(jié)黑素小體轉(zhuǎn)運。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R751
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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