發(fā)布時間：2017-07-14 07:13

  本文關(guān)鍵詞：強直性脊柱炎患者HLA-B27基因分型與相關(guān)免疫指標(biāo)診斷價值的探討

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【摘要】：目的探討流式細(xì)胞術(shù)(FCM)與序列特異性引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR-SSP)檢測人類白細(xì)胞表面抗原-B27(HLA-B27)在強直性脊柱炎(AS)中的診斷價值;觀察HLA-B27等位基因亞型在本地區(qū)的分布情況;了解免疫系統(tǒng)在AS發(fā)病過程中的作用機(jī)制。方法通過病例回顧性分析,了解HLA-B27檢測人群的基本情況,探討FCM法檢測HLA-B27對AS的診斷價值;采用PCR-SSP法和FCM法檢測AS患者組、疑似AS患者組和健康對照組的HLA-B27,并對HLA-B27等位基因亞型進(jìn)行分型鑒定,使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析;通過受試者工作特征(ROC)曲線對兩種檢測方法進(jìn)行方法學(xué)評價;對分組病例進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群絕對計數(shù)和相關(guān)細(xì)胞因子的檢測,采用獨立樣本t檢驗和方差分析對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,探討免疫系統(tǒng)在AS發(fā)病過程中的作用機(jī)制。結(jié)果1.246例疑似AS就診患者的年齡主要集中在21~55歲之間,共確診AS患者42例,其中HLA-B27陽性患者28例,占確診人數(shù)66.7%。FCM法檢測HLA-B27 ROC曲線下面積(AUC)為0.758(95%CI為0.659~0.856),由圖得到的最佳cut-off值為147.5,在此臨界點,敏感度為66.7%,特異度為89.7%,約登指數(shù)為0.564。2.三組資料中PCR-SSP法共檢出HLA-B27陽性患者45例,其中B*2701型1例;B*2702型5例;B*2704型28例;HLA-B*2705型11例。PCR-SSP法和FCM法檢測HLA-B27的ROC曲線下面積分別為0.913、0.884;PCR-SSP法的靈敏度、特異度分別為94.1%、84.0%;FCM法的靈敏度、特異度分別為64.7%、88.0%。3.AS組與健康對照組相比CD4+T淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)值明顯升高;CD8+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)值均下降,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);AS組較疑似AS組相比,CD3+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞絕對值低于疑似組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,其他指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義;疑似AS組與健康組進(jìn)行比對得到疑似組CD3+T淋巴細(xì)胞和CD4+T淋巴細(xì)胞絕對值明顯低于健康對照組的結(jié)果,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,其他指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。4.AS組TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17表達(dá)水平較健康對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);IL-4水平較健康對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;IL-2、TGF-β1水平較健康對照組有上升趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義。AS組各細(xì)胞因子水平較疑似組相比TNF-α、IFN-γ、IL-17明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其他因子差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。疑似組較健康對照組除TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17升高,IL-4水平降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其他因子表達(dá)水平無明顯差異。結(jié)論1.內(nèi)蒙古地區(qū)強直性脊柱炎患病情況和全國情況基本一致,發(fā)病人群主要集中在青壯年男性;FCM法在檢測HLA-B27時具有良好的穩(wěn)定性,但灰區(qū)樣本比例高,給臨床檢驗工作帶來一定困擾。2.PCR-SSP法檢測HLA-B27對AS的診斷效能明顯優(yōu)于FCM法,PCR-SSP法檢測HLA-B27是未來發(fā)展的趨勢;內(nèi)蒙古地區(qū)HLA-B27等位基因主要以B*2704和B*2705為主。3.AS的發(fā)病與免疫系統(tǒng)作用密切相關(guān),尤其是CD4+T淋巴細(xì)胞在AS疾病發(fā)展過程中起主導(dǎo)作用,可進(jìn)一步深入研究。4.TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10與AS的疾病進(jìn)展顯著相關(guān);TGF-β1、IL-2不是影響疾病進(jìn)展的主要因子;IL-17參與致病,對臨床判斷疾病發(fā)展有一定指導(dǎo)意義,此外,IL-17可能會為未來治療AS提供幫助。
【關(guān)鍵詞】：強直性脊柱炎 HLA-B27 細(xì)胞因子 PCR-SSP
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R593.23;R440;R446.6
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 1 前言8-10
• 2 病例回顧10-14
• 2.1 前言10
• 2.2 實驗材料和方法10-11
• 2.3 結(jié)果11-12
• 2.4 討論12-14
• 3 HLA-B27等位基因亞型檢測及FCM法和PCR-SSP法診斷價值的探討14-22
• 3.1 前言14
• 3.2 實驗材料與方法14-21
• 3.3 結(jié)果21-22
• 3.4 討論22
• 4 探討淋巴細(xì)胞亞群在AS疾病中的變化情況22-27
• 4.1 前言22-23
• 4.2 實驗材料與方法23-24
• 4.3 結(jié)果24-26
• 4.4 討論26-27
• 5 探討免疫相關(guān)細(xì)胞因子在AS疾病中的變化情況27-34
• 5.1 前言27-29
• 5.2 實驗材料與方法29-31
• 5.3 結(jié)果31-32
• 5.4 討論32-34
• 6 結(jié)論34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 附錄39-43
• 縮略詞表43-45
• 文獻(xiàn)綜述45-62
• 參考文獻(xiàn)56-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況62-63
• 個人簡歷63-64
• 致謝64

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本文編號：540130