發(fā)布時間：2017-06-04 06:05

  本文關鍵詞：番石榴葉三萜化合物改善3T3-L1脂肪細胞胰島素抵抗及其作用機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 觀察番石榴葉三萜化合物對3T3-L1前脂肪細胞增殖、分化以及胰島素抵抗脂肪細胞葡萄糖消耗、游離脂肪酸產生、脂聯素分泌的影響，探討其可能的作用機制。 研究方法： 培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細胞，給予不同劑量的番石榴葉三萜單體化合物(Triterpenoids from Psidium Guajava Leaves，PGs)PG-1、PG-3、PG-5、PG-7(1μM、3μM、10μM、30μM、100μM)，陽性藥羅格列酮10μM，作用48h后，采用MTT法檢測對其增殖的影響，采用油紅O染色法觀察對其分化的影響。取分化成熟的脂肪細胞，建立地塞米松誘導的胰島素抵抗模型，采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法（GOD-POD法）檢測細胞培養(yǎng)上清液中殘余的葡萄糖含量，觀察不同劑量的番石榴葉三萜化合物對胰島素抵抗脂肪細胞葡萄糖消耗的影響；同時，采用比色法檢測番石榴葉三萜化合物對胰島素抵抗脂肪細胞游離脂肪酸產生的影響；ELISA法檢測胰島素抵抗脂肪細胞脂聯素水平；WesternBlotting技術檢測胰島素抵抗脂肪細胞內關鍵調控蛋白PPARγ和PTP1B表達的變化。 研究結果： 1．與溶媒對照組相比，100μM PG-1、PG-5能顯著促進3T3-L1前脂肪細胞增殖（P0.05）；PG-7則無明顯促增殖作用（P0.05）；PG-3的作用則相反，在30μM、100μM時顯著抑制前脂肪細胞增殖（P0.05，或P0.01）。 2．與溶媒對照組相比，100μM PG-1、PG-3、PG-7能明顯促進3T3-L1前脂肪細胞分化（P0.05，或P0.01）；PG-5的作用則相反，在30μM、100μM時表現為抑制前脂肪細胞分化（P0.05，或P0.01）。 3．與模型對照組相比，無論在基礎狀態(tài)還是胰島素刺激狀態(tài)，番石榴葉三萜各單體化合物PG-1、PG-3、PG-5、PG-7(100μM)均能顯著增加胰島素抵抗脂肪細胞葡萄糖消耗（P0.05，或P0.01），其中尤以PG-1、PG-7的作用明顯，其在30μM時即可顯著增加胰島素抵抗脂肪細胞葡萄糖消耗（P0.05）。 4．與模型對照組相比，PG-1和PG-7在30μM時即能顯著減少胰島素抵抗脂肪細胞游離脂肪酸的產生（P0.05，或P0.01）；PG-5則在100μM時明顯減少游離脂肪酸的產生（P0.05）；PG-3則無明顯的減少作用（P0.05）。 5．與模型對照組相比，PG-1在30μM、100μM均顯著促進胰島素抵抗脂肪細胞的脂聯素分泌、上調PPARγ蛋白表達（P0.05，，或P0.01），但對PTP1B蛋白的表達則無明顯影響（P0.05）；PG-5在30μM、100μM時對脂聯素分泌以及PPARγ蛋白表達無明顯影響（P0.05），但能顯著下調胰島素抵抗脂肪細胞PTP1B蛋白的表達（P0.05，或P0.01）。 研究結論： 1.番石榴葉三萜化合物PG-1、PG-3、PG-5、PG-7均能促進胰島素抵抗脂肪細胞的葡萄糖消耗，提示其具有增加脂肪細胞葡萄糖攝取利用、改善胰島素抵抗的作用。 2. PG-1促進3T3-L1前脂肪細胞的增殖和分化，增加胰島素抵抗脂肪細胞葡萄糖攝取利用、抑制游離脂肪酸產生，促進脂聯素的分泌，對脂肪細胞胰島素抵抗有明顯的改善作用，其機制可能與上調PPARγ蛋白表達、提高胰島素敏感性有關。 3. PG-5增加胰島素抵抗脂肪細胞葡萄糖攝取利用、抑制游離脂肪酸產生，對脂肪細胞胰島素抵抗有明顯改善作用，其機制可能是與下調PTP1B蛋白表達、促進胰島素信號轉導、提高胰島素敏感性有關。 4.綜合分析四種番石榴葉三萜化合物的實驗結果，認為PG-1、PG-5可能改善胰島素抵抗的作用較好，其次是PG-7；PG-3由于對游離脂肪酸的產生無明顯影響，則作用最次。
【關鍵詞】：番石榴葉三萜化合物 胰島素抵抗 3T3-L1脂肪細胞 游離脂肪酸 葡萄糖消耗 脂聯素 PPARγ PTP1B
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R587.1
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• ABSTRACT5-7
• 目錄7-8
• 英文縮寫對照表8-10
• 前言10-22
• 第一部分 番石榴葉三萜化合物對 3T3-L1 前脂肪細胞增殖與分化的影響22-31
• 1.材料與方法22-31
• 1.1 實驗細胞22
• 1.2 溶液與試劑22-23
• 1.3 主要實驗儀器23
• 1.4 主要試劑配制方法23-25
• 1.5 實驗方法25-26
• 1.6 實驗結果26-29
• 1.7 討論29-31
• 第二部分 番石榴葉三萜化合物對胰島素抵抗脂肪細胞糖脂代謝的影響31-42
• 2.材料與方法31-42
• 2.1 實驗細胞31
• 2.2 溶液與試劑31
• 2.3 主要實驗儀器31
• 2.4 主要試劑配制方法31-32
• 2.5 實驗方法32-34
• 2.6 統(tǒng)計學處理34-35
• 2.7 實驗結果35-40
• 2.8 討論40-42
• 第三部分 番石榴葉三萜化合物對胰島素抵抗脂肪細胞脂聯素分泌及PPARγ和PTP1B蛋白表達的影響42-53
• 3.材料與方法42-53
• 3.1 實驗細胞42
• 3.2 溶液與試劑42-43
• 3.3 主要實驗儀器43
• 3.4 主要試劑配制方法43
• 3.5 實驗方法43-44
• 3.6 統(tǒng)計學處理44
• 3.7 實驗結果44-50
• 3.8 討論50-53
• 結論53-54
• 參考文獻54-61
• 碩士期間發(fā)表論文61-62
• 致謝62

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 王淼;鄒大進;;蛋白酪氨酸磷酸酶-1B與2型糖尿病[J];國際內分泌代謝雜志;2006年06期

  本文關鍵詞：番石榴葉三萜化合物改善3T3-L1脂肪細胞胰島素抵抗及其作用機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：420139