目的:2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)是由多種因素引起的代謝紊亂疾病,以血糖升高及多器官系統(tǒng)損害為主要表現(xiàn),主要病理生理改變?yōu)橐葝uβ細(xì)胞功能下降及機(jī)體的胰島素抵抗。隨著人口老齡化的發(fā)展趨勢,T2DM的發(fā)病率及病死率逐年上升,有研究表明,在絕經(jīng)后的女性,患病率較絕經(jīng)前顯著增加。女性雌激素減少與2型糖尿病、腹型肥胖、胰島素抵抗及相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),給予雌激素替代治療后以上情況明顯改善。雌激素是一種類固醇激素,人類及其他高等動(dòng)物體內(nèi)最重要的激素之一,具有廣泛的生理功能。在生殖系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及免疫系統(tǒng)發(fā)揮著重要的作用。卵巢分泌是雌激素的主要來源,另有少量雌激素來自于腎上腺皮質(zhì)分泌以及從周圍組織中轉(zhuǎn)化。最近有研究表明,卵巢血管的完整性是雌激素合成的關(guān)鍵因素之一,當(dāng)血脂異常,糖尿病等動(dòng)脈硬化的危險(xiǎn)因素存在時(shí),卵巢血管受損,雌激素的產(chǎn)生會(huì)過早終止。人體內(nèi)的雌激素主要有占主導(dǎo)地位的17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)和含量較低的雌三醇。新近發(fā)現(xiàn)的雌激素膜受體為一種G蛋白偶聯(lián)受體(G protein-coupled estrog...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :GPER在大鼠胰腺組織及INS-1細(xì)胞中的表達(dá)
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            2.1.1 動(dòng)物
            2.1.2 細(xì)胞
            2.1.3 主要試劑
            2.1.4 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 構(gòu)建2型糖尿病大鼠模型
            2.2.2 INS-1細(xì)胞體外培養(yǎng)
            2.2.3 免疫熒光雙染共聚焦檢測大鼠胰腺組織GPER的表達(dá)
            2.2.4 Western blot檢測大鼠胰腺組織及INS-1細(xì)胞GPER的表達(dá)
            2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 GPER在大鼠胰腺組織中的表達(dá)
        3.2 INS-1細(xì)胞GPER的表達(dá)
        3.3 G15干預(yù)后INS-1細(xì)胞GPER的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :E2上調(diào)GPER對(duì)胰島β細(xì)胞葡萄糖代謝及胰島素分泌的影響
    6 前言
    7 材料與方法
        7.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            7.1.1 動(dòng)物
            7.1.2 細(xì)胞
            7.1.3 主要試劑
            7.1.4 主要儀器
        7.2 實(shí)驗(yàn)方法
            7.2.1 構(gòu)建2型糖尿病大鼠模型
            7.2.2 INS-1細(xì)胞體外培養(yǎng)
            7.2.3 免疫熒光雙染共聚焦檢測大鼠胰腺組織中GPER、GLUT2蛋白表達(dá)
            7.2.4 Western blot檢測大鼠胰腺組織及INS-1細(xì)胞中GPER、GLUT2蛋白表達(dá)
            7.2.5 Real-time PCR檢測大鼠胰腺組織及INS-1細(xì)胞中GLUT2 及GK mRNA的表達(dá)
            7.2.6 ELISA檢測大鼠胰島素分泌水平
            7.2.7 葡萄糖氧化酶試劑盒檢測大鼠血糖水平
            7.2.8 INS-1細(xì)胞葡萄糖攝取率檢測
            7.2.9 ELASA檢測INS-1細(xì)胞GK活性
            7.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        8.1 E2干預(yù)后大鼠胰腺組織中GPER與 GLUT2的蛋白表達(dá)
        8.2 E2干預(yù)后大鼠胰腺組織中GPER、GLUT2的蛋白表達(dá)
        8.3 E2干預(yù)后大鼠胰腺組織中GLUT2與GK mRNA的表達(dá)
        8.4 E2干預(yù)后大鼠OGTT及 IRT結(jié)果
        8.5 INS-1細(xì)胞NG組與HG組GPER、GLUT2的蛋白表達(dá)
        8.6 INS-1細(xì)胞NG組與HG組GLUT2、GK mRNA的表達(dá)
        8.7 INS-1細(xì)胞NG組與HG組葡萄糖攝取率、GK活性、胰島素分泌的結(jié)果
    9 討論
    10 結(jié)論
第三部分 :Akt/mTOR信號(hào)通路在E2調(diào)節(jié)胰島β細(xì)胞葡萄糖代謝及胰島素分泌中的作用
    11 前言
    12 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        12.1 材料與試劑
            12.1.1 細(xì)胞
            12.1.2 主要試劑
            12.1.3 主要儀器
        12.2 實(shí)驗(yàn)方法
            12.2.1 INS-1體外細(xì)胞培養(yǎng)
            12.2.2 Wb檢測INS-1細(xì)胞GPER、p-Akt/Akt、p-m TOR/m TOR、GLUT2的蛋白表達(dá)
            12.2.3 Real-time PCR檢測INS-1 細(xì)胞GLUT2、GK m RNA的表達(dá)
            12.2.4 INS-1細(xì)胞葡萄糖攝取率檢測
            12.2.5 ELISA檢測INS-1細(xì)胞GK活性
            12.2.6 ELISA檢測INS-1細(xì)胞胰島素分泌水平
            12.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    13 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        13.1 正常糖及高糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的蛋白表達(dá)
        13.2 預(yù)處理后正常糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的蛋白表達(dá)
        13.3 預(yù)處理后正常糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的m RNA表達(dá)
        13.4 預(yù)處理后正常糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的葡萄糖攝取率、GK活性及胰島素分泌結(jié)果
        13.5 預(yù)處理后高糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的蛋白表達(dá)
        13.6 預(yù)處理后高糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的m RNA表達(dá)
        13.7 預(yù)處理后高糖培養(yǎng)基中INS-1細(xì)胞的葡萄糖攝取率、GK活性及胰島素分泌結(jié)果
    14 討論
    15 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡介



本文編號(hào)：3819813