背景:糖尿病周圍神經(jīng)病變(diabetic peripheral neuropathy,DPN)是糖尿病最常見的慢性并發(fā)癥,是糖尿病足、骨折以及截肢的重要危險因素。DPN的發(fā)病機制十分復(fù)雜,包括代謝紊亂、微血管功能異常、免疫炎癥反應(yīng)等,其中周圍神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激及細(xì)胞凋亡為DPN的兩大病理學(xué)特征性改變。雖然目前針對上述發(fā)病機制開發(fā)了多種對因治療藥物,但臨床上治療療效并不理想。血紅素加氧酶-l(heme oxygenase-1,HO-1)是血紅素降解的限速酶,可將血紅素轉(zhuǎn)化為膽紅素、一氧化碳和鐵離子,具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)效應(yīng),為近期神經(jīng)系統(tǒng)損傷及保護研究的新型靶向分子。在中樞神經(jīng)細(xì)胞中,HO-1可通過調(diào)節(jié)可溶性鳥苷酸環(huán)化酶水平、增加鈣激活鉀通道、調(diào)節(jié)微血管收縮節(jié)律、抑制細(xì)胞凋亡而保護中樞神經(jīng)細(xì)胞。但HO-1在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的研究比較有限。HO-1及其代謝產(chǎn)物是否參與DPN發(fā)生發(fā)展,其具體機制如何,能否作為監(jiān)測及治療DPN的靶點,目前研究尚未清楚。方法:我們首先收集1800例2型糖尿病患者血清標(biāo)本,根據(jù)神經(jīng)傳導(dǎo)速度檢測結(jié)合臨床癥狀體征診斷DPN,檢測血清膽紅素...

【文章頁數(shù)】：147 頁

【學(xué)位級別】：博士

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摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1. 糖尿病周圍神經(jīng)病變的概述及研究進展
        1.1 糖尿病周圍神經(jīng)病變的定義及流行病學(xué)
        1.2 糖尿病周圍神經(jīng)病變的分類
        1.3 糖尿病周圍神經(jīng)病變的臨床表現(xiàn)
        1.4 糖尿病周圍神經(jīng)病變的診斷及分級
        1.5 糖尿病周圍神經(jīng)病變的預(yù)防
        1.6 糖尿病周圍神經(jīng)病變的治療
    2. 糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)病機制
        2.1 代謝因素
        2.2 血管因素
        2.3 免疫/炎癥因素
    3. 血紅素氧合酶-1及其代謝產(chǎn)物的生理病理作用
        3.1 血紅素氧合酶-1及其生理學(xué)作用
        3.2 血紅素氧合酶-1代謝產(chǎn)物及其生理學(xué)作用
        3.3 血紅素氧合酶-1與代謝疾病
        3.4 血紅素氧合酶-1的潛在治療作用
    4. 血紅素氧合酶-1與糖尿病周圍神經(jīng)病變
        4.1 抗氧化作用
        4.2 抗炎作用
        4.3 抗凋亡作用
        4.4 促進自噬作用
    5. 參考文獻
第二章 血紅素氧合酶-1的代謝產(chǎn)物--膽紅素為糖尿病周圍神經(jīng)病變的新型生物標(biāo)志物
    1. 前言
    2. 實驗方法
        2.1 研究對象
        2.2 周圍神經(jīng)損傷問卷調(diào)查
        2.3 周圍神經(jīng)功能查體
        2.4 神經(jīng)電生理檢查
        2.5 臨床資料收集
        2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血清膽紅素水平較低
        3.2 膽紅素低分位患者糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生率較高
        3.3 低水平血清膽紅素是糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生的獨立危險因素
        3.4 低水平膽紅素組糖尿病患者1年后神經(jīng)傳導(dǎo)速度顯著減慢
    4. 討論
        4.1 膽紅素:從代謝廢物到生物活性物質(zhì)的改變
        4.2 血清膽紅素與糖尿病并發(fā)癥
        4.3 血清膽紅素與糖尿病周圍神經(jīng)病變
        4.4 膽紅素影響周圍神經(jīng)病變的作用機制
    5. 本章小結(jié)
    6. 參考文獻
第三章 血紅素氧合酶-1在高糖引起的雪旺氏細(xì)胞細(xì)胞損傷中的作用及機制研究
    1. 前言
    2. 實驗儀器和實驗試劑
        2.1 實驗儀器
        2.2 實驗試劑
    3. 實驗材料
        3.1 糖尿病周圍神經(jīng)病變患者PBMC收集
        3.2 實驗動物
        3.3 細(xì)胞株
    4. 實驗方法
        4.1 小鼠腹腔葡萄糖耐量試驗(IPGTT)
        4.2 小鼠腹腔胰島素耐量試驗(IPITT)
        4.3 小鼠周圍神經(jīng)感覺功能檢測
        4.4 小鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度測定
        4.5 小鼠坐骨神經(jīng)透射電鏡掃描
        4.6 小鼠足掌表皮內(nèi)神經(jīng)纖維密度染色
        4.7 總RNA提取
        4.8 逆轉(zhuǎn)錄
        4.9 Q-PCR
        4.10 蛋白提取
        4.11 蛋白濃度測定
        4.12 Western Blot
        4.13 組織切片免疫熒光
        4.14 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測
        4.15 細(xì)胞凋亡檢測
        4.16 細(xì)胞ROS檢測
        4.17 細(xì)胞ATP測定
        4.18 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    5. 實驗結(jié)果與討論
        5.1 糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血清HO-1水平及其活性顯著下降
        5.2 糖尿病周圍神經(jīng)病變小鼠存在坐骨神經(jīng)HO-1顯著下降及線粒體異常
        5.3 高糖狀態(tài)引起雪旺氏細(xì)胞HO-1下調(diào)、線粒體功能紊亂以及凋亡增加
        5.4 HO-1調(diào)節(jié)雪旺氏細(xì)胞的線粒體功能及細(xì)胞凋亡
        5.5 激活HO-1改善高糖引起的雪旺氏細(xì)胞線粒體功能紊亂以及凋亡增加
        5.6 HO-1通過調(diào)節(jié)自噬通路影響雪旺氏細(xì)胞線粒體功能及凋亡
    6. 本章小結(jié)
    7. 參考文獻
全文總結(jié)
攻讀學(xué)位期間學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號：3819708