發(fā)布時間：2021-06-23 01:31

　　研究背景:假性甲狀旁腺功能減退癥（假性甲旁減）是一組以低血鈣、高血磷以及甲狀旁腺激素（PTH）抵抗為特征的內(nèi)分泌疾病�？煞譃镻HP1A/C,散發(fā)和家族PHP1B及PHP2。臨床診療中主要以部分特殊的臨床表現(xiàn)如Albright遺傳性骨營養(yǎng)不良癥（AHO）及除PTH外多種激素抵抗、家族史及遺傳方式等進行分型。但是近年來多項研究顯示各型間臨床表現(xiàn)有重疊,且不同類型PHP患者致病分子機制及遺傳方式不同。因此分子分型對明確診斷、比較不同PHP分型患者的臨床特點有重要意義。假性甲狀旁腺功能減退癥患者的骨密度（BMD）異質(zhì)性較大,從類似甲狀旁腺功能亢進的纖維囊性骨炎到類似甲狀旁腺功能減退癥患者的骨密度升高均有個案報道。對PHP1B患者,雖然多數(shù)病例報道及隊列研究觀察到部分骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)升高等骨重建增加的證據(jù),但對BMD的改變卻結(jié)論不一。研究目的:對中國人群PHP患者進行較準(zhǔn)確的分子分型,基于該分型:1)比較臨床表現(xiàn)方面的異同;2)探索不同分型PHP患者骨組織對PTH的反應(yīng)性。對象與方法:1)不同分子分型PHP患者臨床表現(xiàn)的比較:收集2000年到2016年至北京協(xié)和醫(yī)院內(nèi)分泌門診就診并臨床診斷為PHP的患... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．ＧＡＭ５１基因及其上游５７Ｘ／６的結(jié)構(gòu)與相應(yīng)突變造成的甲基化異常

研％方法??一．研究流程（圖１．１）??患者招暮－Ｉ納入標(biāo)淮：??持續(xù)性低血ＰＴＨ水平升高??排除標(biāo)準(zhǔn)：??｜?２０１０－２０１６間?１）?Ｈ旁昧功能減退癥；??枳暮１２０例患者?２）繼發(fā)性ｆ時味功蚊進；???—?１丨?３）嚴(yán)重腎或犴功能異常；??１４）近半年內(nèi)有除鈣制？維生Ｄ以外??對骨代讀有明確影響的藥物使同史：??５）低鎂血癥??牯集臨床信息??Ｉ??檢測?ＧＡ２Ｓ－ＮＥＳＰ：?ＴＳＳ－ＤＭＲ，?Ｇ．Ｙ：！孓ＡＳＬＴＳＳ－ＤＭＲ：?ＧＸ４孓ＸＬ：Ｅｘｌ－Ｄ＿ＭＲ：－ｆｅ??ＧＡ：４Ｓ?Ａ／Ｂ?ＴＳＳ－ＤＭＲ的甲基！Ｌ水乎及拷貝榖??甲基化ｉ常?／?＼?｜大于１個ＤＭＲ位點ｆ??（越）?／?ｒ＾Ｔｓ?ｂ弄索：???／?ＡＢ：ＴＳＳ－ＤＭＲ?＼??／?低甲基化?＼??ＧＮＡＳ，ＰＲＫＡＲＩＡ＇ＰＴＨＩＲ?散犮?ＰＨＰ?１Ｂ????家族性?ＰＨＰ１Ｂ?＾＝７３）??ＧＪＶ１Ｓ?突變?（Ｎ＝２１）?／??ｉｔ／??基因螌及表轚分折（Ｎ＝１０４）??圖１．１研究流程圖??二．假性甲狀旁腺功能減退癥患者臨床資料收集??（１）臨床表現(xiàn)及體征：通過詢問病史和查體，收集以下信息：起病年齡；病??程，性別、身高、體重；主要癥狀：包括手足搐搦、感覺異常、癲癇發(fā)作史、智力??及青春發(fā)育狀況、家族史等；慢性并發(fā)癥：包括低鈣性白內(nèi)障、顱內(nèi)鈣化、腎臟鈣??化或泌尿系結(jié)石等。??體格檢查：血壓、身高、體重；低鈣血癥相關(guān)體征包括面神經(jīng)叩擊征、束臂征；??１９??

用該方法被檢測２０００－２０１０年間３５份樣本及２０１０－２０１６年４６份新樣本。??２．１）基本原理：ＭＬＰＡ的基本原理主要包括３部分：基因捕獲連接、ＰＣＲ擴??增和毛細(xì)管電泳，其基本原理如圖２．２［３０］。第一步，利用一組和目標(biāo)序列互補的探??針，但是上游探針（與目標(biāo)序列的３’端互補）僅在其５’端有ＰＣＲ引物序列Ｙ，??而下游探針（與目標(biāo)序列的５’端互補）僅在３’端有ＰＣＲ引物序列Ｘ。因此，僅??當(dāng)上下游探針均與目標(biāo)序列結(jié)合時才能被連接酶鏈接。第二步，加入ＰＣＲ引物，僅??無序列改變的ＤＮＡ樣本才能有效擴增探針序列，因此間接反映目的基因序列有無??突變。第三步，ＰＣＲ擴増產(chǎn)物（１３０－５００ｎｔ）用毛細(xì)管電泳分離，其相對數(shù)量以毛細(xì)??管電泳分離峰值與試劑盒內(nèi)提供的標(biāo)準(zhǔn)ＤＮＡ樣本量比較，可間接反應(yīng)目標(biāo)序列的??拷貝數(shù)目。ＭＬＰＡ可探測出小至點突變，大至大片段染色體序列缺失／重復(fù)，其敏感??度介于ｌｂｐ－１０Ｍｂｐ之間（圖２．２Ａ）。ＭＳ－ＭＬＰＡ即在傳統(tǒng)ＭＬＰＡ基礎(chǔ)上


本文編號：3243945