本文關(guān)鍵詞：GLP-1受體激動(dòng)劑對(duì)糖尿病大鼠心肌組織Bcl-2、Bax表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：糖尿病(diabetes mellitus, DM)是多種因素引起的以慢性高血糖為特征的全身性代謝紊亂,可導(dǎo)致機(jī)體多器官系統(tǒng)損害的一組臨床綜合征。心血管疾病是糖尿病的主要并發(fā)癥之一,有關(guān)糖尿病心血管疾病的研究主要集中于大血管病變。近年來研究證實(shí)糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是糖尿病引起的主要心臟微血管病變。其中心肌細(xì)胞凋亡是DCM的主要病理改變之一。Bax、B細(xì)胞淋巴瘤／白血病-2(B cell lymphoma/leukle mia-2,Bcl-2)是目前研究較多的線粒體源性凋亡的調(diào)控凋亡基因,且二者的比值常用來衡量凋亡水平。艾塞那肽(exenatide,EX)是近幾年人工合成的胰高糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)受體激動(dòng)劑,是治療糖尿病的新型藥物。EX的功能主要由GLP-1受體(glucagon-like peptide-1receptor,GLP-1R)介導(dǎo)完成,近年研究發(fā)現(xiàn),EX對(duì)心肌損傷具有保護(hù)作用,但其具體機(jī)制尚不清楚。本研究通過觀察艾塞那肽干預(yù)后糖尿病大鼠心肌組織病理結(jié)構(gòu)變化,檢測Bcl-2、Bax在mRNA及蛋白水平的表達(dá)變化,并計(jì)算Bcl-2/Bax比值,以探討EX是否對(duì)糖尿病心肌細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用。 方法：清潔級(jí)近交系成年雄性Wistar大鼠36只,在無特定病原體(specific pathogen-free,SPF)級(jí)條件下單籠飼養(yǎng),飼以標(biāo)準(zhǔn)飼料。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)選取10只為對(duì)照組(N組),給予普通飼料喂養(yǎng)；其余26只給予高糖高脂飼料喂養(yǎng),喂養(yǎng)8周后予以檸檬酸緩沖液稀釋的鏈脲佐菌素(STZ)30mg/kg(濃度20mg/ml)鼠尾靜脈注射,N組給予相同劑量檸檬酸緩沖液鼠尾靜脈注射。72小時(shí)后測血糖,血糖≥16.7mmol/L、飲水40ml/d、尿糖陽性(++～+++),則DM造模成功(22只)。造模成功后隨機(jī)分為DM組11只、EX干預(yù)組11只,干預(yù)組給予EX (1.0nmol·kg-1·d-1)皮下注射,N組和DM組以等量生理鹽水皮下注射。12周末,各組分別存活10只,稱量大鼠體重,股動(dòng)脈放血處死大鼠,取血檢測生化指標(biāo),迅速切取左心室心肌組織,部分置于10%中性福爾馬林中固定,部分置于液氮中固定,-80℃低溫冰箱保存,后進(jìn)行如下步驟：①HE染色光鏡下觀察心肌組織結(jié)構(gòu)變化；②應(yīng)用RT-PCR法檢測各組大鼠心肌組織Bcl-2、Bax的mRNA表達(dá)情況,并計(jì)算Bcl-2/Bax的mRNA比值；③應(yīng)用Western Blotting分析大鼠心肌組織Bcl-2、Bax的蛋白表達(dá),并計(jì)算Bcl-2/Bax蛋白的比值；以GAPDH為內(nèi)參照,以相應(yīng)目的蛋白條帶與GAPDH的比值計(jì)算蛋白的相對(duì)表達(dá)量。 結(jié)果：①HE染色結(jié)果顯示：N組大鼠心肌組織結(jié)構(gòu)正常；DM組大鼠心肌組織結(jié)構(gòu)紊亂,細(xì)胞肥大、增殖,細(xì)胞核固縮明顯,細(xì)胞間界限不清,心肌纖維重度水腫、部分?jǐn)嗔?心肌間質(zhì)纖維化；EX組大鼠心肌組織病變較DM組減輕,但心肌組織結(jié)構(gòu)未恢復(fù)到正常。②三組大鼠心肌組織均有Bcl-2、Bax表達(dá)。與N組大鼠相比,DM組大鼠心肌組織Bax mRNA及蛋白表達(dá)增強(qiáng),Bcl-2mRNA及蛋白表達(dá)降低,且Bcl-2/Bax的比值下降(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；EX組與DM組相比,Bcl-2mRNA及蛋白表達(dá)增高,Bax mRNA及蛋白表達(dá)降低,Bcl-2/Bax的比值升高(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：①DM組大鼠心肌組織Bax表達(dá)量較N組大鼠顯著增加,Bcl-2表達(dá)量較N組大鼠顯著降低,Bcl-2/Bax的比值下降,證實(shí)了心肌細(xì)胞凋亡是DM心肌病變的發(fā)病機(jī)制之一。②EX干預(yù)后DM大鼠心肌組織病理改變明顯減輕,心肌細(xì)胞凋亡減少,大鼠心肌組織Bcl-2表達(dá)量增加,Bax表達(dá)明顯被抑制,且Bcl-2/Bax的比值升高。提示EX可改善DM心肌損傷,可能是通過減少DM狀態(tài)下的心肌細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病心肌病 胰高糖素樣肽-1 艾塞那肽 Bax Bcl-2
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R587.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• ~.略語/符號(hào)說明10-12
• 前言12-15
• 研究現(xiàn)狀、成果12-13
• 研究目的、方法13-15
• 對(duì)象和方法15-28
• 1 DM動(dòng)物模型的建立、分組及取材15-16
• 1.1 對(duì)象15
• 1.2 方法15-16
• 2 HE染色所需材料與方法16-17
• 2.1 對(duì)象16-17
• 2.2 方法與步驟17
• 2.3 結(jié)果判定方法17
• 2.4 質(zhì)量控制17
• 3 各組大鼠心肌組織Bcl-2、Bax的Real time-PCR檢測17-23
• 3.1 對(duì)象18-19
• 3.2 方法與步驟19-22
• 3.3 結(jié)果判定方法22
• 3.4 質(zhì)量控制22-23
• 4 各組大鼠心肌組織Bcl-2、Bax的Western Blotting檢測23-27
• 4.1 對(duì)象23-24
• 4.2 方法與步驟24-27
• 4.3 結(jié)果判定方法27
• 4.4 質(zhì)量控制27
• 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法27-28
• 結(jié)果28-37
• 1 DM大鼠模型28
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況28
• 1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的成模情況28
• 1.3 各組大鼠基本臨床資料的比較28
• 2 HE染色檢測結(jié)果28-29
• 3 Real time-PCR檢測結(jié)果29-34
• 4 Western Blotting檢測結(jié)果34-37
• 討論37-51
• 1 動(dòng)物模型的建立37-38
• 2 糖尿病心肌病的研究現(xiàn)狀38-40
• 3 DM大鼠心肌細(xì)胞凋亡40-44
• 3.1 細(xì)胞凋亡概述40-41
• 3.2 影響DM大鼠心肌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制41-44
• 4 GLP-1對(duì)DM心肌細(xì)胞凋亡的作用44-51
• 4.1 GLP-1及其受體的特點(diǎn)44-46
• 4.2 GLP-1對(duì)心血管系統(tǒng)的影響46-48
• 4.3 GLP-1對(duì)細(xì)胞凋亡的作用48-51
• 結(jié)論51-52
• 不足和展望52-53
• 參考文獻(xiàn)53-61
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明61-62
• 綜述62-77
• 綜述參考文獻(xiàn)71-77
• 致謝77

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：GLP-1受體激動(dòng)劑對(duì)糖尿病大鼠心肌組織Bcl-2、Bax表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：253606