本文關(guān)鍵詞：miR-483-5P通過靶基因ERK1調(diào)控顆粒細(xì)胞增殖—凋亡平衡進而參與PCOS的發(fā)生機制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2015年

miR-483-5P通過靶基因ERK1調(diào)控顆粒細(xì)胞增殖—凋亡平衡進而參與PCOS的發(fā)生機制的研究

蔣秀敏  

【摘要】：【背景】多囊卵巢綜合征(PCOS)是育齡女性最常見的生殖內(nèi)分泌綜合征,特點是卵巢多囊,雄激素過多癥、胰島素抵抗和長期不排卵。這是一個多因素、一系列癥狀和體征的綜合征,PCOS不僅與不孕有關(guān),但也與代謝性疾病的風(fēng)險增加,如胰島素抵抗,糖尿病,肥胖。一些遺傳和環(huán)境因素被報道,可能有助于多囊卵巢綜合征的發(fā)展。卵母細(xì)胞周圍的卵丘顆粒細(xì)胞在不同的方面參與PCOS的病理生理過程。Micro RNA(Mi RNA)作為真核生物體內(nèi)重要的小RNA調(diào)控分子,廣泛參與女性卵泡發(fā)育成熟、受精、著床及早期胚胎發(fā)育等過程,對維持女性正常生育功能起著不可替代的作用。一些研究已經(jīng)證明mi RNA在卵丘顆粒細(xì)胞轉(zhuǎn)錄后水平發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。然而,由于mi RNA對于調(diào)控下游靶基因及具體的網(wǎng)絡(luò)作用尚未明確,對mi RNA在顆粒細(xì)胞中的作用機制及靶基因的確定有待于進一步研究�！灸康摹恐荚谘芯糠治鯬COS患者中差異表達的mi RNA,及其影響PCOS的下游靶信號通路。【方法】(1)臨床資料的收集及分析收集2013年1月-2014年3月于安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院生殖中心行因男方因素行ICSI-ET長方案助孕的PCOS患者的作為實驗研究組(n=21),同時收集同期行ICSI助孕的卵巢功能正�；颊咦鳛閷嶒瀸φ战M(n=20)。分析比較兩組間的年齡、體重指數(shù)、基礎(chǔ)性激素五項、胰島素、血糖等。(2)顆粒細(xì)胞mi RNA的實驗研究1)收集實驗研究組及實驗對照組的卵丘顆粒細(xì)胞2)利用新一代高通量測序技術(shù)(NGS)Illumina Hiseq 2000和CPSS工具對小RNA進行深度測序及數(shù)據(jù)分析。3)檢測兩組顆粒細(xì)胞mi RNA的表達圖譜,并比較分析差異表達的mi RNA。4)對差異表達mi RNA的下游靶基因進行預(yù)測,然后運用Gene Ontology(GO)和KEGG Pathway analysis軟件對其潛在的下游調(diào)控通路進行富集和篩選。5)運用實時定量RT-PCR、Western Blot對PCOS患者差異表達mi RNA的表達及預(yù)測的調(diào)控通路進行實驗驗證�！窘Y(jié)果】(1)臨床資料的回顧性分析年齡、雌激素(E2)、泌乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)在PCOS組跟正常對照組之間沒有差異;而PCOS組中體重指數(shù)(BMI)、睪酮(T)、黃體生成素(LH)、胰島素(INS)、血糖(Glu)均顯著高于正常組。(2)顆粒細(xì)胞mi RNA的實驗研究1)通過對兩顆粒細(xì)胞小RNA深度測序及分類,發(fā)現(xiàn)有59種已知的mi RNA在PCOS組中差異表達,包括21種上調(diào)的mi RNA和38種下調(diào)的mi RNA;2)兩組中新發(fā)現(xiàn)的mi RNA(Novel mi RNA);3)由GO和KEGG通路分析mi RNA在PCOS的病理生理潛在的調(diào)控機制及幾個重要的被確定由差異表達的mi RNA靶向調(diào)控的過程,如Notch信號通路,調(diào)節(jié)激素,能量代謝和谷氨酸脫氫酶活性;4)此外實驗驗證,Notch信號和ERK MAPK信號通路被證明是由差異表達的mi RNA如mir-483-5p調(diào)節(jié)�！窘Y(jié)論】我們的數(shù)據(jù)表明,mi RNA及其靶向途徑(如Notch信號通路)在多囊卵巢綜合征病因和病理生理學(xué)中起著重要的作用,并在相關(guān)的PCOS不孕癥的研究提供了分子標(biāo)志物或治療靶點的新的方向。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.75
【目錄】：

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本文編號：144413