本文關(guān)鍵詞：活性維生素D對高糖環(huán)境下小鼠足細(xì)胞巢蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:1.探討梯度糖濃度以及高糖環(huán)境下不同時(shí)間點(diǎn)對小鼠足細(xì)胞巢蛋白(nestin)表達(dá)的影響;2.探討活性維生素D對高糖環(huán)境下小鼠足細(xì)胞nestin表達(dá)的影響,為其臨床防治DKD提供理論依據(jù)。方法:1.本研究采用體外培養(yǎng)永生化小鼠足細(xì)胞,將對數(shù)生長期的足細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組(分為梯度糖15,25,35mmol/l組)、正常糖(糖5mmol/l)組、甘露醇對照組(即甘露醇30mmol/l+糖5mmol/l),分別作用24、48、72h,應(yīng)用CCK-8法檢測各組的細(xì)胞活性;2.將分化成熟的足細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組、正常糖組和甘露醇對照組,免疫細(xì)胞化學(xué)檢測nestin在足細(xì)胞中的表達(dá);3.將分化成熟的足細(xì)胞分為梯度糖濃度組及不同的時(shí)間點(diǎn),應(yīng)用Western blot及RT-PCR半定量檢測nestin蛋白水平及其mRNA水平的表達(dá)情況;4.將分化成熟的足細(xì)胞,分為正常糖組、高糖組、甘露醇對照組、高糖+活性維生素D(10-7,10-8,10-9mol/l)組,應(yīng)用Western blot及RT-PCR半定量檢測nestin蛋白水平及其mRNA水平的表達(dá)情況。結(jié)果:1.足細(xì)胞在33℃、10U/mlγ-IFN的允許條件下呈增殖狀態(tài),在37℃、無γ-IFN非允許條件下,細(xì)胞逐漸分化成熟,停止增殖;2.隨著糖濃度的增加足細(xì)胞活性呈下降趨勢(p0.05);3.免疫細(xì)胞化學(xué)顯示,nestin在足細(xì)胞胞漿中表達(dá);4.Western blot及RT-PCR結(jié)果表明,隨著糖濃度的增加,nestin蛋白水平及其mRNA水平表達(dá)均明顯降低(p0.05);隨著高糖誘導(dǎo)時(shí)間的延長,nestin蛋白水平及mRNA水平表達(dá)呈顯著降低趨勢(p0.05);5.Western blot及RT-PCR結(jié)果表明,高糖+活性維生素D組較高糖組小鼠足細(xì)胞nestin蛋白水平及其mRNA水平的表達(dá)均增高(p0.05)。結(jié)論:1.足細(xì)胞在高糖環(huán)境下活性明顯降低;2.高糖環(huán)境下足細(xì)胞nestin蛋白及其mRNA的表達(dá),呈濃度、時(shí)間依賴性的降低;3.活性維生素D能上調(diào)高糖環(huán)境下足細(xì)胞nestin蛋白及其mRNA的表達(dá),從而發(fā)揮保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病腎病 足細(xì)胞 nestin 活性維生素D 骨化三醇
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-13
• 材料13-17
• 方法17-29
• 結(jié)果29-36
• 討論36-41
• 全文結(jié)論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-50
• 綜述：足細(xì)胞巢蛋白與糖尿病腎病50-60
• 參考文獻(xiàn)56-60
• 附錄60-61
• 個(gè)人簡歷61

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2 鄔英全,康治臣,鄔巍,羅維民;大鼠局灶性缺血預(yù)處理nestin表達(dá)的研究[J];吉林醫(yī)學(xué);2005年08期

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本文編號：517905