本文關鍵詞：活性維生素D對高糖環(huán)境下小鼠足細胞巢蛋白表達的影響

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【摘要】：目的:1.探討梯度糖濃度以及高糖環(huán)境下不同時間點對小鼠足細胞巢蛋白(nestin)表達的影響;2.探討活性維生素D對高糖環(huán)境下小鼠足細胞nestin表達的影響,為其臨床防治DKD提供理論依據。方法:1.本研究采用體外培養(yǎng)永生化小鼠足細胞,將對數生長期的足細胞分為實驗組(分為梯度糖15,25,35mmol/l組)、正常糖(糖5mmol/l)組、甘露醇對照組(即甘露醇30mmol/l+糖5mmol/l),分別作用24、48、72h,應用CCK-8法檢測各組的細胞活性;2.將分化成熟的足細胞分為實驗組、正常糖組和甘露醇對照組,免疫細胞化學檢測nestin在足細胞中的表達;3.將分化成熟的足細胞分為梯度糖濃度組及不同的時間點,應用Western blot及RT-PCR半定量檢測nestin蛋白水平及其mRNA水平的表達情況;4.將分化成熟的足細胞,分為正常糖組、高糖組、甘露醇對照組、高糖+活性維生素D(10-7,10-8,10-9mol/l)組,應用Western blot及RT-PCR半定量檢測nestin蛋白水平及其mRNA水平的表達情況。結果:1.足細胞在33℃、10U/mlγ-IFN的允許條件下呈增殖狀態(tài),在37℃、無γ-IFN非允許條件下,細胞逐漸分化成熟,停止增殖;2.隨著糖濃度的增加足細胞活性呈下降趨勢(p0.05);3.免疫細胞化學顯示,nestin在足細胞胞漿中表達;4.Western blot及RT-PCR結果表明,隨著糖濃度的增加,nestin蛋白水平及其mRNA水平表達均明顯降低(p0.05);隨著高糖誘導時間的延長,nestin蛋白水平及mRNA水平表達呈顯著降低趨勢(p0.05);5.Western blot及RT-PCR結果表明,高糖+活性維生素D組較高糖組小鼠足細胞nestin蛋白水平及其mRNA水平的表達均增高(p0.05)。結論:1.足細胞在高糖環(huán)境下活性明顯降低;2.高糖環(huán)境下足細胞nestin蛋白及其mRNA的表達,呈濃度、時間依賴性的降低;3.活性維生素D能上調高糖環(huán)境下足細胞nestin蛋白及其mRNA的表達,從而發(fā)揮保護作用。
【關鍵詞】：糖尿病腎病 足細胞 nestin 活性維生素D 骨化三醇
【學位授予單位】：川北醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-13
• 材料13-17
• 方法17-29
• 結果29-36
• 討論36-41
• 全文結論41-43
• 參考文獻43-50
• 綜述：足細胞巢蛋白與糖尿病腎病50-60
• 參考文獻56-60
• 附錄60-61
• 個人簡歷61

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1 李東培,汪華僑,姚志彬;腦nestin-ir神經元的發(fā)現-形態(tài)、化學、投射和功能[J];神經解剖學雜志;2004年06期

2 鄔英全,康治臣,鄔巍,羅維民;大鼠局灶性缺血預處理nestin表達的研究[J];吉林醫(yī)學;2005年08期

3 劉鵬，

本文編號：517905