目的:將第二代測序技術(shù)發(fā)現(xiàn)并篩選出的膀胱癌突變基因HECW1作為致病候選基因,利用Sanger測序技術(shù)對膀胱癌、腎癌及前列腺癌中的腫瘤組織進行HECW1基因突變檢測,并通過免疫組織化學法研究膀胱癌、腎癌及前列腺癌中HECW1蛋白表達,結(jié)合臨床病理資料,探索HECW1蛋白表達在診治泌尿系腫瘤中的臨床價值。方法:第一部分:取2013年6月至2014年12月本院手術(shù)治療的膀胱移行細胞癌患者癌組織93例,并取其中20例患者的癌旁組織作為對照;取2014年1月至12月本院手術(shù)治療的腎透明細胞癌患者癌組織25例,并取相應癌旁組織25例作為對照;取2013年12月至2014年12月本院手術(shù)治療的前列腺癌患者癌組織18例,并取相應癌旁組織18例作為對照。將所取組織制作成蠟塊,運用OMEGA試劑盒法提取癌組織及癌旁組織中基因組DNA,并通過聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)擴增HECW1第二代測序突變位點附近區(qū)域DNA片段,運用Sanger測序技術(shù)對擴增DNA片段進行測序,分析HECW1基因突變情況。第二部分:取第一部分所制造蠟塊,應用免疫組織化學法研究膀胱癌及癌旁...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1前期發(fā)現(xiàn)6例突變位點、引物序列、PS50324功能區(qū)和PS50311功能區(qū)在HECW1基因結(jié)構(gòu)中的位置

圖1-1前期發(fā)現(xiàn)6例突變位點、引物序列、PS50324功能區(qū)和PS50311功能區(qū)在HECW1基因結(jié)構(gòu)中的位置

圖1-2Sanger測序范圍、PS50324和PS50311功能區(qū)在HECW1第11號外顯子上的位置

圖1-2Sanger測序范圍、PS50324和PS50311功能區(qū)在HECW1第11號外顯子上的位置材料與方法一．研究對象

圖1-3：HECW1基因片段PCR擴增結(jié)果

a:Marker;b-e:HECW1圖1-3：HECW1基因片段PCR擴增結(jié)果2．Sanger測序結(jié)果2.1腎癌及癌旁組織測序結(jié)果：25例腎癌組織及25例相應癌旁組織DNA中，未

圖1-4：第一處錯義突變，位于第二代測序突變位點上游第140位堿基

第一次復發(fā)病理提示增生纖維組織、肉芽組織及少量上皮團塊），經(jīng)測序未見突變（圖1-8）（圖1-9）。剩余92例膀胱癌組織和19例癌旁組織DNA均未見突變。

本文編號：4016665