目的:研究泌尿系草酸鈣結(jié)石蛋白成分特點(diǎn),為進(jìn)一步探索結(jié)石內(nèi)基質(zhì)蛋白在泌尿系結(jié)石形成中的作用與機(jī)制提供依據(jù)。方法:通過隨機(jī)收集臨床結(jié)石樣本20例,通過清洗、干燥、充分碾磨結(jié)石標(biāo)本后,采用結(jié)石成分分析儀分析結(jié)石無機(jī)組成成分;收集對(duì)應(yīng)患者晨尿進(jìn)行尿液分析及細(xì)菌培養(yǎng)。取準(zhǔn)備好的結(jié)石樣本粉末1克,加入5毫升RIPA蛋白裂解液溶解結(jié)石內(nèi)蛋白,經(jīng)冷凍干燥技術(shù),濃縮提取結(jié)石內(nèi)蛋白;采用Qproteome Bacterial Protein Prep K it試劑盒提取大腸桿菌蛋白。應(yīng)用Bradford法分別測(cè)定草酸鈣結(jié)石和大腸埃希氏菌內(nèi)蛋白濃度,再通過SDS-SPAGE電泳純化蛋白,銀染染色和考馬斯亮藍(lán)染色分別鑒定結(jié)石和大腸桿菌內(nèi)蛋白分子量大小,最后進(jìn)行蛋白對(duì)比。通過膠內(nèi)酶解后抽提肽段,經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定蛋白質(zhì)成份,對(duì)質(zhì)譜結(jié)果進(jìn)行Gene Ontology等生物功能信息分析。結(jié)果:1、草酸鈣結(jié)石平均蛋白濃度為0.57ug/uL。存在泌尿道感染時(shí)的草酸鈣結(jié)石內(nèi)蛋白含量相對(duì)較高(p<0.05)。大腸桿菌蛋白濃度為5.38ug/uL。2、草酸鈣結(jié)石蛋白與大腸桿菌的蛋白條帶比對(duì):SDS-PAGE結(jié)果顯示草酸...

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1尿蛋白濃度測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線2.4SDS-PAGE電泳草酸鈣結(jié)石內(nèi)蛋白有3至4

江西醫(yī)藥2018年3月第53卷第3期JiangxiMedicalJournal，March2018，Vol53，No3*基金項(xiàng)目：江西省衛(wèi)計(jì)委科技計(jì)劃20152099；國家十二五科技支撐計(jì)劃2013BAI05B00通信作者：傅斌ed.Keywords:Calciumoxalate....

圖2草酸鈣結(jié)石SDS-PAGE膠分離后行銀染染色（M為蛋白marker)

江西醫(yī)藥2018年3月第53卷第3期JiangxiMedicalJournal，March2018，Vol53，No3*基金項(xiàng)目：江西省衛(wèi)計(jì)委科技計(jì)劃20152099；國家十二五科技支撐計(jì)劃2013BAI05B00通信作者：傅斌ed.Keywords:Calciumoxalate....

圖2草酸鈣結(jié)石SDS-PAGE膠分離后行銀染

第3章結(jié)所有結(jié)石樣本均含有不同濃度的蛋白0.57ug/uL，其標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。合并感染的合并感染的結(jié)石平均蛋白濃度為0.23ug/uL。提示結(jié)石合并感染時(shí)和非感染時(shí)，結(jié)石蛋白濃度為5.38ug/uL。3.4SDS-PAGE凝膠電泳結(jié)果3.4.1草酸鈣結(jié)石蛋白電泳結(jié)....

圖3大腸桿菌蛋白SDS-PAGE膠分離后考3.5草酸鈣結(jié)石蛋白質(zhì)譜結(jié)果

圖3大腸桿菌蛋白SDS-PAGE膠分離后3.5草酸鈣結(jié)石蛋白質(zhì)譜結(jié)果質(zhì)譜結(jié)果共鑒定到各類蛋白88個(gè)示48.8%為結(jié)合功能蛋白，19.58%為催蛋白生物學(xué)過程分析結(jié)果顯示8.14%的10.34%和7.12%的蛋白分別參與細(xì)胞過結(jié)合功能蛋白，提示結(jié)合功能蛋白在結(jié)作....

本文編號(hào)：3970500