目的：探討鎂離子濃度對高鈣、高磷誘導的大鼠主動脈血管平滑肌細胞(RVSMC)鈣化的影響,并了解鎂離子能否通過抑制RVSMC向成骨樣細胞分化、減少其凋亡,從而抑制RVSMC鈣化。 方法：體外培養(yǎng)RVSMC,以CaCl2,NaH2PO4, MgSO4調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中鈣(Ca)、磷(Pi)、鎂離子(Mg2+)濃度,于培養(yǎng)的不同時間點用鄰甲酚酞合酮法檢測細胞內(nèi)鈣含量,Real Time PCR法檢測RVSMC的cbfa-1及a-SMA mRNA的表達,MTT法檢測RVSMC凋亡情況。 結果：1.高鈣組、高磷組培養(yǎng)的RVSMC在第7、10、14天時細胞內(nèi)鈣含量顯著高于正常鈣、磷組(P<0.01)。高鈣組、高磷組培養(yǎng)第14天時,RVSMC的a-SMA mRNA表達均明顯低于正常鈣、磷組(P<0.05); cbfa-1mRNA水平明顯高于正常鈣、磷組(P<0.05)、細胞凋亡率顯著高于正常鈣、磷組(P<0.01)。 2.不同濃度鎂離子分別作用于高鈣、高磷培養(yǎng)的RVSMC7、14天,RVSMC內(nèi)鈣含量隨培養(yǎng)基中鎂離子濃度的上升而下降(P<0.05),呈劑量依賴性。高鎂(2.0...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
縮略詞
1 緒論
2 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗主要試劑及耗材
        2.1.2 實驗主要試劑的配置
        2.1.3 實驗主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞復蘇
        2.2.2 細胞傳代
        2.2.3 細胞凍存
        2.2.4 免疫熒光染色法鑒定細胞
        2.2.5 實驗分組
        2.2.6 大鼠主動脈血管平滑肌細胞內(nèi)鈣含量測定
        2.2.7 實時熒光定量PCR
        2.2.8 MTT法測細胞凋亡
        2.2.9 統(tǒng)計學處理
3 實驗結果
    3.1 RVSMC形態(tài)及免疫熒光染色細胞鑒定結果
    3.2 各組RVSMC內(nèi)鈣含量的變化
    3.3 不同濃度鈣、磷、鎂培養(yǎng)的RVSMC中cbfa-1、α-SMAmRNA表達情況
    3.4 不同濃度鈣、磷、鎂培養(yǎng)的RVSMC凋亡情況
4 討論
5 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3958401