Nrf2/ARE信號(hào)通路對(duì)高尿酸血癥促進(jìn)慢性腎臟病的保護(hù)作用及其機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2024-04-14 14:12
目的:本研究通過構(gòu)建高尿酸細(xì)胞模型,通過Nrf2誘導(dǎo)劑SFN進(jìn)行干預(yù),觀察激活Nrf2/HO-1信號(hào)通路對(duì)腎小管上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的影響,并探討Nrf2/HO-1信號(hào)通路在高尿酸血癥促進(jìn)慢性腎臟病中的保護(hù)作用和機(jī)制。方法:在本次實(shí)驗(yàn)研究中,我們將腎小管上皮細(xì)胞分配為8組,各組分別如下:A組:正常腎小管上皮細(xì)胞,用1640培養(yǎng)基培養(yǎng)48小時(shí),無(wú)尿酸及SFN添加;B組:于1640培養(yǎng)基中加入SFN,使SFN濃度至5umol/L,隨后培養(yǎng)48小時(shí);C組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至300umol/L,并培養(yǎng)48小時(shí);D組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至300umol/L,并同時(shí)加入SFN,使SFN濃度至5umol/L,隨后培養(yǎng)48小時(shí);E組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至500umol/L,并培養(yǎng)48小時(shí);F組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至500umol/L,并同時(shí)加入SFN,使SFN濃度至5umol/L,隨后培養(yǎng)48小時(shí);G組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿酸濃度至700umol/L,并培養(yǎng)48小時(shí);H組:于1640培養(yǎng)基中加入尿酸,使尿...
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
2.1.2 主要設(shè)備及耗材
2.1.3 主要試劑
2.1.4 主要溶液配制方法
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
2.2.2 細(xì)胞模型構(gòu)建方法
2.2.3 CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活力及增殖
2.2.4 ROS的檢測(cè)
2.2.5 MDA的檢測(cè)
2.2.6 SOD的檢測(cè)
2.2.7 HK2細(xì)胞的培養(yǎng)方法
2.2.8 細(xì)胞總蛋白、細(xì)胞質(zhì)/核蛋白的提取
2.2.9 蛋白濃度的測(cè)定(BCA法)
2.2.10 蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗(yàn))
2.2.11 細(xì)胞免疫熒光步驟
2.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
3.1 SFN及不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞活力的影響
3.2 不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞ROS的影響
3.3 SFN及不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞中MDA的影響
3.4 SFN及不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞中SOD的影響
3.5 SFN處理后增加了Nrf2蛋白向細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)移
3.6 各組細(xì)胞質(zhì)/細(xì)胞核中Nrf2的蛋白表達(dá)水平
3.7 各組總蛋白中HO-1的蛋白表達(dá)水平
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞對(duì)照
致謝
本文編號(hào):3954807
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
2.1.2 主要設(shè)備及耗材
2.1.3 主要試劑
2.1.4 主要溶液配制方法
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
2.2.2 細(xì)胞模型構(gòu)建方法
2.2.3 CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活力及增殖
2.2.4 ROS的檢測(cè)
2.2.5 MDA的檢測(cè)
2.2.6 SOD的檢測(cè)
2.2.7 HK2細(xì)胞的培養(yǎng)方法
2.2.8 細(xì)胞總蛋白、細(xì)胞質(zhì)/核蛋白的提取
2.2.9 蛋白濃度的測(cè)定(BCA法)
2.2.10 蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗(yàn))
2.2.11 細(xì)胞免疫熒光步驟
2.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
3.1 SFN及不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞活力的影響
3.2 不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞ROS的影響
3.3 SFN及不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞中MDA的影響
3.4 SFN及不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞中SOD的影響
3.5 SFN處理后增加了Nrf2蛋白向細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)移
3.6 各組細(xì)胞質(zhì)/細(xì)胞核中Nrf2的蛋白表達(dá)水平
3.7 各組總蛋白中HO-1的蛋白表達(dá)水平
討論
結(jié)論
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本文編號(hào):3954807
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