常染色體顯性多囊腎病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是人類最常見的遺傳性腎病之一,主要表現(xiàn)為腎小管出現(xiàn)囊性擴張,進而破壞腎臟結構,導致腎臟功能的下降,最終導致終末期腎衰竭(ESRD)^[1,2]。絕大多數(shù)ADPKD患者的致病突變都發(fā)生在PKD1或者PKD2基因上,分別編碼多囊蛋白1(polycystin-1,PC1)和多囊蛋白2(polycystin-2,PC2)。雖然ADPKD致病基因發(fā)現(xiàn)至今已有20多年,但對于多囊蛋白的正常生理功能及其突變導致疾病發(fā)生的分子機制仍不是十分清楚。近年來的研究發(fā)現(xiàn),血管加壓素受體拮抗劑托伐普坦(Tolvaptan)可以抑制ADPKD小鼠腎臟囊腫生長^[3]。臨床試驗的結果表明,托伐普坦可以一定程度地緩解疾病進程,改善腎臟功能,目前已在美國、歐洲和日本獲批使用,但藥物本身用量大,價格昂貴,并伴有多尿、夜尿、煩渴以及較為嚴重的肝臟毒性等副作用,因此限制了藥物的使用^[4,5]。所以,闡釋多囊腎病發(fā)病的分子機制,開發(fā)新的更為有效...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
對象和方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 細胞系
        1.1.3 主要儀器設備
        1.1.4 實驗試劑
        1.1.5 主要分析工具軟件
    1.2 實驗方法
        1.2.1 試劑配制
        1.2.2 細胞系培養(yǎng)
        1.2.3 細胞/組織蛋白提取
        1.2.4 蛋白免疫印跡
        1.2.5 細胞RNA提取
        1.2.6 RNA反轉錄
        1.2.7 實時熒光定量PCR
        1.2.8 基因組DNA提取
        1.2.9 H&E染色
        1.2.10 石蠟包埋
        1.2.11 細胞和組織DHE染色
        1.2.12 冷凍組織切片免疫熒光染色
        1.2.13 尿素氮檢測
        1.2.14 腎集合管原代細胞分離
        1.2.15 他莫昔芬誘導
        1.2.16 腎臟灌流及心臟取血
        1.2.17 細胞免疫熒光
        1.2.18 組織蛋白提取(TMT)
        1.2.19 組織RNA提取
        1.2.20 數(shù)據(jù)分析
結果
    2.1 ADPKD小鼠模型轉錄組學和蛋白質組學聯(lián)合生物信息學分析
        2.1.1 ADPKD小鼠模型轉錄組學分析
        2.1.2 ADPKD小鼠模型蛋白組學分析
        2.1.3 ADPKD小鼠模型轉錄組學和蛋白質組學共同差異基因
        2.1.4 轉錄組學以及蛋白質組學共同下調基因聚類分析
    2.2 Nrf2 介導的抗氧化通路在ADPKD中的機制
        2.2.1 多種多囊腎病疾病模型氧化應激水平檢測
        2.2.2 蛋白質組學分析Nrf2 介導的抗氧化通路
        2.2.3 ADPKD中 Nrf2 調控通路檢測
    2.3 Nrf2 調控通路在ADPKD中的功能
        2.3.1 Nrf2 敲除加速疾病進程
        2.3.2 中期模型激活Nrf2 介導的抗氧化通路緩解疾病進程
        2.3.3 長期模型激活Nrf2 介導的抗氧化通路緩解疾病進程
        2.3.4 激活Nrf2 介導的抗氧化通路緩解ADPKD伴隨的肝臟囊腫
討論
結論
參考文獻
綜述 Nrf2介導的抗氧化通路在ADPKD中的機制研究
    綜述參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝
個人簡歷



本文編號：3951578