目的： 通過反轉(zhuǎn)錄PCR及免疫組織化學(xué)方法，初步評(píng)估和探討賴氨酸特異性組蛋白去甲基化酶(LSD1)與腎透明細(xì)胞癌發(fā)病之間的相關(guān)性。 方法 1、收集2012年7月²012年12月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科腎癌患者腹腔鏡腎癌根治手術(shù)切除的新鮮腎癌組織標(biāo)本30例，術(shù)后病理診斷均為腎透明細(xì)胞癌，同腎癌旁2cm處腎組織為癌旁組標(biāo)本30例、同腎距離腫瘤5cm以上處腎組織為正常組織標(biāo)本各30例；30例腎癌患者中男性18例，女性12例，患者均有完整的臨床資料，術(shù)后經(jīng)病理檢查均為腎透明細(xì)胞癌，術(shù)前均未行放療、化療、藥物靶向治療及免疫治療等。根據(jù)1997年WHO推薦的Fuhrman分級(jí)方法分組：高分化組6例，中分化組19例，低分化組5例； 2、運(yùn)用反轉(zhuǎn)錄PCR方法檢測(cè)LSD1基因在腎透明細(xì)胞癌、癌旁組織及正常腎組織中的表達(dá)情況，并分析其意義； 3、運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)LSD1蛋白在腎透明細(xì)胞癌，癌旁組織及正常腎組織的表達(dá)情況，并分析其意義； 4、用直接計(jì)數(shù)法計(jì)算各組頻率分布，數(shù)據(jù)均用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組例數(shù)比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用比...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
第1章 前言
    1.1 腎癌簡(jiǎn)介
    1.2 表觀遺傳學(xué)
    1.3 LSD1 簡(jiǎn)介
    1.4 LSD1 對(duì)腫瘤發(fā)生的調(diào)節(jié)作用
    1.5 LSD1 與泌尿系腫瘤的關(guān)聯(lián)研究
第2章 材料與方法
    2.1 主要試劑及儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器和設(shè)備
        2.1.3 主要溶液成分及試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        2.2.1 材料的收集
        2.2.2 材料的保存
        2.2.3 Trizol 法行組織標(biāo)本的 RNA 抽提及檢測(cè)
        2.2.4 逆轉(zhuǎn)錄 cDNA（AMV First Strand cDNA Synthesis Kit，具體見 Kit說明書）
        2.2.5 PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶鏈反應(yīng)）
        2.2.6 標(biāo)本的病理制片
        2.2.7 標(biāo)本組織 HE 染色
        2.2.8 標(biāo)本組織免疫組化（二步法）
    2.3 統(tǒng)計(jì)及方法
第3章 結(jié)果
    3.1 反轉(zhuǎn)錄 PCR 法檢測(cè) LSD1 基因在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)
        3.1.1 RNA 的純度與濃度檢測(cè)
        3.1.2 內(nèi)參基因 control 反轉(zhuǎn)錄 PCR 電泳圖
        3.1.3 LSD1 基因反轉(zhuǎn)錄 PCR 電泳圖
        3.1.4 反轉(zhuǎn)錄 PCR 法檢測(cè) LSD1 基因在腎透明細(xì)胞癌組織和癌旁組織中的表達(dá)
        3.1.5 反轉(zhuǎn)錄 PCR 法檢測(cè) LSD1 基因在腎透明細(xì)胞癌組織和正常腎組織中的表達(dá)
        3.1.6 反轉(zhuǎn)錄 PCR 法檢測(cè) LSD1 基因在癌旁組織和正常腎組織中的表達(dá)
    3.2 免疫組化法檢測(cè) LSD1 蛋白在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)
        3.2.1 免疫組化法檢測(cè) LSD1 蛋白在腎透明細(xì)胞癌組織和癌旁組織中的表達(dá)
        3.2.2 免疫組化法檢測(cè) LSD1 蛋白在腎透明細(xì)胞癌組織和正常腎組織中的表達(dá)
        3.2.3 免疫組化法檢測(cè) LSD1 蛋白在癌旁組織和正常腎組織中的表達(dá)
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3923948