良性前列腺增生癥(BPH)是老年男性常見病,由于它在泌尿系統(tǒng)所造成的梗阻,影響排尿,直接威脅腎功能,給患者的生活與健康帶來嚴(yán)重的危害,一直是國(guó)際上研究的重要課題之一。前列腺增生的發(fā)病機(jī)制至今仍不明了,但臨床研究與基礎(chǔ)研究都表明雄激素及其下游信號(hào)通路在前列腺增生中具有關(guān)鍵作用。miRNA是一組廣泛存在于真核生物中,不編碼蛋白質(zhì)的長(zhǎng)約20-24nt的小RNA分子,可通過與靶基因的3’UTR完全或不完全匹配,降解靶基因或抑制其翻譯,從而參與調(diào)控個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞凋亡、增殖及分化等生命活動(dòng)。我們實(shí)驗(yàn)室曾報(bào)道在前列腺癌LNCap細(xì)胞中miR-204的表達(dá)水平受雄激素的下調(diào),并發(fā)現(xiàn)miR-204與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。鑒于我們課題組在前列腺癌中miR-204的表達(dá)和功能研究中取得的一定成果,我們推測(cè)在同樣受雄激素調(diào)控的前列腺增生的組織中,miR-204作為雄激素調(diào)控的下游基因參與了前列腺增生的發(fā)生和發(fā)展。我們成功誘導(dǎo)了大鼠前列腺增生模型,并發(fā)現(xiàn)在雄激素水平逐漸增高的情況下,miR-204的表達(dá)水平降低。同時(shí)設(shè)置了去勢(shì)模型和氟他胺干預(yù)前列腺增生模型,在這兩種模型中,發(fā)現(xiàn)miR-204的表達(dá)水平與對(duì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1去勢(shì)大鼠模型前列腺組織形態(tài)變化（X100)

理導(dǎo)致前列腺萎縮，無光澤；而丙酸睪酮處理致前列腺各葉肥大，充盈。顯微鏡下觀察大鼠前列腺組織可見：正常對(duì)照組（圖1A,圖2A，圖3A，圖4A),腺泡分布均勻，大小一致，單層上皮細(xì)胞排列整齊，腺腔內(nèi)有少許分泌物；去勢(shì)處理(圖1)以及氟他胺處理（圖4),大鼠前列腺組織形態(tài)相似，均可見腺....

圖5Real-TimePCR熔解曲線分析產(chǎn)物的特異性

圖6去勢(shì)組Real-TimePCR產(chǎn)物2%瓊脂糖凝膠電泳分析。2)不同處理模型中miR-204在前列腺組織的表達(dá)情況對(duì)大鼠進(jìn)行解剖觀察、形態(tài)學(xué)分析以及前列腺指數(shù)的測(cè)定，可知去勢(shì)后注射內(nèi)酸睪酮和直接注射內(nèi)酸睪酮均nJ以成功誘導(dǎo)大鼠前列腺增生模型，故在后續(xù)基因水平檢測(cè)和蛋白表達(dá)的測(cè)....

圖6去勢(shì)組Real-TimePCR產(chǎn)物2%瓊脂糖凝膠電泳分析

異性強(qiáng)（圖5)。對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行2%瓊脂糖凝膠電泳分析，結(jié)果顯示PCR產(chǎn)物分子量與預(yù)期的大小一致（圖6)，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。i\\\二-, 二_：：^^:廣--‘：‘‘ \\\ 三U ‘ VW,?Iso SS -0 -?S ?< a% 93 ? ^ 22

圖9-3氟他胺干預(yù)前列腺增生模型中pre-miR-204的相對(duì)表達(dá)水平

注射氟他胺25mg/kg、氟他胺50mg/kg各14天后pre-miR-204的相對(duì)表達(dá)含量各增加了156%、182%(圖9-3)。哀■ pre-miR-2040 220g ?pre-ffliR-2045 200H ‘I180； *1 i&o-I 夕一2 140H....

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