發(fā)布時(shí)間：2024-02-02 13:10

　　研究背景 順鉑是一種常見的用于治療癌癥的化療藥物,尤其是對(duì)睪丸癌患者的治愈率非常高。目前睪丸癌治療中面臨的最大的問題是患者經(jīng)過藥物順鉑化療之后,出現(xiàn)的毒副作用嚴(yán)重影響了病人的生活質(zhì)量。所以開發(fā)新的順鉑增敏劑,提高順鉑的治療效率,減少順鉑治療帶來的副作用是解決這一問題的關(guān)鍵點(diǎn)。 microRNA (miRNA,即微小RNA)是一類長(zhǎng)約21～25個(gè)核苷酸的非編碼小分子RNA。一般情況下,成熟的miRNA可以通過與其靶基因的特定mRNA完全或不完全配對(duì),降解其mRNA或抑制其轉(zhuǎn)錄后翻譯來調(diào)控基因的表達(dá)。近年來,許多文獻(xiàn)報(bào)道m(xù)iRNA在化療藥物治療癌癥的過程中起到非常重要的作用,甚至調(diào)節(jié)癌癥細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。這對(duì)研究腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及診斷、治療和預(yù)后都有非常重要的作用。目前的研究發(fā)現(xiàn),在惡性生殖細(xì)胞瘤中miR-302a過表達(dá),而在良性生殖細(xì)胞瘤中卻未發(fā)現(xiàn),說明miR-302a可以成為一種惡性生殖細(xì)胞瘤的血清學(xué)分子標(biāo)志物。但是,miR-302a是否參與到順鉑治療睪丸癌的過程中及miR-302a是否與順鉑誘導(dǎo)的睪丸癌細(xì)胞凋亡敏感性有關(guān)卻未見報(bào)道。 研究目的 研究miR-302a對(duì)人睪丸癌細(xì)...

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 睪丸癌的發(fā)生和治療
        1.2.1 睪丸癌的發(fā)生
        1.2.2 睪丸癌的組織學(xué)分類
        1.2.3 睪丸癌的治療方法
        1.2.4 化療藥物順鉑的作用機(jī)制
        1.2.5 順鉑誘導(dǎo)的睪丸癌細(xì)胞的凋亡
        1.2.6 小結(jié)
    1.3 miRNA參與化療過程
        1.3.1 miRNA的生成及其作用機(jī)制
        1.3.2 miRNA與疾病的關(guān)系
        1.3.4 miRNA與化療
        1.3.5 miR-302簡(jiǎn)介
        1.3.6 miR-302與睪丸癌
        1.3.7 小結(jié)
第二章 miR-302a提高順鉑敏感性并促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)的凋亡
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 順鉑誘導(dǎo)miR-302a產(chǎn)生
        2.2.2 miR-302a抑制細(xì)胞增殖并提高順鉑敏感性
        2.2.3 miR-302a促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)的凋亡
        2.2.4 pFUM3GW促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)的凋亡
    2.3 結(jié)果分析與討論
第三章 miR-302a促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)的G2/M期的停滯
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 miR-302a對(duì)細(xì)胞周期的影響
        3.2.2 miR-302a聯(lián)合順鉑對(duì)細(xì)胞周期的影響
        3.2.3 miR-302a抑制劑對(duì)細(xì)胞周期的影響
    3.3 結(jié)果分析與討論
第四章 miR-302a協(xié)同順鉑易于臨床應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 miR-302a提高順鉑對(duì)NT2細(xì)胞的殺傷效應(yīng)
        4.2.2 miR-302a對(duì)其他細(xì)胞系的影響
        4.2.3 miR-302a提高順鉑對(duì)NCCIT2細(xì)胞的殺傷效應(yīng)
    4.3 結(jié)果分析與討論
第五章 miR-302a促進(jìn)順鉑凋亡效應(yīng)的分子機(jī)制
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.1 miR-302a通過靶基因p21調(diào)控順鉑效應(yīng)
            5.2.1.1 沉默p21對(duì)細(xì)胞周期的影響
            5.2.1.2 miR-302a通過p21促進(jìn)順鉑效應(yīng)
        5.2.2 沉默p53可以提高順鉑誘導(dǎo)的凋亡效應(yīng)
            5.2.2.1 沉默p53提高miR-302a表達(dá)
            5.2.2.2 沉默p53和miR-302a轉(zhuǎn)錄因子之間的關(guān)系
    5.3 結(jié)果分析與討論
第六章 實(shí)驗(yàn)總結(jié)和討論
第七章 實(shí)驗(yàn)材料儀器與方法
    7.1 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        7.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        7.1.2 細(xì)胞系、細(xì)胞培養(yǎng)、復(fù)蘇及凍存
            7.1.2.1 細(xì)胞系
            7.1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
            7.1.2.3 細(xì)胞復(fù)蘇
            7.1.2.4 細(xì)胞凍存
        7.1.3 質(zhì)粒及寡聚核苷酸的轉(zhuǎn)染
        7.1.4 RNA提取以及實(shí)時(shí)定量熒光PCR分析(real-time PCR)
        7.1.5 免疫印跡分析(Western blotting)
        7.1.6 細(xì)胞增殖和藥物敏感性試驗(yàn)
            7.1.6.1 細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)
            7.1.6.2 藥物敏感性試驗(yàn)
        7.1.7 流式細(xì)胞術(shù)分析
            7.1.7.1 細(xì)胞周期檢測(cè)
            7.1.7.2 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        7.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
    7.2 主要儀器設(shè)備
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的研究成果



本文編號(hào)：3892711