目的探討Pannexin2(Panx-2)蛋白在睪丸癌細(xì)胞中的表達(dá)水平以及干擾Panx-2表達(dá)對順鉑誘導(dǎo)睪丸癌(I-10)細(xì)胞凋亡的影響。方法免疫印跡法Panx-2蛋白在睪丸癌細(xì)胞中的表達(dá)水平;以睪丸癌I-10細(xì)胞株為研究對象,實驗分為轉(zhuǎn)染試劑對照組(mork組)、陰性對照質(zhì)粒組(NC組)、干擾Panx-2組(shRNA1質(zhì)粒組和shRNA2質(zhì)粒組),采用免疫印跡法驗證Panx-2的表達(dá);在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中添加16μmol/L的順鉑誘導(dǎo)細(xì)胞死亡,通過MTT法分別檢測細(xì)胞在24、48、72 h的存活率,集落克隆法檢測細(xì)胞的集落形成能力;在順鉑(16μmol/L)處理8 h后,采用AnnexinV/PI雙染法檢測細(xì)胞的早期凋亡;在順鉑(16μmol/L)作用24 h后,免疫印跡法檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表達(dá)水平。結(jié)果與I-10細(xì)胞和Tcam-2細(xì)胞相比,I-10/DDP細(xì)胞(P<0.001)和Tcam-2/DDP細(xì)胞(P<0.01)中Panx-2的表達(dá)顯著增加;干擾Panx-2基因后,免疫印跡結(jié)果顯示,與NC組相比,shRNA1和shRNA2組中P...

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細(xì)胞株與細(xì)胞培養(yǎng)
    1.2 主要試劑
    1.3 I-10細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株的建立
    1.4 MTT法檢測細(xì)胞存活率
    1.5 集落克隆法檢測細(xì)胞集落形成能力
    1.6 FITC-Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞早期凋亡率
    1.7 免疫印跡法檢測Panx-2,caspase-3,Bcl-2,Bax蛋白表達(dá)
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Panx-2蛋白在I-10和I-10/DDP細(xì)胞中及Tcam-2和Tcam-2/DDP細(xì)胞中的表達(dá)
    2.2 在睪丸癌I-10細(xì)胞中，干擾Panx-2對細(xì)胞通道功能的影響
    2.3 干擾Panx-2表達(dá)水平對順鉑作用下睪丸癌I-10細(xì)胞存活率的影響
    2.4 Panx-2表達(dá)水平對順鉑作用下睪丸癌I-10細(xì)胞集落形成能力的影響
    2.5 干擾Panx-2表達(dá)水平對順鉑誘導(dǎo)睪丸癌I-10細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 干擾Panx-2表達(dá)水平對順鉑誘導(dǎo)睪丸癌I-10細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的影響
3 討論



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