本文關(guān)鍵詞：高壓氧對(duì)大鼠腎移植后缺血再灌注腎組織粘附分子、Th17細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞以及C3表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過(guò)建立同系大鼠腎移植缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury,IRI)模型,觀察粘附分子(ICAM-1、VCAM-1)、C3、IL-17(Th17細(xì)胞標(biāo)志物)和ED1(單核巨噬細(xì)胞標(biāo)志物)在移植腎組織中的表達(dá)變化以及高壓氧(hyperbaric oxygenation,HBO)治療對(duì)其表達(dá)的影響,進(jìn)一步研究腎IRI發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制以及高壓氧對(duì)腎IRI的治療作用和機(jī)制。方法:將SD大鼠隨機(jī)分為腎移植組、腎移植㧏HBO治療組(簡(jiǎn)稱HBO治療組)及假手術(shù)組,每組又分為1h、3h和5h組(每組n=6)。腎移植組僅行腎移植手術(shù),HBO治療組于再灌注后0h、2h和4h分別將腎移植術(shù)后的大鼠置于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)氧艙內(nèi)予以HBO治療1h,假手術(shù)組僅切除右腎,不做腎移植手術(shù)。于腎移植后1h、3h和5h處死腎移植組和HBO治療組大鼠,留取移植腎組織和血標(biāo)本,假手術(shù)組也于術(shù)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死大鼠并留取左腎組織和血標(biāo)本。采用HE染色觀察腎組織的病理改變,免疫組化法檢測(cè)ICAM-1、VCAM-1、C3、ED1、IL-17蛋白的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PCR)檢測(cè)ICAM-1和C3 m RNAs的表達(dá)以及全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清肌酐(SCr)。結(jié)果:1.腎功能變化:在再灌注1h、3h、5h時(shí),與假手術(shù)組比較,腎移植組和HBO治療組SCr值均顯著增高(P0.05);與腎移植組比較,HBO治療組在1h、3h時(shí)無(wú)明顯差異,在5h時(shí)SCr值則明顯降低(P0.05)。腎移植組和HBO治療組內(nèi)SCr值隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高(P0.05)。假手術(shù)組內(nèi),各時(shí)間點(diǎn)SCr值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2.腎組織病理變化:HE染色發(fā)現(xiàn),假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)腎組織結(jié)構(gòu)正常,各時(shí)間點(diǎn)對(duì)比無(wú)明顯變化。腎移植組隨再灌注時(shí)間延長(zhǎng)組織損傷加重,可見腎小管管腔擴(kuò)張,上皮細(xì)胞腫脹,腎小球體積增大,逐漸可見蛋白樣管型、紅細(xì)胞管型、顆粒樣變性及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。HBO治療組于1h和3h時(shí),鏡下觀察與腎移植組無(wú)顯著區(qū)別,在5h時(shí)其腎組織損傷則較腎移植組明顯減輕。3.免疫組化法檢測(cè)腎組織ICAM-1、VCAM-1、C3、ED1以及IL-17的表達(dá)變化:(1)ICAM-1:ICAM-1蛋白主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞核及間質(zhì)細(xì)胞胞核。相對(duì)定量結(jié)果顯示,再灌注1h、3h、5h時(shí)腎移植組的ICAM-1蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組和HBO治療組(P0.05),而HBO治療組與假手術(shù)組無(wú)顯著差異(P0.05)。腎移植組和HBO治療組內(nèi),隨時(shí)間延長(zhǎng)ICAM-1蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。(2)VCAM-1:VCAM-1蛋白主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿,少量表達(dá)于腎小球細(xì)胞胞漿。相對(duì)定量結(jié)果顯示,再灌注1h、3h、5h時(shí),腎移植組的VCAM-1蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組(P0.05),HBO治療后VCAM-1蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05),但仍高于假手術(shù)組。腎移植組和HBO治療組內(nèi),隨時(shí)間延長(zhǎng)VCAM-1蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。(3)C3:C3蛋白主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿。相對(duì)定量結(jié)果顯示,再灌注1h、3h、5h時(shí),腎移植組的C3蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組(P0.05),HBO治療后C3蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05),但仍高于假手術(shù)組。腎移植組和HBO治療組內(nèi),隨時(shí)間延長(zhǎng)C3蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。(4)ED1(單核巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物):ED1蛋白主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿。相對(duì)定量結(jié)果顯示,再灌注1h時(shí),腎移植組的ED1蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組和HBO治療組(P0.05),HBO治療組與假手術(shù)組無(wú)顯著差異;再灌注3h和5h時(shí),腎移植組的ED1蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組(P0.05),HBO治療后ED1蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05),但仍高于假手術(shù)組。腎移植組和HBO治療組內(nèi),隨時(shí)間延長(zhǎng)ED1蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。(5)IL-17(Th17細(xì)胞標(biāo)志物):在腎移植組和HBO治療組,IL-17蛋白主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿,腎小球細(xì)胞胞漿可見極少量表達(dá),在假手術(shù)組,IL-17蛋白僅表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿,腎小球則無(wú)表達(dá)。相對(duì)定量結(jié)果顯示,再灌注1h、3h、5h時(shí),腎移植組的IL-17蛋白表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組(P0.05),HBO治療后IL-17蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05),但仍高于假手術(shù)組。腎移植組和HBO治療組內(nèi),隨時(shí)間延長(zhǎng)IL-17蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。4.real-time PCR檢測(cè)腎組織ICAM-1和C3 m RNAs的表達(dá)變化:(1)ICAM-1 m RNA:相對(duì)表達(dá)量結(jié)果顯示,再灌注1h時(shí),三組間ICAM-1 m RNA的表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;再灌注3h時(shí),腎移植組ICAM-1 m RNA的表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組和HBO治療組(P0.05),HBO治療組與假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;再灌注5h時(shí),腎移植組ICAM-1 m RNA的表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組(P0.05),HBO治療后ICAM-1 m RNA的表達(dá)量顯著降低(P0.05),但仍高于假手術(shù)組。腎移植組和HBO治療組內(nèi),再灌注1h和3h ICAM-1 m RNA的表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),再灌注5h ICAM-1 m RNA的表達(dá)量顯著高于1h和3h(P0.05)。(2)C3 m RNA:相對(duì)表達(dá)量結(jié)果顯示,再灌注1h、3h、5h時(shí),腎移植組C3 m RNA的表達(dá)量顯著高于假手術(shù)組(P0.05),HBO治療后C3 m RNA的表達(dá)量顯著降低(P0.05),但仍高于假手術(shù)組。腎移植組和HBO治療組內(nèi),隨時(shí)間延長(zhǎng)C3 m RNA的表達(dá)量顯著升高(P0.05)。5.相關(guān)分析顯示,大鼠SCr值與腎組織ICAM-1、VCAM-1、C3、ED1、IL-17蛋白表達(dá)量的P值均小于0.05,均存在正相關(guān)關(guān)系。結(jié)論:(1)腎移植再灌注后早期即出現(xiàn)了腎功能的損害和腎組織破壞,粘附分子、C3、Th17細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞參與并促進(jìn)了腎缺血再灌注損傷,且隨著再灌注時(shí)間延長(zhǎng)組織損傷逐漸加重。(2)高壓氧治療于腎缺血再灌注損傷早期即可通過(guò)抑制腎組織中粘附分子的過(guò)表達(dá)、補(bǔ)體系統(tǒng)的活化、Th17細(xì)胞的聚集和單核巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)發(fā)揮腎保護(hù)作用,且隨著再灌注時(shí)間延長(zhǎng),其保護(hù)作用越明顯。
【關(guān)鍵詞】：高壓氧 大鼠 腎移植 缺血再灌注損傷 粘附分子 補(bǔ)體 單核巨噬細(xì)胞 Th17細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R699.2
【目錄】：

• 中英縮略詞對(duì)照表4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-24
• 結(jié)果24-41
• 討論41-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-50
• 綜述50-66
• 參考文獻(xiàn)56-66
• 致謝66-67
• 作者簡(jiǎn)介67-68

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本文編號(hào)：374504