目的研究沉默泛素特異肽酶22（USP22）基因?qū)Π螂装㏕24絲裂霉素C（mitomycin C,MMC）耐藥細(xì)胞株（T24/MMC）生長活性的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法采用MTT法檢測不同濃度的MMC（20、40、80、160、320μg/mL）對T24和T24/MMC細(xì)胞生長活性的影響。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot法檢測人膀胱上皮永生化細(xì)胞SV-HUC-1細(xì)胞株、T24和T24/MMC細(xì)胞中USP22mRNA和蛋白的表達(dá)水平。采用非對稱性小RNA（aiRNA）干擾技術(shù)沉默USP22,MTT法和吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）雙重染色法分別檢測沉默USP22后MMC對T24細(xì)胞、T24/MMC細(xì)胞生長活性和凋亡的影響。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot法分別檢測p53和Mdm2mRNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果采用不同濃度的MMC（20、40、80、160、320μg/mL）處理細(xì)胞24h后,T24細(xì)胞的生長活性分別為82.4%、68.7%、44.2%、25.4%和4.7%,與未經(jīng)MMC處理組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。然而,0~160μg/... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
    1.3 USP22aiRNA設(shè)計(jì)及合成
    1.4 MTT法檢測細(xì)胞生長活性
    1.5 吖啶橙和嗅乙啶(AO/EB)雙染色檢測細(xì)胞凋亡
    1.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測目的基因mRNA的表達(dá)水平
    1.7 Western blot法檢測目的基因蛋白的表達(dá)水平
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度的MMC對T24、T24/MMC細(xì)胞生長活性的影響
    2.2 USP22aiRNA對USP22基因表達(dá)水平的影響
    2.3 沉默USP22對MMC抑制T24和T24/MMC細(xì)胞生長活性的影響
    2.4 USP22aiRNA對p53和Mdm2mRNA和蛋白表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]化療后殘存乳腺癌組織乳腺癌耐藥蛋白和P-糖蛋白的表達(dá)及其與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性[J]. 屈洪波,方力,段麗麗,龍孝斌.  中華病理學(xué)雜志. 2014 (04)
[2]非對稱性小RNA干擾技術(shù)介導(dǎo)的USP22基因沉默的研究[J]. 呂磊,楊軍,王智宇,蔣國松,肖行遠(yuǎn).  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2010 (10)
[3]膀胱移行細(xì)胞癌中候選腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物USP22mRNA水平定量分析及其與腫瘤分級(jí)的關(guān)系[J]. 駱楊,曾甫清,顧朝輝,汪良,王智宇,蔣國松,肖行遠(yuǎn).  臨床泌尿外科雜志. 2009(02)
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本文編號(hào)：3734460