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轉(zhuǎn)染KCNMA1的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療大鼠糖尿病性勃起功能障礙的研究

發(fā)布時間:2021-07-25 21:59
  目的將KCNMA1基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)移植到糖尿病性勃起功能障礙大鼠的陰莖組織內(nèi),研究其對大鼠勃起功能的影響。方法慢病毒轉(zhuǎn)染BMSCs后,RT-PCR和Western blot檢測細(xì)胞KCNMA1的表達(dá);成骨、成脂肪分化液誘導(dǎo)BMSCs分化,化學(xué)染色觀察分化結(jié)果。腹腔注射鏈脲佐菌素和頸部皮下注射阿樸嗎啡,建立糖尿病性勃起功能障礙大鼠模型。根據(jù)大鼠陰莖組織中注射的細(xì)胞不同,隨機(jī)分為4組:Ⅰ組:KCNMA1轉(zhuǎn)染BMSCs組;Ⅱ組:空載體轉(zhuǎn)染BMSCs組;Ⅲ組:單純BMSCs組;Ⅳ組:PBS對照組;正常大鼠作為正常對照。細(xì)胞移植后,用熒光顯微鏡觀察陰莖組織中移植的BMSCs分布定植情況;通過陰莖海綿體內(nèi)壓的測定反映陰莖勃起功能變化;免疫組化檢測大鼠陰莖組織中KCNMA1的表達(dá)。結(jié)果(1)RT-PCR和Western blot結(jié)果表明體外成功將KCNMA1重組慢病毒轉(zhuǎn)染入BMSCs,且KCNMA1過表達(dá)。(2)成骨成脂分化結(jié)果表明經(jīng)過慢病毒轉(zhuǎn)染的BMSCs仍然具有多向分化能力。(3)大鼠陰莖海綿體內(nèi)壓測定表明:Ⅰ組大鼠勃起功能改善較Ⅱ組和Ⅲ組明顯,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

轉(zhuǎn)染KCNMA1的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療大鼠糖尿病性勃起功能障礙的研究


原代細(xì)胞第三天(×200)

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,慢病毒,熒光鏡,光鏡


27附 圖圖1. 原代細(xì)胞 第三天 (×200) 圖2. 原代細(xì)胞 第八天(×200)Fig. 1 Primary cells on third day Fig. 2 Primary cells on eighth dayA (×200) B (×200)圖3. 慢病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后,在光鏡下(A)和熒光鏡下(B)結(jié)果。Fig. 3 Lentivirus transfected mesenchymal stem cells under light microscopy (A) and underfluorescence microscopy (B).

熒光鏡,慢病毒,轉(zhuǎn)染,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞


Fig. 1 Primary cells on third day Fig. 2 Primary cells on eighth dayA (×200) B (×200)圖3. 慢病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后,在光鏡下(A)和熒光鏡下(B)結(jié)果。Fig. 3 Lentivirus transfected mesenchymal stem cells under light microscopy (A) and underfluorescence microscopy (B).

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病性勃起功能障礙的前景[J]. 邱雪峰,陳赟,戴玉田.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2011(03)
[2]大電導(dǎo)鈣依賴的鉀通道(BKca通道)與疼痛[J]. 劉蔡鉞,趙云富,馬蓓.  生命的化學(xué). 2010(03)
[3]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其在組織修復(fù)中的應(yīng)用[J]. 張向榮,劉德伍,郭光華.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(08)
[4]BKCa通道的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 馬彬云,汲娟娟.  生物物理學(xué)報. 2007(01)
[5]糖尿病性勃起功能障礙基因治療研究進(jìn)展[J]. 邱明,肖明朝,茍欣,楊鈺興.  中華內(nèi)分泌外科雜志. 2009 (02)



本文編號:3302858

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