目的將KCNMA1基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）移植到糖尿病性勃起功能障礙大鼠的陰莖組織內(nèi)，研究其對大鼠勃起功能的影響。方法慢病毒轉(zhuǎn)染BMSCs后，RT-PCR和Western blot檢測細胞KCNMA1的表達；成骨、成脂肪分化液誘導BMSCs分化，化學染色觀察分化結(jié)果。腹腔注射鏈脲佐菌素和頸部皮下注射阿樸嗎啡，建立糖尿病性勃起功能障礙大鼠模型。根據(jù)大鼠陰莖組織中注射的細胞不同，隨機分為4組：Ⅰ組：KCNMA1轉(zhuǎn)染BMSCs組；Ⅱ組：空載體轉(zhuǎn)染BMSCs組；Ⅲ組：單純BMSCs組；Ⅳ組：PBS對照組；正常大鼠作為正常對照。細胞移植后，用熒光顯微鏡觀察陰莖組織中移植的BMSCs分布定植情況；通過陰莖海綿體內(nèi)壓的測定反映陰莖勃起功能變化；免疫組化檢測大鼠陰莖組織中KCNMA1的表達。結(jié)果（1）RT-PCR和Western blot結(jié)果表明體外成功將KCNMA1重組慢病毒轉(zhuǎn)染入BMSCs，且KCNMA1過表達。（2）成骨成脂分化結(jié)果表明經(jīng)過慢病毒轉(zhuǎn)染的BMSCs仍然具有多向分化能力。（3）大鼠陰莖海綿體內(nèi)壓測定表明：Ⅰ組大鼠勃起功能改善較Ⅱ組和Ⅲ組明顯，其差異具有統(tǒng)計學意義（... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

原代細胞第三天（×200）

27附 圖圖1. 原代細胞 第三天 （×200） 圖2. 原代細胞 第八天（×200）Fig. 1 Primary cells on third day Fig. 2 Primary cells on eighth dayA （×200） B （×200）圖3. 慢病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞后，在光鏡下（A）和熒光鏡下（B）結(jié)果。Fig. 3 Lentivirus transfected mesenchymal stem cells under light microscopy (A) and underfluorescence microscopy (B).

Fig. 1 Primary cells on third day Fig. 2 Primary cells on eighth dayA （×200） B （×200）圖3. 慢病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞后，在光鏡下（A）和熒光鏡下（B）結(jié)果。Fig. 3 Lentivirus transfected mesenchymal stem cells under light microscopy (A) and underfluorescence microscopy (B).

【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細胞治療糖尿病性勃起功能障礙的前景[J]. 邱雪峰,陳赟,戴玉田.  醫(yī)學研究生學報. 2011(03)
[2]大電導鈣依賴的鉀通道（BKca通道）與疼痛[J]. 劉蔡鉞,趙云富,馬蓓.  生命的化學. 2010(03)
[3]骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性及其在組織修復中的應(yīng)用[J]. 張向榮,劉德伍,郭光華.  中國組織工程研究與臨床康復. 2008(08)
[4]BKCa通道的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 馬彬云,汲娟娟.  生物物理學報. 2007(01)
[5]糖尿病性勃起功能障礙基因治療研究進展[J]. 邱明,肖明朝,茍欣,楊鈺興.  中華內(nèi)分泌外科雜志. 2009 (02)



本文編號：3302858