不孕不育一直是一個(gè)世界性的健康問題。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)道，育齡夫婦中有不同程度生育障礙的占10¹5%。在所有的不孕不育夫婦中由男方因素造成的大約占到50%。引起男性不育的因素很多，如免疫性疾病、內(nèi)分泌性疾病、精子發(fā)生障礙、射精障礙以及環(huán)境危險(xiǎn)因素等，但還有相當(dāng)一大部分男性不育處于原因不明狀態(tài)，臨床上稱為原發(fā)性男性不育癥（包括原發(fā)性無精子癥、少精子癥、弱精子癥和畸形精子癥4類）。人類的精子發(fā)生是一個(gè)極其復(fù)雜的過程，涉及細(xì)胞增殖、減數(shù)分裂、細(xì)胞分化等一系列細(xì)胞活動(dòng)。據(jù)估計(jì)至少有2000多個(gè)基因參與精子發(fā)生過程。近年來，隨著研究的不斷深入，已鑒定了許多與精子發(fā)生密切相關(guān)的基因。谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶（Glutathione S-transferase, GSTs）是一種重要的II相代謝酶，它能催化多種I相酶代謝活化產(chǎn)生的毒性代謝產(chǎn)物與谷胱甘肽（GSH）巰基（-SH）共軛結(jié)合，形成親水性物質(zhì)排出體外，從而產(chǎn)生解毒作用。人體內(nèi)GSTs是一個(gè)非常龐大的超基因家族，其中GSTM1、GSTM3、GSTT1、GSTT2、GSTP1基因的多態(tài)性被認(rèn)為與人類多種疾病的易感性有較大的相... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

瓊脂糖凝膠電泳圖譜

中孵育 60min；(3) 反復(fù)沖洗 96 孔板 4 次；孵育完成后，揭開封膜，倒去 96 孔板中的混合物后加滿 Wash Buffer(1X)，再倒去，如此重復(fù) 4 次。最后一次，將 96 孔板倒扣于紙巾上，敲打直到水分扣干。(4) 加入 50 ul 的 hromogen solution A 于 96 孔板的每一個(gè)孔中（避光）；(5) 加入 50 ul 的 hromogen solution B 于 96 孔板的每一個(gè)孔中（避光）；(6) 輕輕混勻，置 37°C 培養(yǎng)箱中孵育 15min（避光）；(7) 取出 37°C 培養(yǎng)箱的 96 孔板，在每孔中加入 50ul Stop Solution，此時(shí)孔中液體的顏色會(huì)從藍(lán)色變成黃色（如果沒有變色，輕輕叩擊 96 孔板使得混合物充分混勻）；(8) 在 15min 內(nèi)于酶標(biāo)儀的 450nm 處，讀取 OD 值；(9) 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（見圖 2），計(jì)算出每個(gè)樣本的數(shù)值。

血清中GSTM1和GSTT1表達(dá)水平


本文編號(hào)：3303240