臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，缺血預(yù)處理（Ischemic Preconditioning，IPC）能夠延遲和減輕再灌注損傷。IPC指在器官持續(xù)缺血損傷之前預(yù)先給予器官短暫缺血處理的人工干預(yù)。雖然IPC具有幫助器官抵抗缺血再灌注損傷的能力，卻沒(méi)有在臨床治療上得到應(yīng)用，因?yàn)镮PC必須在器官缺血之前進(jìn)行干預(yù)。在大多數(shù)情況下人們無(wú)法預(yù)測(cè)缺血損傷的發(fā)生時(shí)間。在此基礎(chǔ)上，近年研究發(fā)現(xiàn)一種新的治療策略—缺血后處理（Ischemic Postconditioning, POC）,即缺血后持續(xù)再灌注前，給予多次短暫再灌注/缺血處理,可減輕再灌注損傷。由于POC可以在缺血發(fā)生后應(yīng)用,可行性和可預(yù)見(jiàn)性好，因此具有很好的臨床應(yīng)用前景。但目前對(duì)POC保護(hù)作用機(jī)制尚不清楚，而使其臨床應(yīng)用受到限制。本研究通過(guò)大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型來(lái)研究POC的保護(hù)作用機(jī)制。首先，本實(shí)驗(yàn)成功制備了大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型，I/R（ischemia reperfusion）組大鼠腎臟血清肌酐濃度大幅度提高，切片染色觀察發(fā)現(xiàn)組織學(xué)結(jié)構(gòu)異常，表現(xiàn)出腎小管上皮細(xì)胞腫脹、細(xì)胞空泡變性，管腔狹窄等急性腎損傷病變。其次，通過(guò)對(duì)腎臟細(xì)胞中ROS的產(chǎn)生... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
內(nèi)容提要
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對(duì)照表
第一篇 前言
第二篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 腎臟缺血再灌注損傷的研究概況
    第二章 缺血再灌注損傷機(jī)制的研究
        2.1 ROS 的產(chǎn)生
            2.1.1 黃嘌呤氧化酶
            2.1.2 線粒體
            2.1.3 中性粒細(xì)胞
        2.2 氧化應(yīng)激造成組織損傷的機(jī)制
            2.2.1 脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)
            2.2.2 線粒體
            2.2.3 細(xì)胞凋亡
    第三章 缺血再灌注損傷的防治方法
        3.1 缺血預(yù)處理
        3.2 缺血后處理
        3.3 抗氧化劑
            3.3.1 谷胱甘肽
            3.3.2 過(guò)氧化物歧化酶
            3.3.3 熱休克蛋白
        3.4 細(xì)胞療法
    第四章 缺血后處理的保護(hù)作用機(jī)制
        4.1 活性氧簇和鈣超載
        4.2 RISK 途徑
        4.3 ATP 敏感性鉀通道和線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔
第三篇 實(shí)驗(yàn)研究
    第一章 動(dòng)物模型的制備及 POC 對(duì)腎臟的保護(hù)作用
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.4 器械耗材
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 動(dòng)物模型的制備
            1.2.2 繪制各組動(dòng)物模型生存曲線
            1.2.3 腎臟功能學(xué)檢測(cè)
            1.2.4 組織包埋與切片
            1.2.5 腎臟組織 HE 染色
        1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            1.3.1 動(dòng)物模型的制備及 POC 的優(yōu)化
            1.3.2 腎臟組織學(xué)改變
            1.3.3 血清肌酐的檢測(cè)
            1.3.4 各組動(dòng)物模型的生存曲線
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 缺血后處理對(duì)線粒體的保護(hù)作用
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎臟組織中抗原的表達(dá)
            2.2.2 Western Blot 檢測(cè)腎臟組織中蛋白的表達(dá)
            2.2.3 腎臟組織線粒體膜勢(shì)能的測(cè)定
            2.2.4 DCFDA 檢測(cè)原位 ROS 的產(chǎn)生
        2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.3.1 免疫組織化學(xué)技術(shù)腎臟組織中 Caspase-3 的表達(dá)
            2.3.2 Western Blot 檢測(cè)腎臟組織中 Caspase-3 的表達(dá)
            2.3.3 線粒體膜勢(shì)能的檢測(cè)
            2.3.4 免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)腎臟組織中 8-OhDG 的表達(dá)
            2.3.5 DCFDA 原位檢測(cè) ROS 的生成
            2.3.6 免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè) Nitrotyrosine 的表達(dá)
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 缺血后處理對(duì)腎臟的保護(hù)作用的機(jī)制
        3.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
            3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2 實(shí)驗(yàn)方法
            3.2.1 TUNEL 檢測(cè)腎臟中的細(xì)胞凋亡
            3.2.2 熒光雙染檢測(cè) 8-OHDG 與 TUNEL
            3.2.3 熒光雙染檢測(cè) Kir6.2 與 VDAC
            3.2.4 Western Blot 檢測(cè) Kir6.2
        3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.3.1 TUNEL 檢測(cè)腎臟中的細(xì)胞凋亡
            3.3.2 熒光雙染檢測(cè) 8-OhDG 與 TUNEL
            3.3.3 熒光雙染檢測(cè) Kir6.2 與 VDAC
            3.3.4 Western Blot 檢測(cè)組織 Kir6.2 表達(dá)
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
第四篇 結(jié)論
課題創(chuàng)新性總結(jié)
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Protective effect of curcumin against liver warm ischemia/reperfusion injury in rat model is associated with regulation of heat shock protein and antioxidant enzymes[J]. Shi-Qiang Shen, Yuan Zhang, Cheng-Long Xiong, Department of General Surgery, Renmin Hospital of Wuhan University, 238 Jiefang Road, Wuhan 430060, Hubei Province, China Jin-Jian Xiang, Department of Hepatobiliary Surgery, Xiamen First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Xiamen 361004, Fujian Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2007(13)
[2]Intravenous administration of glutathione protects parenchymal and non-parenchymal liver cells against reperfusion injury following rat liver transplantation[J]. RolfJ.Schauer,SinanKalmuk,Alexander L.Gerbes,Rosemarie Leiderer,Herbert Meissner,Friedrich W.Schildberg,Konrad Messmer,Manfred Bilzer.  World Journal of Gastroenterology. 2004(06)



本文編號(hào)：3261674