三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的實驗研究

發(fā)布時間：2017-04-23 23:09

本文關(guān)鍵詞：三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：2008年4月以后,就診于蘭州大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科和兒科門診的泌尿系結(jié)石患兒突然增多,這些患兒大多為3歲以內(nèi)的嬰幼兒,主要的臨床表現(xiàn)為煩躁、哭鬧不安、惡心、嘔吐、腹瀉、尿液混濁及上呼吸道感染等癥狀。部分癥狀嚴(yán)重的患兒出現(xiàn)肉眼血尿及少尿、無尿?qū)е碌募毙阅I衰竭,通過B超檢查后發(fā)現(xiàn)這些患兒都患有泌尿系結(jié)石,同時在詢問這些患兒病史的時候發(fā)現(xiàn)他們均有食用河北省石家莊市三鹿集團生產(chǎn)的“三鹿牌嬰幼兒配方奶粉”的喂養(yǎng)史。隨后,蘭州大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科就此嬰幼兒泌尿系結(jié)石爆發(fā)事件及時上報甘肅省衛(wèi)生廳。之后,我國其他部分省市也陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了患有泌尿系結(jié)石的嬰幼兒數(shù)量突發(fā)性增多,此事件發(fā)生后引起了中國衛(wèi)生部的高度重視,后經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)這些患兒所食用的河北省石家莊市三鹿集團生產(chǎn)的“三鹿牌嬰幼兒配方奶粉”中非法添加了不能被作為食品添加劑使用的三聚氰胺。中國疾病預(yù)防控制中心(CDC)的統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,截止2008年11月27日因食用三聚氰胺污染的嬰幼兒配方奶粉而接受檢查治療且己康復(fù)的嬰幼兒累計294,000人,住院治療的有51,900人,死亡6人。為了進一步證實三聚氰胺與嬰幼兒泌尿系結(jié)石發(fā)生的相關(guān)性,我們在2008年10月份收集到了甘肅省20家醫(yī)院接受住院治療的三聚氰胺致泌尿系結(jié)石嬰幼兒的血、尿及結(jié)石標(biāo)本并對其進行了基礎(chǔ)實驗研究。目的：通過對三聚氰胺致泌尿系結(jié)石患兒尿液和結(jié)石中三聚氰胺的含量進行分析,證實三聚氰胺和嬰幼兒泌尿系結(jié)石的相關(guān)性,提供三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的病因?qū)W證據(jù)；通過對三聚氰胺致泌尿系結(jié)石的成分分析及建立三聚氰胺致大鼠腎結(jié)石的動物模型,初步探討三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的形成機制,為臨床預(yù)防和治療三聚氰胺致泌尿系結(jié)石患兒提供實驗支持和理論依據(jù)。方法：聯(lián)合應(yīng)用濕化學(xué)分析法,紅外光譜法,X-射線粉末衍射法定性分析三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的化學(xué)組分和結(jié)晶類型；采用掃描電子顯微鏡觀察三聚氰胺結(jié)石的結(jié)晶形態(tài),并采用高效液相色譜法(HPLC)定量分析這些結(jié)石樣品中三聚氰胺的含量；采用高效液相色譜法定量分析三聚氰胺致泌尿系結(jié)石患兒尿液中三聚氰胺的含量,初步探討三聚氰胺在體內(nèi)的代謝過程；通過灌胃給予大鼠三聚氰胺、三聚氰酸及三聚氰胺和三聚氰酸混合物,分別建立三聚氰胺致大鼠泌尿系結(jié)石的動物模型,明確三聚氰胺致大鼠腎臟結(jié)晶的形成機制；在上述實驗的基礎(chǔ)上,初步探討三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的形成機制。結(jié)果：通過對12份結(jié)石標(biāo)本外觀形態(tài)的觀察,將三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石大致分為褐色沙粒樣結(jié)石、白色顆粒狀結(jié)石和灰白色塊狀結(jié)石三大類；應(yīng)用濕化學(xué)法定性分析其中9份結(jié)石標(biāo)本的化學(xué)成分后發(fā)現(xiàn)尿酸結(jié)石3份,尿酸銨結(jié)石5份,尿酸銨、磷酸鎂銨、碳酸磷灰石混合性結(jié)石1份；應(yīng)用紅外光譜法定性分析其中9份結(jié)石的結(jié)晶成分后發(fā)現(xiàn)以無水尿酸為主要組分的結(jié)石2份,以無水尿酸鈉為主要組分的結(jié)石1份,以二水尿酸和尿酸銨為主要組分的結(jié)石5份,以六水磷酸鎂銨、尿酸銨和碳酸磷灰石為主要組分的結(jié)石1份；應(yīng)用X-射線粉末衍射法對其中6份結(jié)石標(biāo)本進行物象分析后發(fā)現(xiàn),沒有已知的化合物可以跟其中的5份結(jié)石的衍射圖譜相匹配,只有1份結(jié)石的晶體組成符合六水磷酸鎂錢、尿酸銨和碳酸磷灰石的衍射圖譜；應(yīng)用掃描電子顯微鏡觀察其中10份結(jié)石標(biāo)本的微觀形態(tài)后發(fā)現(xiàn)三聚氰胺致泌尿系結(jié)石的結(jié)晶形態(tài)呈現(xiàn)多樣化,既有規(guī)則的晶體組成也有不規(guī)則的結(jié)晶聚集體；應(yīng)用高效液相色譜法定量分析出12份結(jié)石標(biāo)本中三聚氰胺的含量依次為200、830、7000、11000、27400、47900、64800、239000、258000、279000、314000、339000μg/g；應(yīng)用高效液相色譜法對隨機抽取的40份三聚氰胺致泌尿系結(jié)石患兒的尿液樣本中三聚氰胺的含量測定后發(fā)現(xiàn)有11份尿液樣本中的三聚氰胺含量在最低檢測限以上,其含量為0.15-1.91μg/mL,檢出率為27.5%；將120只SD雄性大鼠分成6組,即對照組、三聚氰胺組、三聚氰酸組以及三聚氰胺和三聚氰酸高、中、低3個劑量組。與空白對照組的大鼠比較,單獨灌胃高劑量(100mg/kg/bw)三聚氰胺或三聚氰酸30天后,大鼠血液生化指標(biāo)及肝腎形態(tài)和組織病理學(xué)未出現(xiàn)異常改變；灌胃低劑量(10/10mg/kg/bw)三聚氰胺和三聚氰混合物30天后,中劑量(25/25mg/kg/bw)和高劑量(50/50mg/kg/bw)三聚氰胺和三聚氰酸3天后、15天后和30天后,部分大鼠出現(xiàn)腎臟肉眼形態(tài)學(xué)的改變,主要表現(xiàn)為腎臟表面顏色不均勻,表面呈不規(guī)則斑塊狀改變,或出現(xiàn)腎臟腫脹,腎臟縱切面肉眼可見到散在分布的米黃色針尖樣大小顆粒,集合系統(tǒng)分布較多,皮質(zhì)少見；中劑量組的大鼠在灌胃15天和30天后,高劑量組的大鼠在灌胃3天后、15天后和30天后出現(xiàn)明顯的血尿素氮和血肌酐水平的升高,跟空白對照組比較具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)；低劑量組的大鼠在灌胃30天后,中劑量組的大鼠在灌胃15天和30天后,高劑量組的大鼠在灌胃3天后、15天后和30天后,部分大鼠的腎臟病理切片中發(fā)現(xiàn)腎小管內(nèi)有明顯的結(jié)晶形成,伴炎性細(xì)胞浸潤,結(jié)晶在皮、髓質(zhì)和腎乳頭部均有分布。結(jié)論：(1)根據(jù)外觀形態(tài),三聚氰胺致泌尿系結(jié)石可大致分為三類：褐色沙粒樣、白色顆粒狀和灰白色塊狀結(jié)石。(2)三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的主要化學(xué)組分為二水尿酸和尿酸銨；三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的晶體構(gòu)成是非定形的；三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石的晶體形態(tài)呈多樣性。(3)三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石患兒尿液中三聚氰胺的檢出率為27.5%,由于尿液標(biāo)本采集時間的隨意性,因此無法準(zhǔn)確闡明三聚氰胺在人體內(nèi)的代謝過程。(4)高效液相色譜法分析三聚氰胺致泌尿系結(jié)石患兒的結(jié)石和尿液中三聚氰胺的含量成本低,靈敏度和準(zhǔn)確度高,適合在臨床工作中推廣應(yīng)用。(5)短期內(nèi)單獨灌胃給予三聚氰胺或三聚氰酸不會對大鼠造成毒性損傷,而灌胃三聚氰胺和三聚氰酸混合物,可造成大鼠腎小管內(nèi)結(jié)晶形成并阻塞腎小管導(dǎo)致腎功能的衰竭,腎損傷的嚴(yán)重程度跟灌胃劑量和時間呈正相關(guān)。(6)三聚氰胺致嬰幼兒泌尿系結(jié)石與三聚氰胺致大鼠泌尿系結(jié)石的機制不同,在人體內(nèi)三聚氰胺可能在腎臟內(nèi)與尿酸結(jié)合形成不溶于水的結(jié)晶進而形成泌尿系結(jié)石；高劑量的三聚氰胺可能阻滯了腎小管對尿酸的重吸收及干擾了人體內(nèi)銨的代謝,形成高尿酸尿和高尿銨尿,最終導(dǎo)致尿酸及尿酸銨結(jié)石的形成。
【關(guān)鍵詞】：三聚氰胺 三聚氰酸 尿酸 泌尿系結(jié)石 嬰幼兒 高效液相色譜 紅外光譜 X-射線粉末衍射 掃描電子顯微鏡 動物模型
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R726.9
【目錄】：