本文關(guān)鍵詞：圍生期BPA暴露對(duì)小鼠精液參數(shù)及睪丸支持細(xì)胞連接蛋白表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察圍生期暴露于不同濃度雙酚A(BPA)對(duì)雄性小鼠精液參數(shù)及睪丸支持細(xì)胞連接蛋白表達(dá)的影響,探討B(tài)PA致男性不育的機(jī)制。方法:陰道涂片顯微鏡檢查精子確定受孕母鼠,受孕的母鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組(2mg/kg,20mg/kg,200mg/kg BPA),在母鼠受孕的第12天至產(chǎn)后的第21天分別用濃度分別為0,2,20,200mg/kg的BPA灌胃。將子代雄性小鼠飼養(yǎng)至產(chǎn)后第80天處死。取各組小鼠左側(cè)附睪用于檢測(cè)其精液參數(shù)(精液計(jì)數(shù)及活力)的變化,左側(cè)睪丸用于HE染色鏡下觀察睪丸組織病理學(xué)改變和免疫組化檢測(cè)睪丸支持細(xì)胞連接蛋白(Cx43、Occludin及N-cadherin)的表達(dá)變化,右側(cè)睪丸用于Western印跡檢測(cè)睪丸支持細(xì)胞連接蛋白(Cx43、Occludin及N-cadherin)的表達(dá)變化。結(jié)果:與對(duì)照組精子計(jì)數(shù)[(175.75±18.01)×106]相比,3種BPA濃度組精子計(jì)數(shù)[2mg/kg,(146.68±8.67)×106;20mg/kg,(136.10±8.75)×106;200mg/kg,(112.42±12.45)×106]均明顯降低(P0.05)。并且隨著B(niǎo)PA濃度的升高精子計(jì)數(shù)降低。精子活力也發(fā)生同樣的變化。小鼠睪丸組織HE染色顯示:與對(duì)照組相比,2mg/kg BPA組生精小管結(jié)構(gòu)較為清晰,各級(jí)生精細(xì)胞排列基本有序,官腔成熟精子減少,無(wú)脫落生精細(xì)胞。20mg/kg BPA組生精小管結(jié)構(gòu)基本清晰,各級(jí)生精細(xì)胞排列基本有序,官腔成熟精子明顯減少,可見(jiàn)明顯脫落生精細(xì)胞。200mg/kg BPA組生精小管結(jié)構(gòu)紊亂,各級(jí)生精細(xì)胞排列明顯減少,排列紊亂,官腔成熟精子明顯減少,可見(jiàn)明顯脫落生精細(xì)胞。免疫組化及Western印跡結(jié)果顯示:睪丸支持細(xì)胞連接蛋白的表達(dá)隨著B(niǎo)PA濃度升高呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。結(jié)論:圍生期BPA暴露降低睪丸支持細(xì)胞連接蛋白表達(dá),推測(cè)BPA通過(guò)影響睪丸支持細(xì)胞連接蛋白的表達(dá)影響精子發(fā)生過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】：雙酚A 圍生期 精子發(fā)生 支持細(xì)胞連接蛋白
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R698.2
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第一章 材料和試劑7-9
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物7
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑7-8
• 1.3 主要儀器設(shè)備與工具8-9
• 第二章 實(shí)驗(yàn)方法9-13
• 2.1 動(dòng)物飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組9
• 2.2 精子計(jì)數(shù)和活力檢測(cè)9
• 2.3 睪丸HE染色9-10
• 2.4 檢測(cè)Cx43、Occludin及N-cadherin表達(dá)水平10-12
• 2.4.1 免疫組化法操作步驟10
• 2.4.2 Western印跡檢測(cè)操作步驟10-12
• 2.4.2.1 總蛋白的提取與定量10-11
• 2.4.2.2 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）11
• 2.4.2.3 轉(zhuǎn)膜和孵育抗體11-12
• 2.4.2.4 化學(xué)發(fā)光、顯影、定影、凝膠圖象數(shù)據(jù)分析12
• 2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法12-13
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果13-17
• 3.1 精子計(jì)數(shù)和活力測(cè)定結(jié)果13
• 3.2 睪丸組織病理學(xué)檢查13-14
• 3.3 BPA對(duì)Cx43, Occludin和N-cadherin表達(dá)的影響14-17
• 第四章 討論17-18
• 結(jié)論18-19
• 參考文獻(xiàn)19-22
• 綜述22-34
• 參考文獻(xiàn)29-34
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果34-35
• 致謝35-36

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本文編號(hào)：322551