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干擾FSCN1基因表達(dá)對前列腺癌細(xì)胞凋亡、活性氧水平影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-22 05:16
  目的探討干擾FSCN1基因表達(dá)對前列腺癌細(xì)胞凋亡、活性氧 (ROS)水平影響及機(jī)制。方法以正常前列腺上皮細(xì)胞RWPE-1為對照細(xì)胞,通過RT-PCR及Western blot檢測前列腺癌LNCaP、DU145和PC-3細(xì)胞中FSCN1 mRNA及蛋白表達(dá);以LipofectamineTM 2000為載體,DU145細(xì)胞分為si-FSCN1組 (靶向抑制FSCN1的小干擾RNAs轉(zhuǎn)染DU145細(xì)胞)、陰性對照組 (隨機(jī)序列轉(zhuǎn)染DU145細(xì)胞)及空白對照組 (未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞),siRNA轉(zhuǎn)染48 h,Western blot檢測FSCN1、PCNA、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表達(dá)。CCK8檢測細(xì)胞活力,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率及ROS水平。多組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。結(jié)果與RWPE-1細(xì)胞比較,LNCaP、DU145和PC-3細(xì)胞中FSCN1 mRNA (1比 2.561±0.189、7.183±0.882、4.796±0.567、4.796±0.567)及蛋白表達(dá) (0.053±0.007... 

【文章來源】:中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版). 2020,10(01)

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    一、主要材料和儀器
    二、方法
        1.細(xì)胞培養(yǎng):
        2.前列腺癌細(xì)胞FSCN1 mRNA表達(dá):
        3.前列腺癌細(xì)胞FSCN1蛋白表達(dá):
        4. siRNA轉(zhuǎn)染:
        5. CCK8實(shí)驗(yàn):
        6.細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn):
        7.活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平檢測:
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
結(jié) 果
    一、前列腺癌細(xì)胞FSCN1 mRNA及蛋白表達(dá)
    二、FSCN1 siRNA轉(zhuǎn)染DU145細(xì)胞的效果
    三、FSCN1 siRNA對DU145細(xì)胞活力、凋亡率及ROS水平的影響
    四、FSCN1 siRNA對DU145細(xì)胞NF-κB信號的影響
討 論



本文編號:3153242

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