本文關鍵詞：吸煙暴露通過ERK5通路誘導SV-HUC-1細胞上皮間質(zhì)轉化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與研究目的膀胱癌是我國最常見的泌尿系腫瘤之一,其中絕大多數(shù)為膀胱移行細胞癌,由于具有復發(fā)性、侵襲性、產(chǎn)生獲得性耐藥等特點,其治療效果常不理想。然而膀胱癌的發(fā)生機制尚未完全闡明,吸煙是膀胱癌的首要因素,因此研究吸煙暴露與膀胱癌的關系對闡明膀胱癌的發(fā)生機制具有顯著的意義。上皮間質(zhì)轉化在細胞惡性轉化過程中起到關鍵的作用。本實驗旨在研究吸煙暴露對人正常膀胱上皮細胞上皮間質(zhì)轉化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影響,并探討ERK5通路在上述上皮間質(zhì)轉化的作用。方法采用MTT法篩選對SV HUC 1細胞(人正常膀胱上皮細胞)無細胞毒性的香煙懸液(cigarette smoking extract,CSE)劑量,繼而根據(jù)無毒劑量處理SV HUC 1細胞。(1)顯微鏡下觀察SV HUC 1細胞形態(tài)變化并拍照記錄;(2)采用transwell試驗檢測細胞侵襲能力變化;(3)隨后用western blotting和q RT PCR方法檢測上皮間質(zhì)轉化相關標志物表達變化;(4)采用western blotting分析ERK5通路活性變化,同時檢測AP 1通路蛋白活性變化;繼而用ERK5通路特異性抑制劑觀察對吸煙誘導的SV HUC 1細胞上皮間質(zhì)轉化作用的干預效果。結果(1)通過MTT實驗篩選出0%,0.25%,0.5%,1%CSE濃度作為實驗劑量,而2%及以上CSE具有細胞毒性效應,并具有統(tǒng)計學差異(P0.001);(2)顯微鏡下觀察SV HUC 1細胞在吸煙暴露5天后,細胞呈現(xiàn)分散趨勢,細胞形態(tài)由橢圓形變?yōu)殚L梭形,少部分細胞可見細長尾巴。transwell試驗證實人膀胱上皮細胞經(jīng)香煙處理后侵襲能力增強。(3)Western Blotting及q RT PCR顯示SV HUC 1細胞經(jīng)過吸煙處理后上皮標志物E-Cadherin、ZO-1表達呈現(xiàn)持續(xù)性下降,間質(zhì)標志物vimentin、N cadherin表達呈現(xiàn)持續(xù)性升高。(4)ERK5通路顯著激活,其中磷酸化ERK5(phosphorylated ERK5)持續(xù)升高,而總ERK5(total ERK5)持續(xù)降低,AP-1通路中phosphorylated c-jun和phosphorylated c-fos表達明顯升高。ERK5通路抑制劑XMD8-92可抑制AP-1通路活性,并逆轉吸煙誘導的上皮間質(zhì)轉化過程,具體表現(xiàn)為:細胞形態(tài)由間質(zhì)表型長梭狀恢復為上皮表型橢圓狀,且細胞間分散趨勢被有效遏制,細胞呈現(xiàn)相互聚集狀態(tài),transwell試驗證實細胞侵襲能力下降,Western Blotting及q RT PCR結果提示EMT上皮標志物經(jīng)XMD8-92處理后E-cadherin、ZO-1表達升高,間質(zhì)標志物vimentin、N cadherin表達下降。結論吸煙暴露可誘導人正常膀胱上皮細胞出現(xiàn)上皮間質(zhì)轉化,ERK5通路在上述上皮間質(zhì)轉化過程中起到重要調(diào)控作用,ERK5通路抑制劑可通過抑制AP 1通路活性阻遏上述上皮間質(zhì)轉化作用。這些發(fā)現(xiàn)證實了ERK5在吸煙引起的致癌過程中具有重要意義。
【關鍵詞】：膀胱癌 吸煙 上皮間質(zhì)轉化 ERK5 AP-1
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 1. 引言11-13
• 2. 材料和方法13-23
• 3. 結果23-29
• 4. 討論29-33
• 5. 結論33-34
• 參考文獻34-39
• 附錄39-40
• 致謝40-41
• 綜述41-52
• 參考文獻46-52

【相似文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 耿浩;吸煙暴露通過ERK5通路誘導SV-HUC-1細胞上皮間質(zhì)轉化[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

  本文關鍵詞：吸煙暴露通過ERK5通路誘導SV-HUC-1細胞上皮間質(zhì)轉化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：299719