本文關鍵詞：膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺構建及實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:構建一個集膀胱腫瘤細胞、成纖維細胞、巨噬細胞、內皮細胞聯(lián)合培養(yǎng)的微流控平臺(芯片),以多種細胞聯(lián)合培養(yǎng)為基礎,實現(xiàn)體外狀態(tài)下膀胱腫瘤微環(huán)境模擬。在此基礎上對微環(huán)境中間質細胞的表型進行觀測,同時探究腫瘤對化療藥物敏感性。方法:應用微流控技術構建一個由多個細胞培養(yǎng)室相互連通的微環(huán)境模擬平臺(芯片)。該平臺由基質膠灌注結構單元、細胞培養(yǎng)室及營養(yǎng)液灌流通道構成。膀胱腫瘤細胞及多種間質細胞分別接種于四個細胞培養(yǎng)室進行聯(lián)合培養(yǎng)。各種細胞產(chǎn)生的可溶性細胞因子及代謝物可擴散至整個平臺。應用免疫熒光技術分別對成纖維細胞的α-SMA因子、內皮細胞的CD105因子及巨噬細胞的Arg-1因子的表達量進行檢測。依據(jù)膀胱腫瘤患者臨床化療方案,結合該微環(huán)境模擬平臺,檢測膀胱腫瘤細胞對不同化療藥物的敏感性差異。結果:細胞形態(tài)學觀察顯示細胞在該平臺生長穩(wěn)定,膀胱腫瘤細胞在三維培養(yǎng)環(huán)境中出現(xiàn)環(huán)狀生長的趨勢。微環(huán)境模擬平臺中巨噬細胞在微橋中有遷移趨勢。與對照組相比,纖維細胞的α-SMA因子高表達,內皮細胞的CD105因子高表達,巨噬細胞的Arg-1因子高表達�；谠撈脚_,膀胱腫瘤T24細胞經(jīng)不同種類及不同配伍的化療藥物作用后,細胞死亡計數(shù)(每100個)有差異。結論:本研究通過腫瘤細胞與多種間質細胞聯(lián)合培養(yǎng),依托微流控技術,在體外環(huán)境下成功構建了膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺。在該平臺中,微環(huán)境模擬狀態(tài)下間質細胞生物學表型有活化趨勢。該模擬平臺實現(xiàn)了膀胱腫瘤T24細胞對多種化療藥物作用敏感性的差異檢測,為進一步探究腫瘤微環(huán)境對化療藥物的抗藥性機制提供了良好平臺。
【關鍵詞】：膀胱癌 微環(huán)境 聯(lián)合培養(yǎng) 藥物敏感性 微流控平臺
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 1.材料與試劑8-10
• 1.1 實驗細胞及來源8
• 1.2 實驗試劑及來源8
• 1.3 主要實驗儀器8-10
• 2.實驗方法10-16
• 2.1 微環(huán)境模擬平臺（芯片）結構設計10
• 2.2 微環(huán)境模擬平臺（芯片）制作10-12
• 2.2.1 光刻陽模制作11
• 2.2.2 PDMS基片制作11-12
• 2.3 平臺（芯片）有效性檢測12-13
• 2.3.1 基質膠流道加注基質膠12
• 2.3.2 營養(yǎng)液灌流通道的分子彌散效果檢測12
• 2.3.3 細胞培養(yǎng)室間分子的彌散效果檢測12-13
• 2.4 細胞培養(yǎng)13
• 2.5 微環(huán)境模擬平臺（芯片）中細胞接種及細胞活化因子檢測13-14
• 2.5.1 細胞接種13-14
• 2.5.2 細胞活化因子檢測14
• 2.6 膀胱腫瘤對化療藥物敏感性檢測14-16
• 2.6.1 化療藥物灌流液配制14-15
• 2.6.2 T24細胞對化療藥物敏感性檢測15-16
• 3. 結果16-20
• 3.1 平臺構建及分子彌散有效性16
• 3.1.1 平臺構建16
• 3.1.2 平臺的分子彌散有效性檢測16
• 3.2 細胞形態(tài)學觀察16-18
• 3.2.1 細胞生長17
• 3.2.2 膀胱腫瘤T24細胞網(wǎng)狀結構形成17
• 3.2.3 巨噬細胞遷移17-18
• 3.3 微環(huán)境模擬平臺中間質細胞的活化18-19
• 3.4 微環(huán)境模擬平臺中T24細胞對化療藥物的敏感性19-20
• 4. 討論20-22
• 結論22-23
• 參考文獻23-26
• 綜述26-37
• 參考文獻34-37
• 攻讀學位期間的研究成果37-38
• 致謝38-39

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1 楊航,宋波,熊恩慶,金錫御,陳昭頡,方強;單核細胞趨化蛋白1轉基因對膀胱腫瘤生物學行為的影響[J];中華泌尿外科雜志;2000年03期

2 王雪燕,鄒淑麗,畢曉靜,焦健;嗜酸細胞性膀胱炎誤診膀胱腫瘤1例[J];武警醫(yī)學;2000年11期

3 王秀榮;彩超診斷小兒膀胱腫瘤1例[J];中華超聲影像學雜志;2000年04期

4 席志軍;上尿路腫瘤和隨后發(fā)生的膀胱腫瘤有明顯的微衛(wèi)星改變[J];中華泌尿外科雜志;2001年07期

5 薛波新,單玉喜,李玲玲,顏純海;膀胱原始神經(jīng)外胚層瘤一例報告[J];中華泌尿外科雜志;2001年08期

6 王棟,王禾;核基蛋白與膀胱腫瘤[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;2001年01期

7 于雅濱;膀胱腫瘤的超聲診斷(附10例臨床分析)[J];黑龍江醫(yī)學;2001年03期

8 雷玉燕,毛菊連;膀胱腫瘤患者膀胱內化療的護理[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志;2001年23期

9 程錚;膀胱胚胎型橫紋肌肉瘤一例[J];右江醫(yī)學;2001年06期

10 文兆峰,王美順;經(jīng)尿道汽化電切術治療表淺膀胱腫瘤39例[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2001年03期

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1 丁小波;粱朝朝;蔣云仙;葉元平;劉明;邢江n\;張賢生;郝宗耀;周俊;樊松;邰盛;王克孝;;膀胱腫瘤數(shù)據(jù)庫的建立、意義與資料分析[A];第十六屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2009年

2 余賢明;;經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術治療膀胱腫瘤[A];貴州省醫(yī)學會泌尿外科分會2006年學術年會論文匯編[C];2006年

3 胡曉華;張子揚;彭煜;;膀胱腫瘤的手術方式探討[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

4 劉會恩;曲嘉林;張萬峰;王洪杰;王貴平;馬思紅;洪寶發(fā);;綠激光治療淺表膀胱腫瘤62例報告[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

5 王錫斌;鄒陽陽;;超聲引導對膀胱腫瘤穿刺活檢的臨床價值[A];中華醫(yī)學會第十次全國超聲醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2009年

6 魏強;鄭碩;李響;李虹;楊宇如;王佳;曾浩;韓平;王坤杰;石明;盧一平;范天勇;陳宗福;;近十一年華西醫(yī)院泌尿外科膀胱腫瘤住院病人的構成情況[A];第十六屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2009年

7 鹿瑤;魏瑩;馮卓穎;;膀胱腫瘤的超聲診斷價值[A];中國超聲醫(yī)學工程學會第八屆全國腹部超聲學術會議論文匯編[C];2010年

8 王淑玉;李永忠;;彩超檢查膀胱腫瘤的漏、誤診原因分析[A];2010’中國西部聲學學術交流會論文集[C];2010年

9 湯富剛;呂江紅;壽金朵;徐海珊;楊倩;唐海林;潘美;林莎;方凡;趙博文;;腔內超聲對膀胱腫瘤診斷價值的研究[A];2005年浙江省超聲醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2005年

10 夏麗萍;樓軍;孫金艷;趙林芳;屠伶伶;;超聲診斷憩室內膀胱腫瘤5例[A];2006年浙江省超聲醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2006年

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1 第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院泌尿外科教授 靳風爍邋鄒爭春 整理;揭秘膀胱腫瘤“免疫黑洞”[N];健康報;2007年

2 健康時報特約記者 劉東邋鄒爭春;可抑制膀胱腫瘤復發(fā)[N];健康時報;2007年

3 孫震鵬;膀胱腫瘤術后灌注前別喝水[N];衛(wèi)生與生活報;2008年

4 孫健邋胡瓊珍;腹腔鏡下成功根治小兒膀胱腫瘤[N];健康報;2008年

5 東南大學附屬中大醫(yī)院泌尿外科 陳明　(主任醫(yī)師) 吳葉青;膀胱腫瘤需要做哪些檢查[N];家庭醫(yī)生報;2008年

6 河南 主任醫(yī)師 張祥生;膀胱也常長腫瘤[N];家庭醫(yī)生報;2005年

7 張超群 范曉莉;建立膀胱腫瘤免疫治療動物模型[N];中國醫(yī)藥報;2005年

8 北京同仁醫(yī)院泌尿外科主任醫(yī)師 劉躍新;膀胱腫瘤早診新技術[N];健康報;2009年

9 代廷榮;無痛血尿要防腫瘤[N];中國石油報;2003年

10 姚向陽;鈥激光無血切割膀胱腫瘤療效好[N];中國醫(yī)藥報;2004年

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1 劉全亮;TRPV2對膀胱腫瘤細胞生物學影響的實驗研究[D];武漢大學;2013年

2 張堯;基于樹突狀細胞的膀胱腫瘤疫苗的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2008年

3 金建軍;血管內皮生長因子在膀胱腫瘤血、尿中的表達和反義基因治療的研究[D];復旦大學;2003年

4 沈海山;斑蝥素和去甲斑蝥素抗膀胱腫瘤作用的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2008年

5 李長福;多藥聯(lián)合預防膀胱腫瘤術后復發(fā)的實驗研究和臨床觀察[D];吉林大學;2008年

6 靳風爍;膀胱腫瘤基因瘤苗的制備及抗腫瘤作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學;1995年

7 李杜漸;單核細胞趨化因子在卡介苗誘導膀胱局部抗腫瘤免疫反應中的作用及機制[D];四川大學;2004年

8 蘭衛(wèi)華;選擇性環(huán)氧化酶2抑制劑塞來昔布抗膀胱腫瘤作用的體外實驗研究和臨床初步研究[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

9 朱耀豐;1. 兔骨髓間充質干細胞對VX2膀胱腫瘤生長及間質重構的影響 2. 鈥激光治療非肌層浸潤性膀胱腫瘤的療效與安全性評價[D];山東大學;2009年

10 郭啟振;Survivin在膀胱腫瘤早期診斷，預后判斷以及細胞凋亡方面的作用[D];中國醫(yī)科大學;2006年

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1 馮騰飛;二次經(jīng)尿道電切術在治療非肌層浸潤膀胱腫瘤療效的系統(tǒng)評價[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 趙亞波;ASIR技術在膀胱腫瘤模型低劑量CT掃描中的應用研究[D];廣東藥學院;2015年

3 吳紅霞;舒適尿管在骨科術后預防尿管相關性膀胱不適的臨床研究[D];四川醫(yī)科大學;2015年

4 丁祥黎;AngⅡAT1R拮抗劑對人膀胱腫瘤裸鼠皮下移植瘤生長和對血管生成中的影響[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

5 劉鵬飛;膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺構建及實驗研究[D];青島大學;2015年

6 劉建河;膀胱腫瘤尿脫落細胞端粒酶活性的實驗研究[D];江西醫(yī)學院;2000年

7 鐘恩鵬;血管緊張素II及其1型受體在膀胱腫瘤組織中的表達及意義[D];昆明醫(yī)科大學;2013年

8 陳俊儒;高級別膀胱腫瘤術后復發(fā)相關影響因素分析[D];寧夏醫(yī)科大學;2013年

9 劉亞東;熒光原位雜交技術對膀胱腫瘤診斷和預后評價的研究[D];揚州大學;2013年

10 李峰;膀胱腫瘤預后觀察及吸煙對非肌層浸潤性膀胱腫瘤預后的影響[D];蘇州大學;2013年

  本文關鍵詞：膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺構建及實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：285530