本文關(guān)鍵詞：帕立骨化醇在糖尿病腎病大鼠腎小管間質(zhì)纖維化的作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的流行病學顯示,我國糖尿病腎病(DKD)已迅速上升為終末期腎病的重要原因,在透析患者中比例僅次于慢性腎小球腎炎。腎小管在DKD初期便發(fā)生改變,伴隨著間質(zhì)纖維化的出現(xiàn),明顯增加腎臟的不良預(yù)后。既往研究發(fā)現(xiàn),腎小管-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)和腎小管間質(zhì)纖維化密切相關(guān),且受多種內(nèi)在機制共同調(diào)控,包括Klotho、Wnt/β-catenin及TGF-β信號途徑。因此,通過調(diào)控以上目標蛋白的表達或信號途徑的傳導或可成為抑制DKD腎小管上皮EMT及腎間質(zhì)纖維化的重要途徑。本研究利用帕立骨化醇干預(yù)DKD大鼠模型,以探討其對腎小管上皮EMT及小管間質(zhì)纖維化的作用及可能機制,最終為DKD腎臟纖維化的防治提供新線索。方法利用鏈脲佐菌素建立大鼠糖尿病腎病模型。將DKD大鼠按隨機數(shù)字表法分為:(1)帕立骨化醇干預(yù)組(P組):帕立骨化醇溶于丙二醇中,于造模成功后第2d給藥,劑量為0.4μg.kg-1,3次/周;(2)糖尿病腎病組(D組):給予等體積的丙二醇腹腔注射。設(shè)置正常對照組(C組):干預(yù)方法同D組。帕立骨化醇連續(xù)干預(yù)4周或12周后,取各組大鼠血、尿及腎組織標本。檢測一般生化指標;取腎組織進行病理學檢查;利用免疫組化及Western印跡技術(shù)檢測腎組織E-鈣粘蛋白(Ecadherin)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、纖連蛋白(FN)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、β-catenin、Wnt-4及Klotho蛋白的表達;并進行各觀察指標間的相關(guān)性分析。結(jié)果(1)一般指標:D組大鼠SCr、BUN、24 h尿蛋白及UACR水平均較C組上升,而P組均較D組下降(均P0.05);與C組比較,D組血磷與i PTH水平均上升,血鈣下降,但相較于D組,P組血磷與i PTH均回降,血鈣回升(均P0.05)。(2)病理學檢查:C組大鼠腎小管結(jié)構(gòu)完整清晰,無明顯病理改變;D組可見腎小管間質(zhì)局部炎癥細胞浸潤,腎小管上皮細胞脫落,小管擴張,基底膜斷裂,與C組比較,纖維化面積增大(P0.05),而P組較D組病理改變較輕,纖維化面積較小(P0.05)。(3)各組腎組織E-cadherin、α-SMA及FN蛋白的表達:D組大鼠腎組織Ecadherin蛋白表達低于C組,而P組高于D組(均P0.05);與C組比較,D組大鼠腎組織α-SMA與FN蛋白表達均明顯增加,而P組表達均較D組減少(均P0.05)。(4)各組腎組織TGF-β1、Wnt4、β-catenin及Klotho蛋白的表達:與C組比較,D組Klotho蛋白水平降低,而P組較D組水平升高(均P0.05);與C組比較,D組TGF-β1、Wnt-4和β-catenin蛋白表達水平顯著上升,而與D組比較,P組以上蛋白的水平均較D組下降(均P0.05)。(5)各觀察指標間相關(guān)性分析:Klotho蛋白水平和E-cadherin蛋白水平呈正性相關(guān)(r=0.924,P0.05),而與纖維化面積、α-SMA、FN、TGF-β1、Wnt-4及β-catenin均呈負相關(guān)(r=-0.886,P0.05;r=-0.806,P0.05;r=-0.623,P0.05;r=-0.749,P0.05;r=-0.855,P0.05;r=-0.881,P0.05)。結(jié)論(1)帕立骨化醇可抑制DKD腎小管間質(zhì)纖維化,改善腎功能,同時減輕尿蛋白,對腎臟具有一定的保護作用。(2)帕立骨化醇可阻斷DKD腎小管上皮的EMT。(3)帕立骨化醇可促進DKD腎小管Klotho表達,同時抑制腎小管間質(zhì)TGF-β1、Wnt-4及β-catenin表達。其中,通過增加Klotho的表達,從而抑制Wnt/β-catenin傳導途徑激活和TGF-β1合成,成為帕立骨化醇阻斷DKD腎小管上皮EMT及小管間質(zhì)纖維化的內(nèi)在途徑之一。結(jié)果
【關(guān)鍵詞】：帕立骨化醇 糖尿病腎病 腎小管間質(zhì)纖維化 Wnt/β-catenin信號通路 Klotho
【學位授予單位】：寧波大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-14
• 第一章 材料與方法14-23
• 1 材料14-17
• 1.1 實驗動物14
• 1.2 實驗藥物14
• 1.3 主要實驗試劑14-15
• 1.4 主要實驗試劑的配制15-16
• 1.5 主要實驗器材與設(shè)備16-17
• 2 方法17-23
• 2.1 動物模型的建立17-18
• 2.2 動物分組與給藥18
• 2.3 動物一般情況的觀察18
• 2.4 標本收集與處理18
• 2.5 血、尿指標檢測18
• 2.6 腎臟病理學檢查18-19
• 2.7 免疫組化19-20
• 2.8 Western印跡20-22
• 2.9 統(tǒng)計學處理22-23
• 第二章 結(jié)果23-39
• 1 糖尿病腎病模型建立情況23
• 2 一般情況23
• 3 體重、腎重與腎重/體重指數(shù)23-25
• 4 空腹血糖25-26
• 5 血清肌酐與血尿素氮26
• 6 尿蛋白26-27
• 7 血鈣磷與i PTH27-28
• 8 腎臟病理28-30
• 9 各組腎組織E-cadherin、α-SMA及FN蛋白的表達30-32
• 10 各組腎組織TGF-β1 蛋白的表達32-33
• 11 各組腎組織Wnt4及 β-catenin蛋白的表達33-35
• 12 各組腎組織Klotho蛋白的表達35-37
• 13 各觀察指標間的相關(guān)性分析37-39
• 第三章 討論39-43
• 1 帕立骨化醇對糖尿病腎病腎小管上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化及TGF-β1 表達的影響39
• 2 帕立骨化醇對糖尿病腎病Wnt/β-catenin信號途徑的影響39-41
• 3 帕立骨化醇對糖尿病腎病腎小管上皮Klotho蛋白表達的影響41-43
• 第四章 主要結(jié)論與展望43-44
• 參考文獻44-50
• 附錄A 英文縮寫索引50-51
• 附錄B 綜述51-61
• 參考文獻57-61
• 在學研究成果61-63
• 致謝63

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 黃仲義;黃嘉驊;趙永紅;;帕立骨化醇的臨床藥理學[J];中國新藥與臨床雜志;2013年11期

2 鄒敏書;余健;聶國明;何威遜;羅莉漫;徐洪濤;;帕立骨化醇抑制血管緊張素活性減輕足細胞損傷[J];中國藥師;2011年09期

3 鄒敏書;呂品;余健;聶國明;何威遜;羅莉漫;徐洪濤;;氯沙坦和帕立骨化醇聯(lián)合治療對尿毒癥鼠腎臟的保護作用[J];中國藥師;2010年04期

4 鄒敏書;余健;聶國明;何威遜;羅莉漫;徐洪濤;;帕立骨化醇對糖尿病大鼠腎臟保護作用的機制探討[J];解放軍藥學學報;2011年06期

5 張益民;;帕立骨化醇對CKD患者蛋白尿的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2009年11期

6 王U

本文編號：281619