第一部分:丙酮法與凍干法提取泌尿系結(jié)石尿液蛋白差異性分析目的:探討丙酮沉淀法與凍干法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白的凝膠條帶差異;方法:(1)收集泌尿系結(jié)石男性患者和女性患者各2例晨起第一次尿液50ml,去除細胞碎片后分裝,-80℃凍存;(2)使用凍干法和丙酮沉淀法富集尿液蛋白;(3)Bradford法測量尿蛋白濃度;(4)SDS-PAGE比較各組間蛋白;(5)Lane 1D凝膠成像分析軟件分析二者蛋白凝膠光密度值,SPSS17.0進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果:1、丙酮沉淀法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白濃度(0.92±0.13mg/ml)高于凍干法提取濃度(2.28±0.55mg/ml),二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);2、丙酮沉淀法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白凝膠約有4~7個蛋白條帶主要集中在55~95KD、20~34 KD;凍干法提取蛋白凝膠約有3~5個蛋白條帶,主要集中在72KD附近和26KD附近。3、丙酮沉淀法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白凝膠平均光密度值(4.52×107±1.31×107),凍干法提取蛋白凝膠平均光密度值(3.03×107±0.79×107),二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:1、凍干法所提取尿液蛋白濃度高于丙酮沉淀法,且二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);2、丙酮沉淀法提取尿液蛋白種類數(shù)目高于凍干法,但二者IOD值差異無統(tǒng)計學(xué)意義。第二部分:泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石尿液蛋白差異分析目的:探討泌尿系統(tǒng)草酸鈣結(jié)石、草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液蛋白與健康人群尿液蛋白的差異性;方法:(1)收集健康成年男性和女性各2例,草酸鈣結(jié)石男性患者和女性患者各6例,草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石男性患者和女性患者各6例,晨起空腹第一次尿液50ml,去除細胞碎片后分裝凍存;(2)使用丙酮沉淀法提取各組實驗樣本尿液蛋白;(3)使用SDS-PAGE比較各組間蛋白凝膠條帶差異;(4)數(shù)據(jù)分析。結(jié)果:1、男性各組蛋白濃度:Ca Ox組蛋白濃度1.91±0.46ug/ul,Ca Ox+CH組蛋白濃度2.04±0.87ug/ul,正常對照組蛋白濃度1.25±0.11ug/ul;各組間蛋白濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2、女性各組蛋白濃度:Ca Ox組蛋白濃度1.61±0.65ug/ul,Ca Ox+CH組蛋白濃度1.72±0.81ug/ul,正常對照組蛋白濃度1.07±0.45ug/ul;各組間蛋白濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液蛋白凝膠有4~7個條帶,分子量主要集中在55~95KD和20~34KD附近,健康人群尿液蛋白凝膠有1~3個條帶,主要集中在72KD附近。結(jié)論:1、丙酮沉淀法提取草酸鈣結(jié)石、草酸鈣混合碳酸磷灰石及健康人群尿液蛋白濃度無明顯差異;2、泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液蛋白種類高于健康人群,分子量主要集中在55~95KD和20~34KD附近。第三部分:泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石相關(guān)尿液蛋白的定量分析目的:定量對比分析健康人群和草酸鈣結(jié)石、草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液中OPN、THP、NGAL、Albumin和α-1-microglobulin的含量;方法:(1)收集健康成年男性和女性各10例,草酸鈣結(jié)石男性患者(n=16)和女性患者(n=13),草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石男性患者(n=13)和女性患者(n=16),晨起空腹第一次尿液50ml,去除細胞碎片后分裝,-80℃凍存;(2)Luminex液相芯片檢測系統(tǒng)分析各組樣本內(nèi)各蛋白濃度。(3)數(shù)據(jù)分析。結(jié)果:1、THP:(1)男性組各組間數(shù)據(jù)對比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(2)女性組:正常組(8.46±1.64ug/ml)對比Ca Ox組(1.91±0.43ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH組(1.98±0.37ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);2、NGAL:(1)男性組:正常組(63.32±12.23ng/ml)對比Ca Ox組(427.79±90.17ng/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH(196.93±38.50ng/ml)組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(2)女性組:正常組(30.32±3.92ng/ml)對比Ca Ox組(503.82±174.35ng/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH(552.85±156.78ng/ml)組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3、AMBP:男女各組間數(shù)據(jù)對比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);4、Albumin:(1)男性組:正常組(48.17±6.21ug/ml)對比Ca Ox組(309.38±33.44ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH組(194.20±33.85ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(2)女性組:正常組(33.55±3.51ug/ml)對比Ca Ox組(80.69±8.78ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH組(91.72±9.60ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);5、OPN:(1)男性組:正常組(4.65±0.99ug/ml)對比Ca Ox組(1.15±0.40ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH組(0.90±0.12ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(2)女性組:正常組(1.82±0.28ug/ml)對比Ca Ox組(0.28±0.09 ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);正常組對比Ca Ox+CH組(0.15±0.09ug/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);結(jié)論:相對于健康人群,泌尿系草酸鈣和草酸鈣混合碳酸磷灰石患者尿液中的THP濃度較低(男性組差異無統(tǒng)計學(xué)意義)、NAGL濃度較高、Albumin濃度較高、OPN濃度較低、AMBP濃度無差異。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R691.4

【參考文獻】

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1 傅龍龍;王共先;傅斌;;泌尿系結(jié)石病因?qū)W的研究進展[J];天津醫(yī)藥;2012年09期

2 嚴春寅;王亮良;;尿路結(jié)石的流行病學(xué)特點及其預(yù)防[J];臨床外科雜志;2008年11期

本文編號：2807882