【摘要】：第一部分控制代謝對(duì)糖尿病性勃起功能障礙影響的研究目的:觀察男性糖尿病勃起功能障礙患者控制代謝對(duì)勃起功能的影響。方法:選取我院2015~2018年新診斷的男性2型糖尿病(按美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)2014年糖尿病診斷及分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)OGTT試驗(yàn)診斷)合并勃起功能障礙(Erectile dysfunction,ED)(IIEF-521分)患者80例(排除心源性ED),給予飲食運(yùn)動(dòng)治療基礎(chǔ)上,強(qiáng)化血糖控制,降脂等改善代謝治療6個(gè)月,使其達(dá)到控制目標(biāo):FBG≤6.0 mmol/L,PBG≤8.0 mmol/L,Hb A1c≤6.5%,CHO4.6mmol/L,TG1.7mmol/L,研究前后給予國(guó)際勃起功能指數(shù)(問(wèn)卷)(IIEF-5)評(píng)估ED。結(jié)果:治療后有10例患者出現(xiàn)癥狀明顯好轉(zhuǎn),且IIEF-5問(wèn)卷調(diào)查得分21。其余患者治療后癥狀沒(méi)有明顯好轉(zhuǎn),治療前、后IIEF-5問(wèn)卷調(diào)查得分由(13±1.6)改變?yōu)?16±0.8)(P0.05)。結(jié)論:初診的男性糖尿病勃起功能障礙患者單純嚴(yán)格的控制血糖并不能明顯改善糖尿病性勃起功能障礙。第二部分津力達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化及凋亡的影響及機(jī)制目的:探討津力達(dá)顆粒對(duì)大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞(corpus cavernosum smooth muscle cells,CCSMCs)表型轉(zhuǎn)化及凋亡的影響及機(jī)制。方法:1.將原代SD大鼠CCSMCs進(jìn)行傳代培養(yǎng),將所有細(xì)胞與5.5mmol/L葡萄糖一起孵育24h后按照更換的培養(yǎng)基不同分為7組:(1)正糖組(NG):生理濃度葡萄糖5.5 mmol/L;(2)高糖組(HG):葡萄糖25 mmol/L;(3)高滲組(HC):甘露醇25mmol/L(此組滲透壓與高糖組相同,用于鑒別高糖誘導(dǎo)的損傷是源于高糖還是源于高滲透壓);(4)高糖+PD98059組(HG+PD),葡萄糖25 mmol/L+50μmol/L PD98059,PD98059提前HG 30 min加入;(5)高糖+低濃度津力達(dá)組(HG+LJLD):葡萄糖25 mmol/L+津力達(dá)50mg/L,加入葡萄糖25 mmol/L 1小時(shí)之后進(jìn)行藥物的處理;(6)高糖+中濃度津力達(dá)組(HG+MJLD):葡萄糖25 mmol/L+津力達(dá)150mg/L,加藥順序同前;(7)高糖+高濃度津力達(dá)組(HG+HJLD):葡萄糖25 mmol/L+津力達(dá)300mg/L,加藥順序同前。各組細(xì)胞處理完后分別于0、24、48h在高倍鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,48h收集細(xì)胞,Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、堿性調(diào)寧蛋白(calponin1)和骨橋蛋白(osteopontin,OPN)的表達(dá);信號(hào)通路蛋白ERK1/2、p-ERK1/2,凋亡蛋白caspase-3、bcl-2的表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1.CCSMCs成長(zhǎng)和形態(tài)部分單層,排列開(kāi)始呈現(xiàn)方向性,多平行排列,細(xì)胞密度高時(shí)排列成束狀或旋渦狀,部分區(qū)域上下起伏,呈典型“峰-谷”樣平滑肌細(xì)胞特征(如圖1-1)。CCSMCs在傳代培養(yǎng)中,開(kāi)始呈長(zhǎng)梭形和星形,隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)和細(xì)胞密集程度增大,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)融合時(shí),部分區(qū)域多層重疊。NG組,隨著時(shí)間延長(zhǎng),CCSMs生長(zhǎng)情況好,成活率高;細(xì)胞多呈束狀或旋渦狀,排列較具方向性,細(xì)胞多單層生長(zhǎng)。HG組,隨著干預(yù)時(shí)間延長(zhǎng),CCSMCs數(shù)量減少,CCSMCs形態(tài)從開(kāi)始細(xì)長(zhǎng)的束狀或旋渦狀形到更寬更凌亂的形狀。HG+JLD各組的CCSMCs細(xì)胞數(shù)量未明顯減少,細(xì)胞形態(tài)沒(méi)有明顯變化。2.表型蛋白的變化與NG組比較,HG組α-SMA、calponin1表達(dá)均顯著減少(P0.05);OPN表達(dá)顯著增多(P0.05)。高糖加入津力達(dá)干預(yù)后,與HG組比較,津力達(dá)各組ɑ-SMA、calponin1表達(dá)增多;OPN表達(dá)顯著減少(P0.05),津力達(dá)濃度越大,逆轉(zhuǎn)越明顯。HC組無(wú)上述改變。3.凋亡蛋白及凋亡率的變化與NG組比較,HG組caspase-3蛋白表達(dá)顯著上升(P0.01);bcl-2蛋白表達(dá)顯著下降(P0.01),與HG組比較,津力達(dá)各組caspase-3蛋白表達(dá)顯著下降(P0.05),bcl-2蛋白表達(dá)顯著上升(P0.01)。與NG組比較,流式測(cè)得HG組CCSMCs凋亡率顯著升高(P0.01);津力達(dá)各組CCSMCs凋亡率較HG組明顯減少(P0.05)。4.通路蛋白ERK1/2變化與NG組比較,HG組p-ERK1/2蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01);加入ERK抑制劑PD98059后p-ERK1/2表達(dá)減低(P0.05),ɑ-SMA、calponin1表達(dá)回升;OPN表達(dá)減少;津力達(dá)干預(yù)后,各組p-ERK1/2蛋白表達(dá)較HG組下降(P0.05)。結(jié)論:高糖可能通過(guò)上調(diào)ERK1/2的磷酸化進(jìn)而誘導(dǎo)CCSMCs從收縮型向合成型轉(zhuǎn)化并誘導(dǎo)CCSMCs凋亡;津力達(dá)可能通過(guò)抑制ERK1/2的磷酸化,改善高糖誘導(dǎo)的上述變化。
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R587.2;R698

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本文編號(hào)：2794459