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GPI-B7-1錨定腎癌細胞膜對細胞毒性T淋巴細胞殺傷自身腫瘤的促進作用

發(fā)布時間:2020-08-08 03:28
【摘要】:目的探討糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1錨定腎細胞癌(RCC)細胞膜能否提高細胞毒性T淋巴細胞(CTL)對自身腫瘤的殺傷能力。方法取出本實驗室凍存于液氮罐中的經(jīng)轉(zhuǎn)基因高表達GPI-B7-1的CHO/DHFR-細胞,再從該CHO/DHFR-細胞上洗脫目的蛋白GPI-B7-1,并進行分離純化,Western blotting法檢測活性。建立腎癌細胞系CG-6327。將CTL分別與GPI-B7-1-CG-6327細胞膜、CG-6327細胞膜、GPI-B7-1-CHO/DHFR-細胞膜作用24 h,此時得到被三種不同物質(zhì)活化的CTL細胞,再設(shè)單純體外培養(yǎng)的CTL作為對照,分別將上述四種CTL細胞加入到已接種有CG-6327細胞的96孔板中,進行24 h殺傷試驗,MTT法測定CTL的殺傷活性。結(jié)果經(jīng)GPI-B7-1-CG-6327細胞膜活化的CTL細胞殺傷活性(A值)與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),其他幾種物質(zhì)活化的CTL細胞殺傷活性與對照組比較,P均0.05。結(jié)論通過基因重組方法表達的GPI-B7-1錨定蛋白可被轉(zhuǎn)移并錨定在RCC細胞膜表面提供第二刺激信號,GPI-B7-1錨定后的具有雙刺激信號的RCC細胞膜對于CTL的活化有增強作用。

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本文編號:2784974

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