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GPI-B7-1錨定腎癌細(xì)胞膜對(duì)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞殺傷自身腫瘤的促進(jìn)作用

發(fā)布時(shí)間:2020-08-08 03:28
【摘要】:目的探討糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1錨定腎細(xì)胞癌(RCC)細(xì)胞膜能否提高細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)對(duì)自身腫瘤的殺傷能力。方法取出本實(shí)驗(yàn)室凍存于液氮罐中的經(jīng)轉(zhuǎn)基因高表達(dá)GPI-B7-1的CHO/DHFR-細(xì)胞,再從該CHO/DHFR-細(xì)胞上洗脫目的蛋白GPI-B7-1,并進(jìn)行分離純化,Western blotting法檢測活性。建立腎癌細(xì)胞系CG-6327。將CTL分別與GPI-B7-1-CG-6327細(xì)胞膜、CG-6327細(xì)胞膜、GPI-B7-1-CHO/DHFR-細(xì)胞膜作用24 h,此時(shí)得到被三種不同物質(zhì)活化的CTL細(xì)胞,再設(shè)單純體外培養(yǎng)的CTL作為對(duì)照,分別將上述四種CTL細(xì)胞加入到已接種有CG-6327細(xì)胞的96孔板中,進(jìn)行24 h殺傷試驗(yàn),MTT法測定CTL的殺傷活性。結(jié)果經(jīng)GPI-B7-1-CG-6327細(xì)胞膜活化的CTL細(xì)胞殺傷活性(A值)與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他幾種物質(zhì)活化的CTL細(xì)胞殺傷活性與對(duì)照組比較,P均0.05。結(jié)論通過基因重組方法表達(dá)的GPI-B7-1錨定蛋白可被轉(zhuǎn)移并錨定在RCC細(xì)胞膜表面提供第二刺激信號(hào),GPI-B7-1錨定后的具有雙刺激信號(hào)的RCC細(xì)胞膜對(duì)于CTL的活化有增強(qiáng)作用。

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本文編號(hào):2784974

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