【摘要】：目的：觀(guān)察姜黃素（Curcumin，Cur）亞型B14對(duì)血管緊張素II誘導(dǎo)人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞（Human Kidney11,HK11）損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。 方法：首先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板和CCK-8比色法檢測(cè)細(xì)胞的存活情況，以檢驗(yàn)所選的姜黃素及其亞型B13、B14是否對(duì)HK11細(xì)胞具有毒害作用。然后用ELISA法檢測(cè)不同濃度和不同時(shí)間條件下血管緊張素II對(duì)HK11細(xì)胞Cleaved caspase-3蛋白表達(dá)的影響，以確定建立最佳糖尿病腎病細(xì)胞模型的血管緊張素II濃度和培養(yǎng)時(shí)間。最后利用此模型研究姜黃素亞型B14對(duì)HK11細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制。實(shí)驗(yàn)分為CON組、AngII組、B13組、Cur組、B14組、CON+PI3K抑制劑組、AngII+PI3K抑制劑組、B13+PI3K抑制劑組、Cur+PI3K抑制劑組、B14+PI3K抑制劑組，共十組。以ELISA法和Western-blot法檢測(cè)Cleaved caspase-3的表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。 結(jié)果:細(xì)胞計(jì)數(shù)及CCK-8比色法結(jié)果顯示姜黃素及其亞型B13、B14對(duì)HK11細(xì)胞均無(wú)毒害作用（P＞0.05）；以AngII250nM培養(yǎng)48h時(shí)，HK11細(xì)胞Cleaved caspase-3的表達(dá)量較空白組顯著升高（p0.05)；姜黃素組和B14組的Cleaved caspase-3蛋白表達(dá)量下降，與AngII組相比差異具有顯著性(p0.05），以B14組的細(xì)胞凋亡降低最為明顯（p0.01）；給予PI3K抑制劑后，姜黃素+PI3K抑制劑組、B14+PI3K抑制劑組與姜黃素組、B14組相比Cleaved caspase-3表達(dá)量均升高(p0.05）。 結(jié)論：姜黃素亞型B14對(duì)血管緊張素Ⅱ引起的HK11細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，且此種保護(hù)作用與PI3K信號(hào)通路有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R587.2;R692.9
【圖文】：

第 4 章 結(jié) 果4.1 姜黃素及其亞型 B13、B14 對(duì)細(xì)胞活性的影響為檢驗(yàn)所選的姜黃素及其亞型 B13、B14 是否對(duì) HK11 細(xì)胞具有毒害作用，我們使其分別與細(xì)胞共同孵育 24h，48h，72h，然后分別用 CCK-8 比色法和細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞的存活及增殖情況。具體實(shí)驗(yàn)分組和結(jié)果見(jiàn)和圖 4.1、圖 4.2。

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根據(jù)研究結(jié)果，本實(shí)驗(yàn)所選的姜黃素及其亞型 B13、B14 對(duì)1 細(xì)胞均無(wú)毒害作用，與空白對(duì)照組（Control）相比，差異無(wú)顯（P＞0.05），可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。糖尿病腎病模型的建立為建立糖尿病腎病的細(xì)胞模型，本實(shí)驗(yàn)以不同濃度的 AngII 分別培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，分別在不同的時(shí)間段用 ELISA 法檢測(cè)ed caspase-3 蛋白表達(dá)情況。以最終確定最佳糖尿病腎病細(xì)胞模血管緊張素 II 濃度和培養(yǎng)時(shí)間。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖 4.3、圖 4.4。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

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本文編號(hào)：2777999