【摘要】：目的建立新西蘭兔同種異體原位腎移植模型,采用經(jīng)腎動(dòng)脈順行持續(xù)低溫灌注與經(jīng)腎靜脈逆行持續(xù)低溫灌注的兩種方法保存兔移植腎并行腎移植手術(shù),觀察兩組術(shù)后血清肌酐、尿量、移植腎組織病理、移植腎組織中丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的表達(dá)水平,初步探討不同灌注方法對(duì)供腎質(zhì)量的影響,為臨床擴(kuò)大使用邊緣供腎提供新的策略和思路。方法1.建立熱缺血損傷后同種異體原位腎移植動(dòng)物模型:供體新西蘭兔左側(cè)腎動(dòng)脈阻斷45min形成供腎熱缺血損傷,采用順行持續(xù)低溫灌注與逆行持續(xù)低溫灌注兩種不同方法灌注2小時(shí)后,將其原位移植到受體,移植完成后切除受體右腎,術(shù)后使用環(huán)孢素A抗排斥,以此來完成實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷闹谱鳌?.健康成年新西蘭雄性兔60只,購買于南華大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室,體重2-3kg。采用隨機(jī)數(shù)字表法將兔分為兩組,順行持續(xù)低溫灌注組(A組)與逆行持續(xù)低溫灌注組(B組)每組30只,再于A、B兩組組內(nèi)隨機(jī)分為供體和受體兩組,每組各15只。比較順行灌注與逆行灌注兩種不同灌注組受體新西蘭兔術(shù)后第一天、術(shù)后第三天、術(shù)后第五天的血清肌酐水平及尿量情況;觀察術(shù)后第五天移植腎組織HE染色病理改變,并用分光光度法檢測(cè)移植腎組織MDA含量、SOD活力表達(dá)情況。結(jié)果1.血清肌酐變化情況:A組(順行灌注組)術(shù)后第一天、第三天、第五天血清肌酐值分別為(398.36±37.28)umol/L、(318.97±18.34)umol/L、(178.01±9.44)umol/L;B組(逆行灌注組)術(shù)后第一天、第三天、第五天血清肌酐值分別為(417.51±34.28)umol/L、(330.54±20.72)umol/L、(186.21±13.81)umol/L。逆行灌注組術(shù)后血清肌酐值與順行灌注組術(shù)后血清肌酐值進(jìn)行比較無明顯差別,P0.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.尿量變化情況:A組(順行灌注組)術(shù)后第1天、第3天、第5天尿量分別為(74.60±5.55)ml、(93.72±8.89)ml、(137.58±9.79)ml;B組(逆行灌注組)術(shù)后第1天、第3天、第5天尿量分別為(71.18±5.79)ml、(88.16±6.84)ml、(130.99±12.11)ml。逆行灌注組術(shù)后尿量與順行灌注組術(shù)后尿量進(jìn)行比較無明顯差別,P0.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.移植腎組織HE染色病理情況:A組(順行灌注組)、B組(逆行灌注組)術(shù)后第五天均可見腎小球及周圍毛細(xì)血管內(nèi)有少量微血栓物質(zhì)形成;腎小管管腔輕度擴(kuò)大;間質(zhì)有少許充血水腫和炎癥細(xì)胞分布;腎臟組織結(jié)構(gòu)基本清晰。4.采用分光光度法檢測(cè)移植腎組織MDA含量表達(dá)情況:A組(順行灌注組)與B組(逆行灌注組)術(shù)后第五天MDA含量分別為(6.65±0.60)nmol/mgprot和(7.02±0.55)nmol/mgprot。逆行灌注組術(shù)后MDA含量與順行灌注組術(shù)后MDA含量進(jìn)行比較,P0.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.采用分光光度法檢測(cè)移植腎組織SOD活力表達(dá)情況:A組(順行灌注組)與B組(逆行灌注組)術(shù)后第五天SOD活力分別為(369.35±35.37)U/mgprot和(349.13±31.96)U/mgprot。逆行灌注組術(shù)后SOD活力與順行灌注組術(shù)后SOD活力進(jìn)行比較無明顯差別,P0.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論逆行灌注法不僅同順行灌注法一樣可以保護(hù)移植腎的功能,而且還可以作為腎動(dòng)脈畸形、損傷的移植腎灌注不良時(shí)的一種補(bǔ)救灌洗措施。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R699.2
【圖文】：

正常新西蘭兔左腎

術(shù)前禁食 12h，自由飲水，避免影響術(shù)中操作和利于術(shù)后快速康復(fù)。術(shù)前 10 分鐘將 3mg/kg 肝素注入血液達(dá)到全身肝素化。2.3.2 術(shù)前麻醉采用 20%烏拉坦按 5ml/kg 劑量經(jīng)耳緣靜脈注射進(jìn)行全身麻醉，將新西蘭兔仰臥于手術(shù)臺(tái)上，頭用兔頭固定夾固定，四肢用繩套固定，用 70%酒精將手術(shù)器械浸泡消毒，手術(shù)區(qū)域常規(guī)用備皮刀備皮、絡(luò)合碘消毒 3 遍、鋪無菌手術(shù)單。2.3.3 移植供腎缺血模型沿腹部正中線作切口，依次切開皮膚、肌肉，打開腹腔 ，兩側(cè)組織用拉鉤牽拉固定，用濕紗布覆蓋腹腔臟器并向右側(cè)推開，顯露腹腔血管及左側(cè)腹膜后腎臟。沿左腎外側(cè)緣打開后腹膜，用濕棉簽及玻璃分針仔細(xì)分離腎周脂肪與筋膜，游離左側(cè)腎臟動(dòng)脈、靜脈至起始部，用 7-0 細(xì)絲線分別在腎臟動(dòng)、靜脈起始部予以結(jié)扎，并記錄 45min 熱缺血時(shí)間�？梢娔I臟顏色由紅變暗，建立熱缺血損傷供腎模型，模擬臨床 DCD 腎臟熱缺血過程。

管呈 15-30 度角用 24G 密閉式靜脈留置針穿刺，見回血后，降低角度再將穿刺針推進(jìn)少許，取出針芯后固定留置針，連接靜脈輸液器。用顯微剪刀在靠近腎動(dòng)脈起始結(jié)扎處將提起的腎動(dòng)脈剪斷，做灌注的流出口。將含有肝素的冷藏（0-4℃）高滲枸櫞酸鹽嘌呤溶液（HCA 液）500ml 通過靜脈輸液器向腎靜脈端進(jìn)行逆行持續(xù)灌注，設(shè)定灌注流速為 10-15ml/min，灌注壓力為 50cmH2O。灌注過程中用冰生理鹽水（0-4℃）持續(xù)冷敷腎臟，用棉簽自腎周向腎門輕撫腎臟，并用 50ml注射器將流出的液體及時(shí)抽吸干凈。灌注過程中可見供腎不斷變白，流出液由紅色轉(zhuǎn)為清亮，并持續(xù)到規(guī)定時(shí)間為止(整個(gè)過程約 2 小時(shí))。供腎灌注滿意后，分離左腎脂肪及筋膜，電凝并結(jié)扎左腎上腺靜脈及精索靜脈等交通分支。游離輸尿管直至近膀胱處剪斷，注意保留部分脂肪組織以利于血供。將腎動(dòng)脈（或腎靜脈）穿刺針取出，并將腎動(dòng)、靜脈在起始處剪斷，用 9-0尼龍線在靜脈開口處縫合一針用以標(biāo)記，將完全游離左腎迅速取出并置入腎臟保存液中保存?zhèn)溆谩?

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭傳東;逆行灌注保護(hù)心肌的研究現(xiàn)狀和發(fā)展[J];中國(guó)體外循環(huán)雜志;2003年03期

2 黃健斌;逆行灌注的應(yīng)用進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊(cè);1998年01期

3 方海寧;譚偉;吳鋒耀;羅又橋;許乃健;曹輝慶;賴紀(jì)昌;;低溫體外循環(huán)心肌逆行灌注下雙瓣膜置換術(shù)的臨床研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年04期

4 黃健斌;全身逆行灌注應(yīng)用進(jìn)展[J];福建醫(yī)藥雜志;1997年02期

5 BarnerHB;SchaperJ;趙強(qiáng);;冷停跳液逆行灌注后心肌超微結(jié)構(gòu)評(píng)價(jià)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊(cè);1993年04期

6 謝曉勇,何巍;逆行灌注心臟不停跳對(duì)心肌的保護(hù)[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期

7 林輝,馮旭,曾建業(yè),莫安勝,賀榜福,鄭寶石;逆行灌注心臟不停跳法對(duì)犬心肌的保護(hù)作用[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年06期

8 趙青,崔復(fù)霞,管玉龍,李治安;彩色多普勒血流顯像在深低溫循環(huán)逆行灌注腦保護(hù)實(shí)驗(yàn)研究中的血流監(jiān)測(cè)作用[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2002年10期

9 楊建峰,高立兵,徐振海;逆行灌注搶救主動(dòng)脈大量進(jìn)氣一例[J];中華麻醉學(xué)雜志;2001年08期

10 王志成;我國(guó)眼動(dòng)脈逆行灌注技術(shù)研究躋入世界先進(jìn)行列[J];今日科技;1999年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前9條

1 狄冬梅;張曉膺;蔣南清;錢永祥;高克柔;;上腔靜脈逆行灌注技術(shù)在急性夾層動(dòng)脈瘤手術(shù)中的應(yīng)用[A];第八屆華東六省一市胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

2 胡濱;侯生才;李輝;王洋;李彤;張振葵;苗勁柏;傅毅立;;LPD液順行逆行灌注在肺移植術(shù)中的肺保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（胸外科分冊(cè)）[C];2006年

3 喬會(huì)煌;任傳根;陳忠孝;徐象黨;陳成春;;大鼠靜脈系統(tǒng)逆行灌注成像研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文文摘匯編[C];2013年

4 唐令鳳;楊康;張玉霞;廖克龍;王海東;;上腔靜脈逆行灌注在深低溫停循環(huán)腦保護(hù)中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨2007中華醫(yī)學(xué)會(huì)胸心血管外科青年醫(yī)師論壇論文集心血管外科分冊(cè)[C];2007年

5 趙青;崔復(fù)霞;李治安;管玉龍;;彩色多普勒血流顯像在深低溫循環(huán)經(jīng)上腔靜脈逆行灌注腦保護(hù)實(shí)驗(yàn)研究中的血流監(jiān)測(cè)作用[A];2002年全國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2002年

6 高長(zhǎng)青;李伯君;肖蒼松;吳揚(yáng);馬曉輝;;改良Bentall手術(shù)的技術(shù)探討[A];全國(guó)心臟瓣膜外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

7 梅舉;張寶仁;郝家驊;徐志云;鄒良健;于偉勇;王志農(nóng);王連才;;主動(dòng)脈瓣心內(nèi)膜炎合并瓣周膿腫的外科治療[A];全國(guó)心臟瓣膜外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

8 胡濱;侯生才;李輝;張振葵;;LPD液對(duì)無心跳供體肺的保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（胸外科分冊(cè)）[C];2006年

9 姚志發(fā);張慶華;張臨杰;黎京芳;唐玉榮;寧曉華;李詠梅;向桂玉;;改進(jìn)供心保護(hù)防止冠狀血管病變的臨床研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨2007中華醫(yī)學(xué)會(huì)胸心血管外科青年醫(yī)師論壇論文集心血管外科分冊(cè)[C];2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 李旭;腦脊液生化指標(biāo)監(jiān)測(cè)下遠(yuǎn)端主動(dòng)脈灌注、腦脊液引流及靜脈逆行灌注對(duì)降主動(dòng)脈阻斷手術(shù)中脊髓缺血損害保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)與臨床研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2007年

2 林寶泉;經(jīng)下腔靜脈逆灌對(duì)腹腔重要臟器保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

3 姜萍萍;涎腺局部調(diào)節(jié)由防齲疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答的研究[D];山東大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 易麗明;逆行灌注法對(duì)兔移植腎MDA、SOD表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];南華大學(xué);2019年

2 王力;逆行灌注法對(duì)兔移植腎EGF、MPO表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];南華大學(xué);2019年

3 李斯?jié)?經(jīng)典原位肝移植術(shù)逆行灌注改良法的臨床實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 謝曉勇;逆行灌注心臟不停跳對(duì)減輕體外循環(huán)炎性反應(yīng)的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

5 朱奎;腎盂逆行灌注聯(lián)合腎周冰水降溫在后腹腔鏡腎部分切除術(shù)中對(duì)腎低溫保護(hù)的應(yīng)用研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2013年

6 李安潔;冠狀靜脈竇逆行灌注VEGF對(duì)兔心肌梗死模型心室肌細(xì)胞L型鈣電流的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2010年

7 吳星欣;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)心肌梗死后心臟功能修復(fù)的研究[D];首都醫(yī)科大學(xué);2015年

8 劉懷普;低溫NMDA受體拮抗劑MK-801逆行灌注對(duì)豬脊髓損傷的保護(hù)作用[D];中南大學(xué);2013年

9 朱有才;胸主動(dòng)脈夾層動(dòng)脈瘤的手術(shù)治療[D];浙江大學(xué);2004年

10 楊勝壯;心臟不停跳對(duì)重度主動(dòng)脈瓣狹窄并左心室肥厚心肌保護(hù)作用的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2770207