【摘要】：目的:預(yù)灌洗擬缺血腎以清除腎血管內(nèi)殘留細(xì)胞群及其他損傷性物質(zhì),探究預(yù)灌洗對(duì)腎臟功能、組織損傷的影響,以及腎內(nèi)巨噬細(xì)胞及其M1、M2亞型的表達(dá)情況。方法:健康SD雄性大鼠18只,分為假手術(shù)組(Sham)、缺血再灌注損傷組(IR)、預(yù)灌洗+缺血再灌注損傷組(PI+IR)(6只/組)。Sham:開腹后僅行左、右腎蒂的游離及右腎去除;IR;夾閉左腎蒂使之缺血60min后再恢復(fù)灌注24h,并去除右腎;PI+IR組:生理鹽水預(yù)灌洗左腎以清除腎血管殘留細(xì)胞等,余同IR組。術(shù)后24h收集血清及左腎用于檢測(cè)血清肌酐(Scr)、尿素(BUN)水平及腎臟病理、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況(HE染色);按試劑盒說明步驟檢測(cè)血清及腎臟過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;IHC-P法檢測(cè)腎臟低氧、凋亡、增殖相關(guān)蛋白,巨噬細(xì)胞及其相關(guān)趨化蛋白的表達(dá)(HIF-1α、Caspase3、PCNA、CD68、iNOS、IL-10、TNF-α、MIF、MCP-1);RT-PCR法檢測(cè)MIF、MCP-1m RNA含量;WB法檢測(cè)Caspase3、PCNA、TNF-α、MCP-1、CD68、iNOS、CD206的表達(dá)。結(jié)果:(1)18只模型存活16只,死亡2只,補(bǔ)做2只,最終死亡率10%。(2)病理結(jié)果:Sham組無明顯病理損傷;IR組損傷較重,腎小管結(jié)構(gòu)破壞、排列紊亂伴間質(zhì)水腫及大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),腎小管上皮細(xì)胞腫脹、脫落甚至壞死;PI+IR組腎小管結(jié)構(gòu)及間質(zhì)破壞較輕,伴少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。病理評(píng)分:IR組病理評(píng)分明顯高于Sham組(P0.05);與IR組比較,PI+IR組病理評(píng)分降低(P0.05)。(3)腎功能:Scr、BUN水平在Sham組較低,IR組較之顯著升高(P0.05);與IR組比較,PI+IR組Scr、BUN有所降低(P0.05)。(4)CAT、SOD:Sham組CAT含量較低,SOD含量較高;與Sham組比較,IR組CAT水平升高,SOD水平降低(P0.05);與IR組比較,PI+IR組CAT、SOD水平均明顯升高(P0.05)。(5)HIF-1α、Caspase3、PCNA:在Sham組表達(dá)較低,在IR組表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05);與IR組比較,HIF-1α、Caspase3在PI+IR組表達(dá)下調(diào)(P0.05),PCNA在PI+IR組表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05)。(6)MCP-1、MIF蛋白及其m RNA含量、TNF-α蛋白表達(dá):在Sham組表達(dá)較低,在IR組明顯上調(diào)(P0.05);與IR組比較,在PI+IR組的表達(dá)降低(P0.05)。(7)CD68+巨噬細(xì)胞數(shù)量及其蛋白表達(dá):在Sham組表達(dá)較低,在IR組表達(dá)上調(diào)(P0.05);與IR組相較,二者在PI+IR組的表達(dá)降低(P0.05)。(8)iNOS、CD206、IL-10:在Sham組表達(dá)較低,在IR組表達(dá)上調(diào)(P0.05);與IR組比較,iNOS在PI+IR組表達(dá)降低(P0.05),CD206及IL-10在PI+IR組表達(dá)明顯增加(P0.05)。結(jié)論:(1)預(yù)灌洗可明顯改善RIRI模型腎臟的病理與功能損傷。(2)預(yù)灌洗可促進(jìn)RIRI模型腎臟抗氧化功能及腎小管上皮細(xì)胞增殖修復(fù),改善缺氧微環(huán)境及減輕炎癥反應(yīng)程度。(3)預(yù)灌洗可減少RIRI模型腎組織內(nèi)巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn),減少巨噬細(xì)胞向促炎性M1亞型的極化,增加其向促進(jìn)抗炎性M2亞型的極化。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R692
【圖文】：

pared with Sham Group P＜0.05,#Compared with IR Group P＜0.05.圖 2 各組大鼠 Scr、BUN 水平比較Fig.2 The Comparison of surem creatinine and urea levels among the three 洗對(duì)腎臟病理學(xué)的影響

注：A：Sham B：IR C：PI+IR圖 3 各組大鼠腎組織HE染色（×400）Fig.3 Renal tissue by HE stains among the three groups (×400)2.3.2 病理損傷評(píng)分結(jié)果

Note:*Compared with Sham Group P＜0.05,#Compared with IR Group P＜0.05.圖 5 各組大鼠血清、組織 CAT 及組織 SOD 水平比較Fig.5 The Comparison of CAT and SOD levels among the three groups2.5 預(yù)灌洗對(duì)腎臟缺氧、細(xì)胞凋亡、增殖相關(guān)蛋白表達(dá)的影響2.5.1 IHC-P 法檢測(cè) HIF-1α、Caspase3、PCNA 蛋白的表達(dá)

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本文編號(hào)：2745660